江门地区老年性白内障患者结膜囊带菌状况的调查

叶群如　黎小妮　高丽丽

【摘要】 目的：了解江门地区50岁以上老年性白内障患者结膜囊带菌状况，分析细菌构成和对药物的敏感性。方法：选择2016年6-10月在本院住院的50歲以上的老年性白内障患者707例1414眼，在结膜囊无菌化准备前，采集结膜囊标本做细菌培养及药敏试验。结果：送检1414份标本中，有菌生长106眼（7.5%），其中91眼（6.4%）有细菌生长，15眼（1.1%）有真菌生长。不同性别、眼别、年龄，结膜囊细菌检出率比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。不同月份、不同居住地的结膜囊细菌检出率比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。阳性标本中各菌种的构成比为，G+球菌75.5%（80/106），G+杆菌7.5%（8/106），G-杆菌1.9%（2/106），G-球菌0.9%（1/106），真菌14.2%（15/106）。药物敏感试验结果显示，大多数G+球菌对克林霉素、妥布霉素、万古霉素敏感，对林可霉素和诺氟沙星耐药。整体而言，万古霉素、左氧氟沙星的耐药率较低。结论：江门地区50岁以上老年性白内障患者结膜囊可能带有病原菌，并以G+球菌为主。大多数细菌对万古霉素和耐药的左氧氟沙星敏感。

【关键词】 结膜囊； 细菌培养； 药物敏感试验

Investigation Bacterial Species of Conjunctiva Sacs of Patients with Senile Cataract in Jiangmen District/YE Qun-ru，LI Xiao-ni，GAO Li-li. //Medical Innovation of China，2017，14（17）：071-074

【Abstract】 Objective：To analyze the situation of conjunctival sac carrier in patients over 50 years old with senile cataract in the area of Jiangmen Method：A total of 707 patients of 1414 eyes with senile cataract aged over 50 years who admitted to our hospital from June to October in 2016 were selected. Before the preparation of conjunctival sac， specimens of conjunctival sac were collected for bacterial culture and drug sensitivity test.Result：Among 1414 pieces of inspected specimens， 106 eyes（7.5%） were bacterial growth.Among them，

91 eyes（6.4%） were bacterial growth bacteria and 15 eyes（1.1%） were fungal growth.There had no significant differences in the comparison regarding different sex，eyes，ages，and the detection rate of conjunctival sac bacteria（P>0.05）.The bacterial detection rate of conjunctival sac in different months and different places were statistically significant（P<0.05）.The constituent ratios of different bacteria in the positive samples were G+ cocci 75.5%（80/106），G+ bacillus 7.5%（8/106），G- bacillus 1.9%（2/106），G- cocci 0.9%（1/106），and fungi 14.2%（15/106）.It can be seen from the drug sensitivity test that most G+ coccus was sensitive to Clindamycin，Tobramycin，and Vancomycin and most G+ coccus was drug resistive to Lincomycin and Norfloxacin.Overall，the rates of drug resistance to Vancomycin and Levofloxacin were low.Conclusion：Pathogenic bacteria may be found in conjunctiva sacs among patients with senile catarace aged over 50 years in Jiangmeng District.The dominant bacteria are G+ coccus.Most of bacterias are sensitive to Vancomycin and Levofloxacin.

【Key words】 Conjunctival sac； Bacterial culture； Drug susceptibility test

First-authors address：Jiangmen Xinhui New Hope Eye Hospital，Jiangmen 529100，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.17.018

江门地区地处南亚热带季风气候，高温多雨，夏季可长达七八个月。高温高湿的气候环境为病原菌的生长繁殖提供了有利的条件[1]。同时，因日照时间长，广东地区老年性白内障发病率很高，每年都有数以万计的患者接受手术治疗。一般认为，正常人结膜囊均不同程度存在病原微生物，主要是条件致病菌[2]。已有研究表明这些细菌是引起手术后感染的主要病原体[3-4]。因此，了解本地区结膜囊细菌分布，对指导本地区白内障围手术期用药、术前结膜囊无菌化准备及预防术后眼内炎的发生，具有非常重要的现实意义。本院就2016年6-10月江门地区50岁以上老年性白内障患者707例1414眼取结膜囊拭子做细菌培养及药敏试验，现报告如下。

1 对象与方法

1.1 对象 2016年6-10月江门地区（蓬江区、新会区、鹤山、开平）50岁以上老年性白内障患者707例1414眼。年龄50～95岁，平均（72.5±7.3）岁，中位年龄73岁。其中男318例636眼，女389例778眼。纳入标准：患者年龄均在50岁以上，经检查符合临床白内障诊断标准[5]，无言语障碍、手术禁忌证及用药禁忌证、资料不全者，术前经患者签署知情同意书。排除标准：患者经检查发现内分泌疾病、身体重要器官功能性障碍，精神疾病史以及感染性眼病（包括结膜炎、泪腺炎、角膜炎等）。

1.2 方法

1.2.1 标本采样 患者取坐位，头向后仰，眼向上方注视，充分暴露下穹隆部，将蘸有生理盐水的棉拭子放置于下穹隆中外1/3交界部，向内眦部旋转擦拭，避免接触睫毛和睑缘造成污染。

1.2.2 细菌培养、鉴定 将采集有结膜囊标本的棉拭子涂布于培养基上，立即送微生物划线接种培养。在37 ℃含5%CO2恒温孵箱中进行孵育2 d，观察并记录细菌生长情况。如72 h无细菌生长者为阴性，如发现细菌生长，则将出现菌种的标本接种于另一块血琼脂培养基上进行分离[6]。本次培养操作均严格按照《全国临床检验操作规程》要求进行培养，后行菌种鉴定及药敏试验。使用全自动细菌分析仪（型号Vitek2-compact 30生物梅里埃公司有限股份公司法国），以及VITEK32鉴定卡进行鉴定。使用药敏卡（AST-GN13）对病菌进行药敏分析，本次检测所有操作且质控结果需符合国际临床实验室标准委员会（CLSI）标准。

1.2.3 抗菌藥物 本次对菌种进行药敏试验使用的常规抗菌药物，包括克林霉素、头孢他啶、林可霉素、诺氟沙星、万古霉素、左氧氟沙星、妥布霉素。

1.2.4 治疗方法 在了解患者菌种类型以及药敏试验后，为确保泪道通畅，术前以生理盐水冲洗泪道，清除分泌物，并在术前1 d使用左氧氟沙星眼液，1次/h滴于患眼，同时对眼周皮肤、睑缘以5%聚维酮碘消毒，以0.5%聚维酮碘消毒结膜囊。

1.3 观察指标 由专业人员制定统一问卷对调查对象一般资料进行统计，内容包括性别、居住地区、民族、职业、发病月份、发病眼睛、年龄、病史以及生活习惯、环境等。

1.4 统计学处理 全部数据录入计算机，采用SPSS 20.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料以率（%）表示，比较采用 字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 结膜囊细菌阳性率影响因素 送检1414份标本中，共培养出阳性细菌91份，阳性率为6.4%（91/1414）；真菌15份，阳性率为1.1%（15/1414）。总阳性率为7.5%（106/1414）。细菌培养结果显示，细菌阳性率与性别、眼别、年龄无关，差异均无统计学意义（P>0.05），结膜囊细菌阳性率与患者居住地、检查月份有关，差异均有统计学意义（P<0.05）。

2.2 结膜囊细菌中菌种构成 106份阳性标本中，阳性率最高的是G+球菌（75.5%），其中表皮葡萄球菌检出率最高为55.7%，其次为微球菌属检出率为9.4%；真菌阳性率为（14.2%）、G+杆菌（7.5%），其中棒状杆菌检出率较高为4.7%，G-菌检出率较低，G-杆菌阳性率为1.8%、G-球菌阳性率为0.9%。

2.3 结膜囊细菌对常见抗菌药敏感情况统计 药物敏感性试验表明，大多数G+球菌对克林霉素、妥布霉素、万古霉素敏感，对林可霉素和诺氟沙星耐药。整体而言，万古霉素、左氧氟沙星的耐药率较低，见表3、4。

3 讨论

随着白内障疾病发病率逐年上升，每年行白内障手术治疗者不断增加，导致术后感染情况发生几率增加，有研究表明，患者主要致病菌为结膜囊存在的病原微生物，因此为减少术后感染发生，了解本地区结膜囊细菌分布，对术前结膜囊无菌化准备以及术后眼内炎预防有重要意义[7-9]。既往研究显示，结膜囊带菌量、细菌种类和耐药性受到性别、年龄、局部或系统性疾病、抗生素的使用、居住地，甚至季节等多重因素的影响，但随着抗生素的广泛应用，结膜囊带菌率在降低，菌种、耐药性也在变化[10]。

本次研究通过抽取不同地区老年性白内障患者进行调查，发现不同地区结膜囊细菌阳性率不同，结膜囊细菌阳性率与患者性别无关，这与部分文献报道不同，但有文献报道结膜囊细菌检出率随年龄增加[11-12]。本次调查对象为50～95岁老年性白内障患者，但结果表明结膜囊细菌阳性率与患者年龄无明显关系，但数据显示患者随年龄增加结膜囊细菌阳性率有增加的趋势。人体眼部由于有结膜、角膜上皮保护，同时有溶菌酶的水解以及角结膜表层泪液冲洗等，正常情况不易受到病菌感染，但老年者感染率岁年龄增加有上升趋势，我们推测可能与老年人随着年龄增长抵抗力下降、普遍泪膜稳定性变差，结膜囊自洁能力的减弱以及泪液中各种抗体、补体、乳铁蛋白等防御性功能降低有关[13-14]。且老年者随着年龄增加会有行动不便情况，因此有可能在卫生清洁这方面较差，泪道阻塞等外眼疾病发病率较高，造成老年者易受到感染。同时白内障疾病主要行手术治疗，而这些手术需通过结膜囊径路，一旦细菌通过房水进入眼内，而机体无法抵抗，就会造成免疫失衡，引发炎症疾病。因此对老年患者，内眼手术前结膜囊的无菌化准备应引起高度重视，尤其在开展大规模防盲治盲白内障手术时，要特别关注老年人结膜囊带菌状况，并给予适当的干预，不仅如此在白内障治疗术中、术后各个环节也要做好预防措施，减少术后眼内炎发生。

石明华等[15]报道了不同季节结膜囊细菌培养阳性率的差异有统计学意义，以春夏季节细菌培养阳性率高。本次调查发现在6-10月江门地区中老年人结膜囊细菌阳性率不同，且差异有统计学意义（P<0.05），细菌检出率以6月份最高，这可能与外部环境如气温、空气湿度等影响有关。

一项关于中国人结膜囊细菌培养的Meta分析研究结果表明，G+球菌、G+杆菌、G-杆菌常见，其平均检出率分别为27.90%、8.96%、2.70%，构成比分别为70.59%、20.09%、7.17%[16]。G-球菌少见，偶见真菌[17]。本文细菌培养结果显示，G+球菌是结膜囊内的主要寄生菌，其检出率为6.4%，构成比为75.5%。排在第二位的是真菌，其检出率为1.1%，构成比达到14.2%。同时G+球菌中以表皮葡萄球菌检出率最高为55.7%，其次为微球菌属为9.4%，G+杆菌以棒状杆菌检出率较高为4.7%，宋林等[18]学者对新疆哈萨克族白内障患者术前结膜囊细菌培养，结果G+球菌检出率为88.3%，其中以葡萄球菌最多为66.4%，其次为微球菌属9.8%。此次研究得出的结果低于文献报道，这可能与气候、采样季节、环境卫生、抽样人群及检查方法不同有关，但结果显示白内障致病菌以革兰阳性细菌为主，且表皮葡萄球菌为主要致病菌与本次研究结果相符。在本次菌种鉴定中存在致病菌如金黄色葡萄球菌，但多数细菌为正常菌种、条件致病菌（如表皮葡萄球菌、棒状杆菌等），G+球菌一般情况下常见条件致病菌是无致病性，但近些年由于广谱抗菌药物滥用等情况，导致病菌致病力及种类发生变化，这些病菌可能隐藏域晶状体囊袋中在手术中进入玻璃体后繁殖引发炎症，或因手术患者抵抗力下降、眼表微环境破坏后造成条件菌引发感染，因此术前无菌化准备以及术后预防措施是有必要性的[19-20]。

本次对江门地区50岁以上老年性白内障患者结膜囊带菌状况分析，发现50岁以上带有病原菌可能较大，且以G+球菌为主，大多数细菌对万古霉素和耐药的左氧氟沙星敏感，通过研究认识结膜囊细菌分布，对于预防和治疗眼部感染性疾病具有极其重要的意义。目前，由于地域、年龄、抗生素应用情况的差异、纳入标准及培养基的不同、取材部位和方法的多样性、样本数量的差异等因素的影响，使得培养结果之间存在较大差异。因此，有必要统一培養标准，进行多中心协作，全面持续地监测结膜囊正常菌群的变迁。

参考文献

[1]石明华，胡楠，褚少朋，等.季节对结膜囊带菌状况的影响[J].临床眼科杂志，2008，16（1）：47-49.

[2]朱力，沈念慈，陈华洁，等.老年人内炎手术前结膜囊细菌培养的分析[J].眼外伤职业眼病杂志，2004，26（3）：156-158.

[3]刘静，谢汉平，吴力克，等.重庆市不同年龄健康人结膜囊需氧菌定性及定量研究[J].第三军医大学学报，2009，31（10）：682-688.

[4]刘治容，张悦，董万江，等.羌族中老年人结膜囊细菌状况调查[J].实用医院临床杂志，2010，7（5）：60-62.

[5]陆琼，周佳.白内障术前结膜囊细菌培养及药物敏感性[J].临床眼科杂志，2013，21（6）：530-531.

[6]胡继发，欧阳文博，邓坤明，等.结膜囊成形术治疗结膜囊缩窄70例临床分析[J].中华眼外伤职业眼病杂志，2016，38（1）：42-44.

[7]徐欢欢，程莹莹，赵长霖，等.中国白内障人群术前结膜囊细菌培养结果的Meta分析[J].国际眼科杂志，2014，14（1）：100-102.

[8]聂昕，谯雁彬，陈西嘉，等.糖尿病并发白内障患者手术前后结膜囊菌群分析[J].中华医院感染学杂志，2016，26（5）：1064-1066.

[9]刘梦阳，孙士营，曾庆延.结膜囊正常菌群与眼部细菌感染的关系[J].中国感染与化疗杂志，2007，7（1）：48-52.

[10]许立军，王一，伍宛苏，等.1100眼白内障术前结膜囊细菌培养分析[J].第三军医大学学报，1996，18（4）：93-94.

[11]曹奎，张悦，董万江，等.绵阳市中老年人结膜囊细菌状况调查分析[J].四川医学，2010，31（8）：1042-1044.

[12]郑红，张悦，多吉，等.甘孜州彝族中老年人结膜囊细菌状况调查[J].实用医院临床杂志，2011，8（5）：70-72.

[13]孙士营，翟华蕾，谢立信.白内障术前结膜囊细菌培养结果及药敏变化[J].中国实用眼科杂志，2005，23（5）：509-513.

[14]宋林，姚春华，尚丽霞，等.哈萨克族中老年人结膜囊带菌情况调查分析[J].中华眼外伤职业眼病杂志，2015，37（1）：59-61.

[15]石明华，胡楠.术后眼内炎及其预防的研究进展[J].眼科新进展，2006，26（9）：716-719.

[16]张小平，叶剑.近13年中国人结膜囊细菌培养结果文献回顾与相关调查因素的Meta分析[J].中国实用眼科杂志，2005，23（4）：428-431.

[17]夏桂兰，栾洁.正常结膜囊带菌情况分析[J].东南大学学报（医学版），2010，29（5）：535-538.

[18]宋林，姚春华，魏文斌，等.新疆哈萨克族白内障患者术前结膜囊细菌培养及药敏试验分析[J].国际眼科杂志，2015，15（3）：528-530.

[19]杨砚亭，卢国华.应用抗菌药物降低结膜囊细菌量的临床研究[J].中国感染控制杂志，2014，13（11）：674-676.

[20]黄怀洁，牛梅民，杨怡，等.白内障围术期用药与术后感染相关性探讨[J].中国医药导报，2014，11（1）：52-54.

（收稿日期：2017-04-14） （本文编辑：程旭然）