张秀荣 高淑平 付影 田晶 李少奇
摘要:中粮生化能源有限公司生产的产品以玉米为原料,近几年,客户对于产品中呕吐毒素关注度升高。玉米中呕吐毒素含量直接影响产品中呕吐毒素含量,玉米生霉粒含量与呕吐毒素含量是否有相关性成为关注焦点。文章主要通过对玉米生霉粒含量与呕吐毒素检测结果统计,结果显示生霉粒含量高低与呕吐毒素含量没有相关性。
关键词:玉米;生霉粒;呕吐毒素
玉米,学名玉蜀黍,根据不同地区方言,又被称为包谷、苞米、棒子、粟米、番麦。玉米是一年生禾本科草本植物,是加工程度最高的粮食作物。玉米籽粒由皮层、胚乳和胚3部分组成,玉米产业链长,加工空间大。中粮生化能源有限公司是玉米深加工企业,主要产品为食用玉米淀粉、味精、喷浆玉米皮、玉米蛋白粉、玉米胚芽粕、玉米原油等,这些产品都是玉米深加工后制得的。
1生霉粒
生霉粒,粒面生霉的颗粒。按照GB/T 5494—2008《粮油检验粮食、油料的杂质、不完善粒检验》和GB 1353—2009《玉米》标准的规定进行检验判定,以下情况不应判定为生霉粒。
(1)用干净的手指轻擦霉斑部分,霉状物可擦掉且擦拭后种皮无肉眼可见痕迹的颗粒;(2)玉米粒面被其他污染物污染形成斑点的颗粒;(3)玉米颗粒破损,破损部位粘附有其他污染物的颗粒;(4)玉米冠部留有花丝脱落留下的痕迹(肉眼可见小黑点)的颗粒;(5)因病害产生斑点的颗粒。
2呕吐毒素
呕吐毒素又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),是谷物中最为常见的一种真菌毒素,因可以引起猪的呕吐而得名。它能够降低畜禽的生产性能,并且对动物免疫系统、细胞信号传导和基因的表达均有不同程度的影响。由于DON的危害严重,引起了客户的高度重视。呕吐毒素通常来源于玉米原料中,2015年,中粮生化能源有限公司品控部检验工程师专门对玉米胚芽粕中呕吐毒素含量的影响因素做了试验研究。试验表明,玉米深加工后,原玉米中的呕吐毒素通常留存于玉米浆中,在饲料生产过程中,通过加玉米浆提高蛋白质含量,与此同时,呕吐毒素含量也增加。
玉米是中粮生化能源有限公司生产饲料的主要原料,由于近几年客户对饲料产品中呕吐毒素含量关注度增加,玉米中呕吐毒素含量直接影响产品中呕吐毒素含量,因此,玉米生霉粒含量与呕吐毒素含量是否有相关性成为关注焦点。本文通过对玉米的生毒粒和呕吐毒素含量的检测与对比分析,为两者的相关性究提供数据支持。
目前,测定呕吐毒素的主要方法有薄层层析法(Thin Layer Chromatography,TLC)、高效液相色谱法(High Efficiency Liquid Chromatography,HPLC)、气相色谱法(Chromatography of Gases,GC)、酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)和快速检测条法。随着人们对食品质量和健康水平要求的提高,发展并推广简便、快速、高度灵敏的仪器分析方法和快速有效的免疫分析方法正逐渐被应用于DON检测。本文采用Charm呕吐毒素快速检测条,利用胶体金原理,主要根据竞争性受体一配体免疫反应进行检测,反应迅速,结果准确。
3呕吐毒素的测定方法
3.1仪器
仪器主要有:ROSA孵育器(45℃)、ROSA-M读数仪、漩涡混流器、1000 uL移液枪、电子天平、离心机、50 mL离心管、1.5 mL离心管、25 mL移液管、1 000 uL移液枪头及枪头盒、称量纸、粉碎机。
3.2试剂
试剂有玉米、蒸馏水、DON稀释缓冲溶液等。
3.3分析步骤
3.3.1样品的处理
将待检样品混匀后粉碎,过20目筛即可用。称取粉碎后的样品5 g,精确到0.01 g,到50 mL离心管中,加样品量5倍(25 mL)的去离子水(或蒸馏水)到称好样品的离心管中,把加好提取液的离心管放到漩涡混合器上震荡1分钟,然后静止5分钟,打开孵育器预热(加样时到(45±1)℃即可),取静置后样品上层相1~1.5 mL离心管中,离心3分钟,取100uL离心好的样品上层相到1 000 uL DON稀释缓冲液中,漩涡混匀30秒待测。
3.3.2试样的检测
打开孵育器盖子,将检测条放入ROSA-M孵育器,平底一侧朝上,小心解开粘膜至指示线处,使样品槽暴露,避免弯曲粘膜下的白色芯和海绵,小心移去300 uL(±15 uL)的稀释提取物至样品槽,压下粘膜重新密闭样品槽,盖上孵育器盖子并锁定,孵育5分钟,孵育完成后,孵育器发出提示音红灯和黄灯交替闪烁。取出检测条,2分钟内将干净、有效的检测条插入ROSA-M读数仪,按ENTER读数。
4结果分析
玉米干粮生霉粒含量与呕吐毒素检测结果如表1和图1所示。
由图1可知,对于玉米干粮,生霉粒高,呕吐毒素不一定高,例如嘔吐毒素最高为15×105ppb,而生霉粒只有2.8%;生霉粒10.4%时,呕吐毒素为5.5×105ppb。
净化后玉米潮粮生霉粒含量与呕吐毒素检测结果如表2所示。
由图2可知,对于玉米潮粮,生霉粒高,呕吐毒素不一定高,例如呕吐毒素最高为7×105ppb,而生霉粒只有0.4%;生霉粒1.3%时,呕吐毒素为2×105ppb。
5结语
通过对检测情况进行对比分析,得出以下结论:无论是玉米干粮还是潮粮,生霉粒含量高低与呕吐毒素含量没有相关性。