家畜口蹄疫的免疫抗体检测方法

李玉香

DOI：10.3969/j.issn.2096-3637.2017.10.057

摘要：口蹄疫主要是由口蹄疫病毒所引起的，是一种急性的、高度接觸性的传染病，对畜牧业发展能够产生严重的危害。因此，如何做好免疫抗体检测，进而有效预防牛羊口蹄疫发生尤为关键。近年来，经过不断地研究与探索，疫苗注射对于牛羊口蹄疫防治具有良好的效果。

关键词：口蹄疫；检测；方法

中图分类号：S858 文献标识码：B 文章编号：2096-3637（2017）10-0065-01

近年来，基于牛羊口蹄疫的严重危害，我国已经将其列入强制免疫的范围，因此，能否及时做好免疫抗体的效价检测不仅仅是关系到能够做好免疫质量评价的关键，同时也是关系到能否为牛羊口蹄疫免疫提供科学依据的关键。但是，在实际工作中，由于所采用的抗体检测方法不同，往往会导致检测的结果呈现出一定的差异性，因此科学选择抗体检测方法尤为重要。正向间接血凝实验和液相阻断可以说是2种常用的抗体检测方法。为此，通过平行对比检测试验的方法对2种检测手段进行分析。

1 材料与方法

1.1 被检测血清

检测血清采用随机抽取的方法，主要来源就是已经成功注射牛羊o型-亚洲I型口蹄疫双价灭活疫苗的牛血液样品与羊血液样品，建议在21d左右的时间进行血样提取，在完成血清的分离后，将待检血清置于4℃左右的冰箱保存。

1.2 关于诊断试剂

所选用诊断试剂为同一生产批号的口蹄疫O型正向血凝抗原、阳性血清、阴性血清、稀释液以及O型口蹄疫液相阻断ELISA检测试剂盒。

1.3 关于检测方法及结果的判定

正向间接血凝试验一定要严格按照说明进行操作，如果抗体的效价高于1：32的话，即可视抗体为合格；同样，O型口蹄疫液相阻断也要严格按照说明进行操作，在结果的判定方面我们通常是将病毒抗原对照的平均OD值的一半为临界值，也就是参考值，如果被检血清的OD值高出临界值，那么为阴性孔，如果低于临界值，就为阳性孔，需要注意的是，阳性孔的最高稀释度就是血清的抗体效价，如果高于1：64的话，我们可以认为抗体合格。

2 结果

通过正向间接血凝检测，发现抽取的牛羊样本中，口蹄疫的免疫合格率分别为81.9%和83.67%，也就是说在所抽取的105头牛和98只羊中，分别有86头和82只羊的抗体检测是合格的。

3 结果分析

从检测的实际结果来看，无论是正向间接血凝检测，还是液体阻断检测，结果是基本相符合的，也就是说对于同一批血清的检测抗体效价来说，具有显著的对应关系、任何一种检测方法敏感性和特异性低相对显著，试验结果科学、可靠。

需要注意的是，从检测的结果来看，正向间接血凝检测的合格率要稍高于液相阻断检测的合格率，这可能与前者在结果的判断方面需要肉眼判定有一定的关系，结果具有一定的主观性。 正向间接血凝试验的优势在于操作简单，仪器少，价格低，但是结果的判定具有主观性，也就是说和实验员的素养有着一定的关系。换句话说，对于同样的血清，不同的实验员进行检测，所获取的结果可能存在某种程度的差异。再一个就是这种检测方法对于所抽取血样的要求也相对要高；而液相阻断检测无论是在灵敏度，还是在特异性等方面，都更有优势，而且不受实验人员主观影响，但是所需要的仪器设备更加烦琐、专业、对人员的操作水平要求高，试剂的价格也相对较高。

基于牛羊口蹄疫的重大危害，每一次关于重大动物一定防控的检验中，不仅仅要投入大量的人力、物力以及财力、但是由于检测方法、检测水平以及检测试剂等相关因素的影响，检测结果往往存在着一定的差异，也给进一步做好免疫工作带来了不少困难。为此，笔者建议，一定要立足实际，根据检验样品的实际情况，选用合适的检测方法。如果是省里或者更高层级的机构，检验样本的数量不大的话，建议用液相阻断法进行检验，如果样本数量大，又是基层的话，建议选择正向间接血凝试验检测法。

4 结语

从上文的论述中，我们不难看出，人们已经普遍意识到牛羊口蹄疫的巨大危害，并且开始重视做疫苗免疫注射工作，希望能够有效预防口蹄疫，进而尽量降低因此可能带来的经济损失。但是，疫苗注射的实际效果如何，是否真正能够发挥预期的防治效果，就必须要通过免疫抗体的检测情况来判定，如果检测情况达标，那么可以说明是有效的，是可以继续应用的，对于牛羊口蹄疫是能够真正起到良好的防治效果的；如果检测不理想，能够排除实验操作失误等因素影响的话，就要考虑所选择疫苗是否科学，是否合理，及时做出调整，保证疫病的实际防治效果。

免疫抗体的检测方法有很多，但没有一种方法是真正完美的，因此，在实际选择的时候，要立足当地的实际水平，主要是样本的数量、仪器设备以及资金、技术水平等相关因素，做出合适的选择，保证结果的准确性，从而为今后更好做好牛羊口蹄疫免疫工作提供切实、有力的依据和参考。