15% 双氟·氯氟吡氧乙酸异辛酯悬浮剂高效液相色谱分析

河南省农药检定站 马丽娜 郝小磊 王青霞

15% 双氟·氯氟吡氧乙酸异辛酯悬浮剂高效液相色谱分析

河南省农药检定站 马丽娜 郝小磊 王青霞

双氟磺草胺是由美国陶氏农业科学公司开发的三唑并嘧啶磺酰胺类除草剂。双氟磺草胺是三唑并嘧啶磺酰胺类超高效除草剂，双氟磺草胺是内吸传导型除草剂，可以传导至杂草全株。在低温下药效稳定，即使是在2 ℃时仍能保证稳定药效，这一点是其他除草剂无法比拟的。双氟磺草胺杀草谱广，可防除麦田大多数阔叶杂草，包括猪殃殃（茜草科）﹑麦家公（紫草科）等难防杂草，并对麦田中最难防除的泽漆（大戟科）有非常好的抑制作用。氯氟吡氧乙酸异辛酯，属内吸传导型苗后茎叶处理除草剂，施药后很快被杂草吸收，使敏感植物出现典型激素类除草剂的反应并传导到全株各部位。适用于小麦﹑大麦﹑玉米﹑葡萄﹑果园﹑牧场﹑林地﹑草坪等地防除阔叶杂草；如猪殃殃﹑卷茎蓼﹑马齿苋﹑龙葵﹑田旋花﹑蓼﹑苋等，对禾本科杂草无效。本文研究了双氟磺草胺﹑氯氟吡氧乙酸异辛酯的分析方法，该方法快速﹑准确﹑分离效果佳，能满足产品的分析要求。

一、试验部分

（一）试剂和溶液

乙腈：色谱纯；水：二次蒸馏水；双氟磺草胺标样：已知含量为95%；氯氟吡氧乙酸异辛酯标样：已知含量为96%；15%双氟·氯氟吡悬浮剂试样。

（二）仪器

高效液相色谱仪：美国Agilent1260型， 带 有 紫 外 光检测器（VWD）和自动进样器；Agilent色谱工作站；色谱柱：150 mm×4.6 mm（i.d）不绣钢柱，内装XDB-C18，5μm填料。

（三）液相色谱操作条件

流动相：乙腈+水=80+20（V+ V）；流量：1.0 mL/min；柱温：室温；检测波长：265 nm；进样体积：5μl。上述色谱条件下双氟磺草胺的保留时间约为1.523 min，氯氟吡氧乙酸异辛酯保留时间约为6.160 min。

上述液相色谱操作条件，系典型操作参数，可根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当的调整，以期获得最佳效果。标样和样品典型色谱图（见图1﹑图2﹑图3）。

图1 双氟磺草胺标样高效液相色谱图

图2 氯氟吡氧乙酸异辛酯高效液相色谱图

图3 15%双氟・氯氟吡悬浮剂高效液相色谱图

（四）测定步骤

1.标样溶液的配制。称取双氟磺草胺标准品0.03 g（精确至0.0002 g）氯氟吡氧乙酸异辛酯标准品0.03 g（精确至0.0002 g），各置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀释至刻度，超声波震荡10 min，取出冷却至室温，摇匀。用0.45 μm滤膜过滤，摇匀备用。

环腐棒杆菌在种薯中越冬，成为翌年初侵染源。病薯播下后，一部分芽眼腐烂不发芽，一部分是出土的病芽，病菌沿维管束上升至茎中部或沿茎进入新结薯块而致病。适合环腐棒杆菌生长温度20～23℃，最高31～33℃，最低1～2℃。致死温度为干燥情况下50℃。

2.试样溶液配制。称取1.0 g（精确至0.0002 g）置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀释至刻度，超声波震荡10 min，取出冷却至室温，摇匀。用0.45 μm滤膜过滤，摇匀备用。

3.测定。在上述色谱操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，待相邻2针响应值变化小于1.5%时，按照标样溶液﹑试样溶液﹑试样溶液﹑标样溶液的顺序进行测定。

4.计算。将测得的2针试样溶液和2针标样溶液色谱图上双氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸异辛酯的峰面积分别进行平均，试样中双氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸异辛酯的质量分数X按式（1）计算：

式中：

——双氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸异辛酯标样的质量，g；

——试样的质量， g；

——标样溶液色谱图上双氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸异辛酯峰面积的平均值；

——试样溶液色谱图上双氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸异辛酯峰面积的平均值；

二、结果与分析

（一）流动相的优化

根据该化合物特点，使用不同比例的甲醇和水，乙腈和水作为流动相对试样进行检测分析，结果发现，用乙腈+水=80+20（V+V），作为流动相，分离效果好，峰形对称，因此选择该流动相。

（二）检测波长的选择

通过Agilent1260高效液相色谱仪的光谱数据采集功能，获得双氟磺草胺或氯氟吡氧乙酸异辛酯紫外波扫描图。从图中看到双氟磺草胺的最大吸收在260 nm附近，氯氟吡氧乙酸异辛酯的最大吸收波长在254 nm附近，为减少杂质的干扰﹑达到分离的效果，将检测波长定为265 nm。

（三）色谱柱的优化

色谱柱经C18和C8对比，选用反相填料C18柱，在保证杂质分离彻底的情况下，大幅缩短分析时间。

（四）分析方法的线性测定

将标样溶液在上述色谱条件下分别进行分析，进样量依次为1 μL﹑2 μL﹑3 μL﹑4 μL﹑5 μL，以双氟磺草胺的峰面积为纵坐标，以它们不同进样质量为横坐标作图绘制标准曲线，得双氟磺草胺线性方程：Y=7482.3X+53.1，线性相关系数0.9 998（见表1，图4）。

将试样溶液在上述色谱条件下分别进行分析，进样量依次为1 μL﹑2 μL﹑3 μL﹑4 μL﹑5 μL，以氯氟吡氧乙酸异辛酯的峰面积为纵坐标，以它们不同进样质量为横坐标作图绘制标准曲线，得氯氟吡氧乙酸异辛酯线性方程：Y=1011.7X+11，线性相关系数0.9 998（见表2，图5）。

（五）方法的精密度试验

按照测定步骤对同一试样5次平行测定，结果见表3。

（六）方法准确测定

称取5份一定量的试样，分别准确加入适量标样溶液，在上述色谱条件下测定，测得双氟磺草胺的平均回收率为 98.84% ，氯氟吡氧乙酸异辛酯的平均回收率为 99.78 %，结果见表4。

表1 分析方法的线性相关测定数据

表 2 分析方法的线性相关测定数据

表3 精密度试验测定结果

三、结论

试验结果表明，使用本方法测定双氟磺草胺﹑氯氟吡氧乙酸异辛酯的有效成分的高效色谱分析，不但杂质分离效果好，准确度﹑精密度高，线性关系好，分析时间短，操作简便，而且符合定量要求，能满足产品的分析要求。

图4 双氟磺草胺线性关系图

图5 氯氟吡氧乙酸异辛酯线性关系图

表4 分析方法的准确度试验