芍药八味汤干预慢性萎缩性胃炎大鼠胃肠动力的作用机制研究*

河北中医学院(石家庄 050200)

方 芳 王 浩Δ 方 倩 齐香梅ΔΔ 王杰鹏 刘惠聪ΔΔΔ 方朝义



芍药八味汤干预慢性萎缩性胃炎大鼠胃肠动力的作用机制研究*

河北中医学院(石家庄 050200)

方 芳 王 浩Δ方 倩 齐香梅ΔΔ王杰鹏 刘惠聪ΔΔΔ方朝义

目的：研究芍药八味汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠血清中胃动素(MTL)和胃泌素(GAS)含量的变化，测定胃排空率及肠推进率，探讨该方对胃肠动力的影响作用。方法：采用复合造模法复制清洁级Wistar大鼠CAG模型，采用随机数字表法随机分为模型组、维霉素组、芍药八味汤高、低剂量组，并设不加任何处理的空白对照组。各用药组灌胃给药、各对照组灌服等容量生理盐水30 d。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清MTL和GAS含量，观察胃排空率及肠推进率。结果：与空白对照组比较，模型组血清MTL、GAS含量明显降低(P均<0.01)；与模型组比较，各用药组血清MTL、GAS含量显著增高(P均<0.01)；高、低剂量组对MTL含量的影响差异具有显著性(P<0.01)。模型组胃排空率、肠推进率显著低于空白对照组(P均<0.01)；用药组胃排空率、肠推进率显著高于模型组(P均<0.01)。结论：MTL和GAS含量的降低影响了CAG病理过程，芍药八味汤通过提高CAG大鼠血清MTL和GAS含量，促进胃肠动力，以恢复肌体消化机能。

芍药八味汤；慢性萎缩性胃炎；胃脘痛；腹痛；胃动素；胃肠动力；胃排空率；肠推进率

慢性萎缩性胃炎(CAG)是一种消化系统多发病，其病理特点主要表现为胃固有腺体萎缩。慢性胃炎患者中，有症状者主要表现为消化不良。[1]近年来，中医在对CAG的辨证诊断及治法方药等方面取得一定成绩。芍药八味汤为临床效方，用于治疗以胃脘痛等为主症的疾病，取得了满意的疗效，[2]但疗效机制尚未完全明确。基于此，采用复合造模法复制CAG大鼠模型，观察该组方对大鼠血清胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)等指标的干预特征，以及胃排空率及肠推进率情况，以期从胃肠动力学角度揭示芍药八味汤对CAG的作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物 选用清洁级Wistar大鼠100只，♀♂各半，体质量180～220 g，河北医科大学实验动物中心提供。动物合格证号：1003122。

1.2 药物 芍药八味汤(组成：白芍30 g，木香9 g，砂仁6 g，陈皮10 g，枳壳15 g，厚朴、郁金各12 g，炙甘草6 g)购于石家庄乐仁堂药店，符合国家药典标准。将以上中药加8倍于总剂量的凉水浸泡30 min，武火煮开后改用文火煎30 min，过滤，药渣再加入6倍于总剂量的凉水，武火煮开，改文火煎30 min，过滤后加入前次药液混匀；置于60℃恒温水浴箱分别浓缩至2 g/mL、1 g/mL的高、低浓度混悬液，4℃冷藏备用。维霉素片,河南复升药业有限公司，产品批号：20091221，购于石家庄乐仁堂药店。使用时，将维霉素片加0.2%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，配制96 mg/mL浓度的混悬液，装入消毒瓶中密封，4℃冷藏备用。

1.3 试剂 ⑴造模试剂:①氨水(分析纯，含NH325.0%～28.0%)，沈阳新兴试剂厂，产品批号：20080714；②脱氧胆酸钠，Sigma公司，上海锐聪科技发展有限公司经销，产品批号：090511。均购于石家庄市勃盛化学试剂有限公司，4℃冷藏保存。制备：分别用蒸馏水配制浓度为0.1%氨水溶液以及20 mmol/L(pH值7.0～7.8)的脱氧胆酸钠溶液。⑵测定试剂: ①MTL试剂盒，购于北京普尔伟业生物科技有限公司；②GAS试剂盒，购于北京北方生物所。

1.4 实验方法 CAG大鼠模型的建立：Wistar大鼠适应性喂养1 w，自造模第1 d起，用0.1%氨水溶液和20 mmol/L的脱氧胆酸钠溶液，隔日交替足量自由饮用。同时采用饥饱失常法：2 d足食，1 d 禁食。循环实施，连续90 d。[3]

1.4.1 分组: 随机抽取20只空白对照组大鼠，其他大鼠复制CAG模型，确认模型复制成功后，采用随机数字表法将CAG模型大鼠分为模型组、维霉素组、芍药八味汤高剂量组(简称“高剂量组”)及芍药八味汤低剂量组(简称“低剂量组”)，每组20只，♀♂各半。

1.4.2 给药方法: 模型复制成功后第2 d起灌胃，每日1次，连续30 d。空白对照组、模型组：生理盐水，10 mL/kg·d-1。维霉素组(阳性对照用药)：96 mg/mL混悬液，0.96 g/kg·d-1(相当于临床成人药量14倍)。低剂量组：1 g/mL中药混悬液，10 g/kg·d-1(相当于临床成人药量7倍)。高剂量组：2 g/mL中药混悬液，20 g/kg·d-1(相当于临床成人药量14倍)。灌胃前及灌胃后l h均禁食禁水。

1.5 标本采集 末次给药前禁食18 h，自由饮水。末次给药后2 h，灌胃5%活性炭末。乙醚麻醉后腹主动脉取血，每只采血3 mL。离心提取血清，-20℃冻存。颈椎脱臼法处死大鼠，剖腹，分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，不加牵引平铺于木板上，测其全长并记录碳末在小肠中移行的距离，求得推进率；另从距贲门和幽门各15 mm处离断并取出全胃，沿胃大弯侧剖开，分离胃内容物并用滤纸吸干称其重量，计算胃残留率。

1.6 指标检测 采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测，严格按照试剂盒说明书进行各步骤操作。

2 结果

2.1 各组大鼠血清MTL含量变化 与空白对照组比较，模型组血清MTL含量显著降低，差异具有非常显著性(P<0.01)。与模型组比较，3用药组血清MTL含量均显著升高，差异具有非常显著性(P<0.01)。与维霉素组比较，高、低剂量组MTL含量均显著升高(P<0.01)。高、低剂量组对MTL含量的作用比较差异亦存在显著性(P<0.01)。详见表1。

2.2 各组大鼠血清GAS含量变化 与空白对照组比较，模型组血清GAS含量显著降低，差异具有非常显著性(P<0.01)。与模型组比较，三用药组血清中GAS含量均明显升高，差异具有非常显著性(P均<0.01)。各用药组比较，高、低剂量组大鼠血清中GAS含量明显低于维霉素组，差异具有非常显著性(P均<0.01)。详见表1。

分组MTL(pg/mL)GAS(pg/mL)空白对照组291 00±21 95 81 88±19 17 模型组182 89±23 70∗32 61±13 02∗维霉素组212 11±28 57#64 72±19 07#高剂量组271 68±21 50#△51 67±13 15#△低剂量组235 16±24 56#△▲47 45±12 88#△

注：与空白对照组比较，*P<0.01；与模型组比较，#P<0.01；与维霉素组，△P<0.01；与高剂量组比较，▲P<0.01

2.3 各组大鼠胃排空率变化 与空白对照组比较，模型组大鼠胃排空率明显降低，差异具有非常显著性(P<0.01)；与模型组比较，各用药组大鼠胃排空率显著升高，差异具有非常显著性(P均<0.01)。详见表2。

2.4 各组大鼠肠推进率变化 与空白对照组比较，模型组大鼠肠推进率明显降低，差异具有非常显著性(P<0.01)；与模型组比较，各用药组大鼠肠推进率明显升高，差异具有非常显著性(P均<0.01)。详见表 2。

分组胃排空率 肠推进率 空白对照组94 79±16 6765 18±19 84模型组64 48±18 09∗23 72±9 32∗维霉素组79 84±16 05#41 03±20 64#高剂量组82 43±21 72#47 47±17 78#低剂量组75 24±15 79#39 42±17 58#

注：与空白对照组比较，*P<0.01；与模型组比较，#P<0.01

3 讨论

CAG为临床常见消化系统疾病。一般认为，其发病是由于多种因素反复刺激胃黏膜表面，造成黏膜变薄、血管显露，胃固有腺体萎缩，胃动力减弱或丧失，进而形成CAG。[4]

CAG属中医学“痞满”“胃脘痛”“腹痛”等病症范畴。其发病多由外邪侵袭、情志内伤、饮食劳倦等导致，病位主要在胃，与肝、脾密切相关。[5]《医学正传》云：“木气被郁，发则太过，故民病有土败木贼之候。”《临证指南医案》云：“纳食主胃，运化主脾，……太阴湿土，得阳始运；阳明阳土，得阴自安。”胃为多气多血之乡，若胃气壅滞，则气滞血瘀；脾主统血，若脾气不足，而因虚致瘀；脾虚气滞，可致五谷腐熟、水液运化输布失调，痰湿内生。

胃肠激素的分泌失调是引发胃肠道疾病[6]的主要原因之一。生理状态下，MTL通过刺激胃蛋白酶分泌，促进胃肠道蠕动及小肠分节运动；[7]GAS通过调节胃酸分泌及胃窦收缩，促进胃、小肠的分泌活动，[8]且对胃黏膜细胞有一定的营养作用，促进细胞增殖，增强食道下端括约肌张力，调节胃肠运动。[9]因此，病理状态下MTL、GAS与胃肠动力障碍的发生密切相关。[10]

芍药八味汤具有疏肝解郁、行气止痛的功效，是治疗胃炎、胃十二指肠溃疡等消化系统疾病的效方。方中白芍柔肝止痛为君药；广木香、砂仁、枳壳、陈皮、厚朴化湿行气止痛，共为臣药；郁金活血止痛、行气解郁，甘草缓急止痛、调和以上诸药，二者共为佐使药。现代药理证实，白芍所含白芍总苷有抗炎、止痛等功效，[11]并且有缓解平滑肌痉挛，保护胃黏膜的作用。[12]研究证实，木香在抗心血管疾病、抗炎、抗溃疡等方面表现出良好的药理活性，可显著增强大鼠胃肠推进运动，使离体大鼠回肠收缩幅度明显增大。[13]砂仁的主要效应部位为挥发油，有抗炎、止痛、促进胃肠蠕动的功效，[14]陈皮对胃肠道平滑肌有温和的刺激作用，[15]能兴奋胃肠运动，对小鼠胃排空及肠推进均有促进作用，[16]枳壳可能通过促进GAS、MTL的分泌来调节胃肠运动，研究表明枳壳水煎液对正常大鼠小肠推进有明显促进作用，[17]厚朴对小鼠胃肠功能有较强的促进作用，[18]郁金提取物抗炎作用较好，而镇痛作用主要针对化学刺激引起的疼痛，这可能与其活血化瘀的功效有关。[19]

MTL和GAS含量的降低影响了CAG病理过程，同时，CAG状态下，肌体存在明显的胃肠动力减缓的机能改变。本实验结果显示，芍药八味汤能明显提高MTL和GAS的含量，促进胃肠动力，从而对胃动力障碍性疾病产生一定的防治作用。

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(2017-05-03 收稿)

Study of Mechanism of Peony Eight Ingredients Decoction in Intervening Gastrointestinal Motility of Rats with Chronic Atrophic Gastritis

Hebei University of Chinese Medicine (Shijiazhuang 050200)

FANGFangWANGHaoFANGQianQIXiang-meiWANGJie-pengLIUHui-congFANGChao-yi

Objective: to study the effect of Peony Eight Ingredients Decoction on motilin (MTL) and gastrin (GAS) levels in chronic atrophic gastritis (CAG) rats, to detect gastric emptying rate and intestinal propulsive rate, and to explore the decoction's action on gastrointestinal motility. Methods: CAG models were prepared by compound molding process with clean Wistar rats, which were randomly divided into model group, vitacoenayme group, high dose of decoction group, low dose group, and blank control group. The medication groups were given intragastric administration and the control groups the same volume saline for 30 days. MTL and GAS level were determined with ELISA, gastric emptying and intestinal propulsive rate observed. Results: compared with blank control group, MTL and GAS level of model group were significantly decreased (P<0.01); compared with model group, MTL and GAS level of all medication group were all significantly increased (P<0.01); there was significant difference in effects on MTL between high dose and low dose group (P<0.01). Gastric emptying rate and intestinal propulsive rate were significantly lower than that of blank control group (P<0.01) while medication group significantly higher than model group (P<0.01). Conclusion: The decrease of MTL and GAS affects CAG pathological process, while Peony Eight Ingredients Decoction can increase MTL and GAS levels in CAG rats and promote gastrointestinal motility so as to restore the digestive function.

Eight Ingredients Decoction; CAG; epigastric pain; abdominal pain; MTL; gastrointestinal motility; gastric emptying rate; intestinal propulsive rate

*河北省中医药类科研计划课题项目：No.2011035

刘惠聪，女，主任中医师；方朝义，男，医学博士，博士研究生导师。E-mail:hbfcy@163.com。

R285.5

A

1007-5615(2017)03-0005-04

△河北省中医院(石家庄 050011)

△△河北大学中医学院(保定 071002)

△△△石家庄市中医院(石家庄 050051)