血流感染病原菌分布、耐药性及与降钙素原相关性分析

樊海燕,叶绥艳,刘晓莺

陕西省榆林市第一医院检验科(榆林 719000)

△通讯作者

血流感染病原菌分布、耐药性及与降钙素原相关性分析

樊海燕,叶绥艳,刘晓莺△

陕西省榆林市第一医院检验科(榆林 719000)

目的：探讨血培养病原菌的分布及药敏特点，分析血流感染患者降钙素原 (PCT)与非血流感染者的差别。方法：收集住院患者血培养阳性标本所分离的病原菌，鉴定菌株，并进行药敏试验；同时以血培养阳性患者为感染组，350例血培养阴性患者作为对照组，检测并比较两者PCT结果。结果：共分离病原菌472株，革兰阴性杆菌278株(58.9%)，其中马耳他布鲁菌21株；革兰阳性球菌176株(37.2%)；念珠菌18株(3.8%)。大肠埃希菌产ESBLs菌株58株(54.7%)，肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株20株(45.5%)；MRCNS的41株(45.5%)，MRSA的4株(18.2%)，两者均无对利奈唑安、替考拉宁、万古霉素耐药菌株。感染组PCT为(6.21±5.62)μg/L高于对照组PCT的(0.26±0.17)μg/L(P<0.01)。结论：血培养病原菌分布呈多样性，革兰阴性菌多于革兰阳性菌，并且具有地域特色；细菌多重耐药率高，主要以产ESBLs阴性杆菌及耐甲氧西林的葡萄球菌为主；感染组PCT结果明显高于对照组。

血流感染是病原菌进入血液循环所引起的危及生命的全身感染性疾病。随着医疗技术的不断发展，抗生素及侵入性检查的广泛应用，引起血流感染病原菌数量和种类不断增加[1]。血培养是诊断血流感染的主要方法，血培养阳性时结合血涂片染色结果、降钙素原 (PCT)等检查可及时提示临床采取相应措施，以减少感染性休克的发生及降低病死率[2]。本研究对我院2014年9月至2016年9月血培养所分离病原菌分布及药敏试验结果进行分析，同时选取血流感染患者PCT结果与血培养阴性患者PCT结果进行比较，以期对临床用药提供参考。

资料与方法

1 一般资料 菌株来源于我院2014年9月至2016年9月住院患者血培养阳性标本共472例，其中男283例，女189例，平均年龄(40.5±16.8)岁，剔除同一患者重复菌株及单次单瓶阳性菌株，对所收集菌株进行培养、分离、鉴定及药物敏感性试验；将472例血培养阳性患者全部纳为感染组，另选350例血培养阴性患者为对照组，对照组中男221例，女129例，平均年龄(35.6±12.3)岁，检测并比较两组患者PCT结果。

2 仪器与试剂 血培养仪为美国Remel公司的VERSA TREK血培养仪，梅里埃公司VITEK-2compact全自动细菌鉴定仪及配套试剂；药敏试验采用K-B纸片扩散法法，纸片购自温州康泰生物科技公司；CO2培养箱(HH-CP-7W型上海博迅实业有限公司医疗设备厂)；血琼脂平板及MH平板为郑州安图生物科技公司产品；PCT测定试剂盒为德国B.R.A.H.M.S GmbH产品，检测用深圳市华瑞科技有限公司免疫定量分析仪。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853和大肠埃希菌ATCC25922。

3 研究方法 ①血培养瓶阳性报警后记录各项信息，涂片革兰染色并转种相应的琼脂平板，置5%CO2培养箱孵育24～48 h。血培养阴性为培养瓶在放入血培养仪5×24 h未报阳性，涂片革兰染色未见细菌。②按照细菌鉴定的SOP对病原菌进行生化试剂鉴定、VITEK-2compact全自动细菌鉴定仪鉴定。③采用纸片扩散法(K-B法)对所分离病原菌进行药物敏感性试验，结果折点参照CLSI文件。④PCT检测方法：患者抽取血培养标本同时抽取3 ml静脉血注入促凝管送至实验室，分离血清检测PCT。检测原理为免疫色谱法分别收集血流感染组PCT结果与血培养阴性患者PCT结果，以PCT浓度大于0.5 μg/L为阳性。

4 统计学方法 采用WHONET 5.6和SPSS 18.0 统计学软件进行统计分析，数据采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 菌株分布 分离出病原菌472株，其中革兰阴性杆菌278株(58.9%)，革兰阳性球菌176株(37.2%)；念珠菌18株(3.8%)。革兰阴性菌中分离率前3位的为大肠埃希菌106株(22.5%)、肺炎克雷伯菌44株(9.3%)、木糖氧化产碱杆菌28株(5.9%)，其中检出1株非O1非139型霍乱弧菌及21株马耳他布鲁菌。革兰阳性菌中主要检出凝固酶阴性葡萄球菌共90株,其中包括溶血葡萄球菌48株(10.2%)、人葡萄球菌28株(5.9%)、表皮葡萄球菌14株(3.0%)，金黄色葡萄球菌22株(4.7%)，粪肠球菌及屎肠球菌各16株(3.4%)。

2 血培养主要革兰阴性细菌耐药情况 见表1。大肠埃希菌对阿米卡星、磷霉素、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁及头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较低均小于10%，耐药率最高的为氨苄西林(81.1%)。肺炎克雷伯菌对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低均小于10%，耐药率最高的为氨苄西林(100%)。

3 血培养主要革兰阳性细菌耐药情况 见表2。共检出凝固酶阴性葡萄球菌90株，金黄色葡萄球菌22株。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)41株(45.5%)，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)4株(18.2%)。凝固酶阴性葡萄球菌对阿米卡星及磷霉素耐药率较低；两者均未分离出对利奈唑安、替考拉宁、万古霉素耐药的菌株。

表1 血培养主要革兰阴性细菌耐药情况

表2 血培养主要革兰阳性细菌耐药情况

4 血流感染组与对照组PCT浓度比较 血流感染组472例，PCT浓度为(6.21±5.62)μg/L，对照组350例，PCT浓度为(0.26±0.17) μg/L，两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。

讨 论

血流感染是临床常见的高病死率的疾病，包括菌血症和败血症，其病死率高达27%～28%[3]。故而及时发现患者血流感染病原菌，提供病原菌的药敏试验结果帮助临床医生尽早进行目标抗菌治疗，可大大降低血流感染患者危重状况的发生，同时检测患者PCT，对于评估严重败血症患者的预后有很大的临床价值[4]。

本次研究革兰阴性细菌所占比高于革兰阳性细菌，与强雪芹[5]等研究的数据接近。此次统计的菌株中检出马耳他布鲁菌21株，占所检出阴性杆菌的7.2%。这与榆林市地处陕蒙交界处、医院的病源有一部分是来自榆林北部农村及与内蒙接壤的牧区，这些患者均有饲养牲畜或与牲畜皮毛接触史。布鲁菌是一种可引起人畜共患病的动物源性病原菌，此菌为革兰阴性的球杆菌，染色较弱，生长繁殖速度较慢，血培养时3 d左右报阳性,布鲁菌有极强的致病力，可引起实验室感染[6-8]。

选取分离菌株较多的两种革兰阴性杆菌进行耐药性分析，我院分离自血液的大肠埃希菌和肺炎克雷伯均未发现CRE菌株。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要耐药机制是产生ESBLs酶。两种菌均对加酶抑制剂哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低，说明加酶抑制剂对产ESBLs菌株是有效的。大肠埃希菌对喹诺酮类(环丙沙星及左氧氟沙星)耐药率较高，故应参考药敏试验结果选择有效抗生素，相对而言，肺炎克雷伯菌对喹诺酮类药物敏感性较高，根据药敏试验结果可以作为临床选用的药物。革兰阳性菌中凝固酶阴性葡萄球菌及金黄色葡萄球菌均未分离出万古霉素耐药菌株，未检出对利奈唑安和替考拉宁耐药菌株。金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药机制主要有耐药相关基因mecA、细胞壁粘肽结构的和酶系统的改变。MRCNS的分离率为45.5%，MRSA的分离率为16.2%，与之前我院相关文献报道相比均有下降，尤其是MRSA由之前的57.3%下降至16.2%[9]。MRCNS高于MRSA与凝固酶阴性葡萄球菌的定植率高，经过了多种抗生素的筛选，产生了较多的耐药菌株有关。

PCT作为血流细菌感染的指标，已广泛应用。有报道显示[10]：PCT浓度与炎性程度呈正相关，同时也可作为判断病情、观察疗效的可靠指标[11]。本次研究血流感染组PCT明显高于对照组(P<0.01)，表明血流感染与PCT浓度的升高有相关性。由于血培养检测时间较PCT检测时间长，故而可根据患者PCT结果提示临床医生调整抗生素,更有利于控制患者病情发展。

综上所述,我院血培养病原菌分布呈多样性,与国内文献报道大致相同,也具有地域特色性,细菌的耐药率较高，多重耐药菌株较多。血清PCT浓度与血流感染有相关性，在发现感染指标时要及时提示临床医生采取有效措施。同时，对于临床分离病原菌进行连续不断的监测与分析是给临床医生提供用药指导的必要条件。

[1] 凌华志，沈继录，王中新，等.血培养阳性分离菌的分布和耐药性分析[J].中华感染与化疗杂志,2014,14(5)：420-424.

[2] Ghuman A,Newth CJ,Khemani RG.Impact of gender on sepsis mortality and severity of illness for prepubertal and postpubertal children [J].J Pediatr,2013,163(3)：835-840.

[3] Bourneton O,Mutel T,Heranney D,etal.Incidence of hospital-acquired and community- acquired bloodstream infections in the University of Strasbourg Hospital,France,between 2005 and 2007[J].Pathol Biol(Pairs),2010,58:530-532.

[4] 叶晓涛,习慧明,张 旭,等.降钙素原及血培养阳性时间对严重败血症早期预后的价值[J].中华医院感染学杂志,2013,23(16)：4075-4077.

[5] 强雪芹,张 爽,辛力华,等.2011-2012年血培养病原菌分布及耐药性变迁[J].中华医院感染学杂志,2014,24(1)：36-38.

[6] 邹玖明,张爱平,李智山，等.致血流感染非O1群非O139群霍乱弧菌的鉴定及毒力基因检测[J].中华感染与化疗杂志，2014,14(3)：186-188.

[7] Robichaud S,Libman M,Behr M,etal. Prevebtion of laboratory-acquired brucellosis[J].Clin Infect Dis,2004,38(12):e119-e122.

[8] 张海艳,马立宪,周艳丽.一例实验室感染布鲁氏菌病病例的流行病学调查[J].首都公共卫生,2008,2(1)：38-39.

[9] 冯海翔，樊海燕，郭瑞林.榆林地区医院4年细菌感染发生率与耐药性监测研究[J].国际检验医学杂志，2013,34(14)：1825-1827.

[10] 陈思宇.细菌感染及感染程度与血清降钙素原的相关性分析[J].医学信息,2011,24(10)：2.

[11] 马 英,马海欣,张红爱.降钙素原检测在新生儿感染性疾病中的临床意义[J].陕西医学杂志,2014,43(2)：211-213.

(收稿：2016-10-21)

细菌感染 微生物敏感性试验 抗药性, 细菌 降钙素

R446.5

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.06.035