EGFR和自噬标记蛋白Beclin1在宫颈癌组织中的表达及意义

邬 琳 郭金珠



EGFR和自噬标记蛋白Beclin1在宫颈癌组织中的表达及意义

邬 琳 郭金珠

目的 分析表皮生长因子受体1(EGFR)和自噬标记蛋白Beclin1在宫颈癌组织中的意义。方法 子宫颈癌患者癌组织标本50例，行全子宫切除术的正常组织标本20例，宫颈上皮内瘤变(CIN)病变组织标本19例，比较3组标本中EGFR和Beclin1的表达阳性情况、宫颈癌临床资料与EGFR和Beclin1表达的关系。结果 EGFR表达阳性率以宫颈癌组最高，其次为CIN组，正常对照组最低(P<0.05)，Beclin1的表达阳性率以宫颈癌组最低，其次为CIN组，正常对照组最高(PP<0.05)，Beclin1表达阳性率与是否发生淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论 EGFR和Beclin1表达与宫颈癌的发生发展有关，且Beclin1表达与是否发生淋巴结转移密切相关。

宫颈癌；EGFR；自噬标记蛋白Beclin1

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1079～1081)

子宫颈癌是威胁我国乃至全球女性健康的重要问题，是最常见的女性恶性肿瘤之一，其在我国的发病率约占女性生殖系统恶性肿瘤的1/2，发病人群呈年轻化趋势[1]。宫颈癌临床治疗方案的选择主要依据其临床分期，早期患者(Ⅰa～Ⅱa)以手术治疗为主，Ⅱb级以上以放化疗为主[2]。宫颈癌患者的5年生存率与早期诊断和治疗密切相关，早期宫颈癌患者经手术治疗后，5年生存率可达90%[3]。因此探究宫颈癌发生和发展过程中的分子生物学特征，发现新型肿瘤标志物，以期为宫颈癌的早期诊断、预防和指导治疗提供参考成为目前全球相关领域的研究热点[4]。EGFR即表皮生长因子受体1，在多种肿瘤的侵袭和转移中发挥重要作用[5]。自噬即细胞降解被损害的蛋白质和细胞的过程，自噬标记蛋白Beclin1在机体自噬泡的形成过程中发挥中要作用[6]。因此本研究拟分析EGFR和自噬标记蛋白Beclin1在宫颈癌组织中的表达以及与宫颈癌患者临床资料的关系，以期为进一步阐明两者与宫颈癌的发生和发展的关系提供参考。

1 材料与方法

1.1 一般资料

2010年1月至2016年10月陕西省西电集团医院妇产科收治的子宫颈癌患者50例，纳入标准：经病理确诊为子宫颈鳞癌，行宫颈癌根治术并收集了癌组织标本，病历资料完整，术前均未接受过放、化疗。50例患者年龄28～75岁，平均(45.8±65.71)岁。另收集因子宫肌瘤或腺肌瘤行全子宫切除术的20例患者的正常组织标本，年龄26～73岁，平均(46.5±15.52)岁，收集宫颈上皮内瘤变(CIN)患者19例的病变组织标本(CIN组)，年龄25～58岁，平均(43.5±14.66)岁，其中CIN Ⅰ期4例，Ⅱ期10例，Ⅲ期6例。3组患者的一般资料比较，P>0.05。

1.2 方法

免疫组化方法检测标本中EGFR和蛋白Beclin1的表达：每个病例的标本两张切片，所有标本经常规固定、石包埋和切片、烤箱过夜、脱蜡、脱水、水化、室温孵化、高压热修复，非免疫性山羊血清封闭后加入一抗(抗人EGFR抗体或自噬标记蛋白Beclin1抗体)，一抗的阴性对照采用磷酸盐缓冲溶液。每张切片结果判读由两名病理医师盲读，根据染色范围和强度评分综合判定，EGFR和自噬标记蛋白Beclin1均在胞质中表达，阳性表达呈棕黄色染色，染色强度：无染色、淡黄色、黄色、棕黄色分别计0～3分；染色阳性细胞数：无阳性细胞数0分，<30%为1分，≥30%为2分。2项评分相乘，阴性：0～1分，阳性：2～6分。

1.3 观察指标

①EGFR和Beclin1在3组中表达阳性情况；②分析宫颈癌患者临床资料与EGFR和自噬标记蛋白Beclin1表达阳性率的关系。

1.4统计学方法

应用SPSS 17.0软件，计数资料以百分率表示，采用卡方检验，P<0.05为差异显著。

2 结果

2.1 EGFR和Beclin1表达

3组EGFR和Beclin1表达阳性率比较，差异显著(P<0.05)，其中EGFR表达阳性率以宫颈癌组最高，Beclin1表达阳性率以宫颈癌组最低，见表1。

表1 3组中EGFR和Beclin1的表达情况(例，%)

注：与正常对照组比较，①为P<0.05；与CIN组比较，②为P<0.05。

2.2 EGFR表达与宫颈癌临床病理资料的关系

EGFR表达阳性率与宫颈癌临床病理参数均无显著相关性(P>0.05)，见表2。

表2 EGFR表达与宫颈癌临床病理参数的关系(例，%)

2.3 Beclin1与宫颈癌临床病理参数的关系

Beclin1表达阳性率仅与是否发生淋巴结转移显著相关(P<0.05)，见表3。

表3 Beclin1表达与宫颈癌临床病理参数的关系(例，%)

3 讨论

子宫颈癌从宫颈的癌前病变到最终发展为宫颈癌需要几年甚至几十年，因此早期诊断对宫颈癌的预防和控制至关重要[7]。高危型人乳头瘤病毒(HIV)被认为是宫颈癌的主要危险因素，另外还包括沙眼衣原体、单纯疱疹病毒等，但是仅HIV等病毒感染并不是促进宫颈癌发生发展的唯一因素[8]。目前临床对于宫颈癌的发生机制仍不十分清楚，但近年来，人们从c-Met、PGRB、SALL4等原癌基因，PTEN、LKB1、LRIG1等抑癌抗癌，核糖体蛋白L6、K-ras、Prdx4、C-myc/TNFAIP8等凋亡相关基因，丝裂原激活细胞外信号调节激酶细胞、Hedgehog(Hh)等信号传导系统等方面，对肿瘤的发生和发展进行了分子生物水平的重新认识，认为肿瘤的形成是一个长期的、多阶段、多基因、多步骤累积作用的结果[9-10]，可能与miRNA 在宫颈癌不同阶段的的调节基因表达作用异常，染色体变异，低氧、低pH和高组织间隙液压的肿瘤微环境等关系密切。

自噬是1种高度保守的依赖于溶酶体的降解途径，通过对损坏的、错误折叠的蛋白质、衰老或损伤的细胞器进行讲解，以完成细胞本身的代谢和更新过程，是真核细胞的特有生命现象，自噬活性异常与多种恶性肿瘤的发生和发展相关[11]。Beclin1蛋白是细胞自噬和凋亡途径的重要蛋白质，通过与抗凋亡蛋白或促凋亡蛋白结合形成复合物，调控细胞的自噬活性，众多临床研究表明，Beclin1蛋白的低表达与多种恶性肿瘤的发生和发展密切相关，如肝癌、卵巢癌、结直肠癌等[12-13]。EGFR是原癌基因的表达产物，EGFR与表皮生长因子、转化生长因子等配体结合后，引起细胞内络氨酸残基的磷酸化，通过信号传导影响细胞的周期和凋亡，参与并控制细胞的存活、迁移、侵袭、转移和血管的生成。EGFR高表达现象在众多实体肿瘤中已较常见[14]。本研究同样显示，EGFR的表达阳性率以宫颈癌组最高，其次为CIN组，正常对照组最低，Beclin1的表达阳性率以宫颈癌组最低，其次为CIN组，正常对照组最高，与相关研究[15-16]基本一致，提示EGFR和Beclin1与宫颈癌的发生发展关系密切。

EGFR、Beclin1与宫颈癌患者临床资料的相关性研究目前临床中较少见，且结果不尽相同[15-17]。因此本研究的主要目的为：为临床评价EGFR和Beclin1在宫颈癌中的价值提供更加丰富的临床资料，结果显示，仅Beclin1与宫颈癌患者是否发生淋巴结转移显著相关，提示Beclin1的表达降低可能促进了宫颈癌的淋巴结转移。

综上所述，EGFR、Beclin1与宫颈癌的发生发展有关，且Beclin1与淋巴结转移密切相关。

[1] Obel J,Souares Y,Hoy D,et al.A systematic review of cervical cancer incidence and mortality in the Pacific Region〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev,2014,15(21):9433-9437.

[2] Crafton SM,Salani R.Beyond Chemotherapy:An Overview and Review of Targeted Therapy in Cervical Cancer〔J〕.Clin Ther,2016,38(3):449-458.

[3] 李秀娟,蔡建兴,黄革玲.宫颈癌早期诊断技术的研究进展〔J〕.武警医学,2014,23(2):632-634.

[4] 宋妮娜,瞿全新.宫颈上皮内瘤变分子生物学指标的研究进展〔J〕.国际妇产科学杂志,2016,43(5):524-527.

[5] 孙栋勋,蔡志毅.EGFR/PI3K/Akt细胞信号传导通路与肿瘤〔J〕.检验医学,2014,29(7):768-773.

[6] 张 晶,舒丽莎,张林西.自噬通路中mTOR和Beclin1与肿瘤关系的研究进展〔J〕.河北医药,2016,38(18):2837-2840.

[7] Teichman P.Cervical cancer screening〔J〕.J Midwifery Womens Health,2015,60(2):229-230.

[8] 程 静,潘光鑫,周素,等.宫颈癌发病机制的探讨〔J〕.中国妇幼保健,2014,29(28):4545-4547.

[9] 张怀念,张咏莉.宫颈癌分子遗传机制及其相关基因功能研究〔J〕.安徽医药,2015,19(2):219-221.

[10] 李乐赛,李梅花,张 弦,等.HPV16 E6对宫颈癌 E-cadherin 表达水平和基因甲基化的影响〔J〕.湖南师范大学学报(医学版),2016,13(4):1-4.

[11] Jin SM,Jang HW,Sohn SY,et al.Role of autophagy in the resistance to tumour necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand-induced apoptosis in papillary and anaplastic thyroid cancer cells〔J〕.Endocrine,2014,45(2):256-262.

[12] 杨 威,杨红杰,莫瑞祥,等.Beclin1在人肝癌组织中的表达及TGF-β对肝癌细胞增殖的影响〔J〕.国际检验医学杂志,2015,36(1):108-109.

[13] Cai M,Hu Z,Liu J,et al.Beclin 1 expression in ovarian tissues and its effects on ovarian cancer prognosis〔J〕.Int J Mol Sci,2014,15(4):5292-5303.

[14] Wang Q,Qi Y,Zhang D,et al.Electrolyte disorders assessment in solid tumor patients treated with anti-EGFR monoclonal antibodies:a pooled analysis of 25 randomized clinical trials〔J〕.Tumour Biol,2015,36(5):3471-3482.

[15] 黄必飞,王超群,赵永明,等.宫颈癌中EGFR蛋白表达及其临床病理意义〔J〕.浙江医学,2016,38(2):99-101.

[16] Cheng HY,Zhang YN,Wu QL,et al.Expression of beclin 1,an autophagy-related protein,in human cervical carcinoma and its clinical significance〔J〕.Eur J Gynaecol Oncol.,2012,33(1):15-20.

[17] Wang YJ,Jing Z,Huo JL,et al.Correlation between Beclin1 Protein Expression and Cervical Cancer Risk:A Meta-Analysis〔J〕.J Evid Based Med,2014,14(7):798-805.

(编辑：吴小红)

Expression and Significance of EGFR and Autophagy Marker Protein Beclin1in Human Cervical Cancer

WULin，GUOJinzhu.Xi’anXdGroupHospital,Xi’an,710077

Objective To investigate the expression and significance of EGFR and autophagy marker protein Beclin1 in human cervical cancer.Methods 50 cases of patients with cervical cancer,collected carcinoma tissue samples,and collected specimens of normal tissues from 20 patients underwent total hysterectomy (control group),and the tissues of cervical intraepithelial neoplasia(CIN) from 19 patients were collected.Compared the expression of EGFR and autophagy marker protein Beclin1in among the 3 group.Results Positive rates of EGFR was the highest in cervical cancer,second highest in CIN group and and the lowest in the control group (P<0.05);the positive rate of Beclin1 was the highest in the control group,second highest in CIN group and and the lowest in cervical cancer (P<0.05),positive rate of Beclin1 showed significant correlation with lymph node metastasis(P<0.05).Conclusion Expression of EGFR and Beclin1 are associated with the development of cervical cancer,and Beclin1 positive expression is closely related to lymph node metastasis.

Cervical cancer;EGFR；Autophagy marker protein beclin1

710077 陕西省西电集团医院

郭金珠

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.07.011

R737.33

A

1001-5930(2017)07-1079-03

2017-01-17

2017-03-17)