电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值研究

何映琴

电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值研究

何映琴

目的探讨电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值。方法320例肾小球疾病患者均行B超引导下肾组织活检, 分别应用光镜+免疫荧光法和电镜检查, 比较两种检查方法对肾小球疾病的诊断结果。结果最终病理诊断显示IgA肾病所占比例最高, 为26.88%, 其次为肾小球微小病变, 占16.56%。电镜对最终病例诊断结果起完全修正作用的有83例, 占25.94%, 起补充修正作用的有65例,占20.31%。光镜+免疫荧光检验有172例对肾活检最终病理诊断结果产生影响, 占53.75%；电镜检验有148例对肾活检最终病理诊断结果产生影响, 占46.25%, 两种检查方法比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在肾小球疾病病理诊断中, 电镜具有显示电子致密物、超微结构改变的作用, 可为病理诊断提供相关佐证, 进一步降低肾小球疾病误诊率, 值得推广应用。

肾小球疾病；肾活检；电子显微镜；光学显微镜

在肾活检病理诊断中, 电镜、免疫荧光/免疫组化、光镜是不可或缺的三大组成部分［1］。近年来, 随着电镜技术的发展与普及, 其在肾活检病理诊断中的应用优势也越来越明显, 其能反映肾小球超微结构改变, 对肾小球疾病的免疫荧光和光镜病理诊断进行验证和修正［2］。为进一步明确电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值, 本文选取320例肾小球疾病患者肾组织活检并行光镜+免疫荧光、电镜检查, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院肾内科2012年1月~2015年1月住院的320例肾小球疾病患者作为研究对象, 本组患者均接受肾组织活检, 其临床检查及实验室检查资料均完整。其中男146例, 女174例, 年龄14~75岁, 平均年龄(36.5±18.8)岁。临床表现：肾病综合征60例, 血尿10例, 肾炎综合征210例,肾功能衰竭40例。

1.2 方法 所有患者均在B超引导下行肾穿刺活检术, 取肾活检标本, 并将其分为3份, 分别用于免疫荧光、光镜、电镜检查。①第一份肾活检标本进行石蜡包埋, 切片(厚度2 μm), 常规进行马森(Masson)、嗜银(PASM)、糖原(PAS)、苏木精-尹红(HE)染色, 然后进行光镜检查；②第二份肾活检标本冰冻后切片, 用以免疫荧光检测。采用直接法检测纤维蛋白原相关抗原(FRA)、C1q、C3、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG), 采用间接法进行乙肝病毒抗原检测, 检测项目包括乙型肝炎 e 抗原( HBeAg )、乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)；③第三份肾活检标本进行电镜检查。分别使用戊二醛(2.5%)、锇酸(1%)对活检标本进行前固定、后固定, 再使用丙酮脱水,使用Epon812环氧树脂对肾组织进行常规包埋处理, 使用甲苯胺蓝染色定位后切片, 铀、铅双重电子染色后, 在H-600型电子显微镜下观察肾小球的基本情况。部分疑难病例,还需进行Ⅳ型胶原α3α5染色和κ λ轻链染色/刚果红染色［3］。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 最终病理诊断 320例患者中, IgA肾病所占比例最高,为26.88%, 其次为肾小球微小病变, 占16.56%, 膜性肾病、狼疮性肾炎所占比例也较高。见表1。

表1 320例患者的最终病理诊断结果(n, %)

2.2 电镜的完全修正、补充修正结果 电镜对最终病例诊断结果起完全修正作用的有83例, 占25.94%, 完全修正的疾病类型包括肾小球微小病变、膜性肾病、糖尿病性肾病、肾淀粉样变；起补充修正作用的有65例, 占20.31%, 补充修正的疾病类型包括IgA肾病、膜性肾病、狼疮性肾病、糖尿病性肾病、局灶节段肾小球硬化、乙型肝炎病毒性肾病、膜增生性肾小球肾炎。

2.3 光镜+免疫荧光检验与电镜的病理诊断影响程度 光镜+免疫荧光检验有172例对肾活检最终病理诊断结果产生影响, 占53.75%；电镜检验有148例对肾活检最终病理诊断结果产生影响, 占46.25%, 两种检查方法比较差异具有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

研究结果显示, 所有肾脏疾病中肾小球疾病所占比例最高, 提示电镜检查对肾小球疾病诊断的敏感性较高, 这可能与电镜能显示肾小球基底膜超微结构、电子致密物分布情况,从而能更好地进行肾小球病理诊断有关［3-7］。本次研究显示,在最终病理诊断结果中, 25.94%是由电镜检查起决定性作用, 疾病类型包括肾小球微小病变、膜性肾病、糖尿病性肾病、肾淀粉样变。这一结果与国内相关文献报道相符［4］。这也提示光镜诊断为肾小球轻微病变和免疫荧光结果呈阴性的病例, 还应做电镜检查, 以免发生漏诊［8,9］。最终病理诊断结果中电镜检查起修正诊断作用的占20.31%, 疾病类型以免疫复合物性肾炎居多, 这可能与电镜能够精确定位电子致密物沉积部位, 显示沉积物特点、结构等有关［10-12］。

虽然电镜检查的应用优势显著, 但其观察范围较为局限,对弥漫性肾炎、局灶节段性肾小球病变的诊断较为有限［5］,其对最终病理诊断结果无影响, 免疫荧光+光镜检查即可独立诊。由于电镜具有显示电子致密物、超微结构改变的作用,故可为病理诊断提供相关佐证, 用以验证免疫荧光+光镜诊断结果。

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2017-03-21］

528403 中山市人民医院肾内科