仔猪链球菌的分离鉴定

谢冰

摘要：某养猪场，45日龄的断奶仔猪1200头，其中，20多头45日龄的断奶仔猪，出现精神沉郁，食欲废觉，发烧41～42℃，发病后的2～3d，出现了严重的食欲废觉，个别的45日龄的断奶仔猪出现了神经症状，典型的症状后肢关节对称性肿胀，有的45日龄的断奶仔猪不表现任何的症状出现突然死亡。为了确定引起45日龄的断奶仔猪发病及突然死亡的病原菌，首先对突然死亡的45日龄的断奶仔猪进行剖检，从无菌采集肝脏、肺脏、肾脏、心血、淋巴结等病料组织中分离1株病原菌，对分离1株病原菌通过培养特性鉴定、细菌形态学观察、生化特性等鉴定等方法，从45日龄断奶仔猪的体内分离到的1株病原菌被鉴定为链球菌。将从45日龄仔猪体内分离的链球菌肌肉注射攻毒给小白鼠结果显示，从45日龄仔猪体内分离的链球菌具有很强的致病性。因此，用K-B药敏纸片法对从45日龄仔猪体内分离的链球菌进行药敏试验分析其耐药性，结果显示，分离菌株对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢他定、青霉素6种药物高度敏感。

关键词：仔猪；链球菌；分离鉴定；

中图分类号：S858.28 文献标识码：B 文章编号：2096-3637（2017）09-0071-01

一般的猪的相关的传染性疾病主要包括病毒性、细菌性疾病。其中，链球菌病是断奶仔猪急性死亡和关节肿胀的主要病原菌，仔猪感染了链球菌后，死亡率均较高能达到50%以上，仔猪的链球菌病，严重危害着养猪业的发展。因此，断奶仔猪的链球菌病成为临床上常见的细菌性传染性疾病之一，仔猪链球菌病是由链球菌引起不同阶段猪的一种急性、热性、败血性传染病，可以感染不同阶段的猪，感染率和死亡率均较高。尤其对仔猪的致病性最强，危害最严重。链球菌病发病无明显的季节性，常年均有引发仔猪发病，临床上主要表现为急性败血症，关节肿胀等，表现神经症状，浑身抽搐，麻痹死亡。

1发病情况

某一养猪场，45日龄的断奶仔猪1200头，其中，20多头45日龄的断奶仔猪，出现精神沉郁，食欲废觉，发烧41～42℃，发病后的2～3d，出现了严重的食欲废觉，个别的45日龄的断奶仔猪出现了神经症状，典型的症状后肢关节对称性肿胀，有的45日龄的断奶仔猪不表现任何的症状出现突然死亡。

2.临床证状

45日龄的断奶仔猪1200头，其中，20多头45日龄的断奶仔猪出现了精神沉郁，发热41～42℃，食欲开始减少，到后期出现了食欲废绝，出现神经症症状，四肢呈现了游泳样运动，抽搐麻痹而死，关节肿大。

3.病理剖检变化

对45日龄断奶死亡的仔猪进行病理组织学剖检，观察其病理组织学变化。剖检变化可见，肝脏肿大、出血，形成出血斑，呈蓝紫色；颌下淋巴结、腹股沟管淋巴结、肠系膜淋巴结肿大、出血；腹腔均有淡黄色渗出液，气管、喉头有不同程度的肿胀、出血；45日龄断奶出现了肺脏肿胀、出血；胃底部区及肠道有出血点，肠壁变薄，肠黏膜脱落；关节炎肿胀，切开后，有炎性渗出物渗出，关节面肿胀。

3细菌分离培养与形态学观察

无菌采集45日龄断奶死亡的仔猪的肝脏、肾脏、心血、关节渗出液等病料组织接种于7%绵羊脱纤血液营养培养基上， 37℃培养12～16h后，在7%绵羊脱纤血液营养培养基生长出菌落，生长出来的菌落呈淡灰色、大小一致透明、圆形小菌落，呈现典型的β溶血现象，挑起7%绵羊脱纤血液营养培养基上，呈现典型的β溶血现象的菌落，革兰氏染色观察，分离菌株呈单个的或者双排列的阳性球菌。

4分离菌株的生化鉴定

挑取7%绵羊脱纤血液营养培养基上单个菌落接种于含5% 血清的TSB 培养基里， 37℃震荡培养12～16h后，按照说明加入鉴定链球菌Raid ID 32 STREP试纸条中， 37℃培养24h后，进行生化试验鉴定，链球菌Raid ID 32 STREP试纸条结果显示，分离菌株为链球菌。

5细菌的的致病性試验

挑取7%绵羊脱纤血液营养培养基上单个菌落接种于含5% 血清的TSB 培养基里， 37℃震荡培养12～16h后，调整菌液浓度（105cfu /mL），将10只小白鼠分为2组，1组每只小白鼠肌肉注射分离菌株0.5 mL，2组，肌肉注射口服等量的生理盐水，攻毒12h，观察7d，记录每组小鼠的死亡数和发病情况，结果显示，在攻毒后的48h，1组小鼠出现全部死亡，2组健康存活，因而，证实了从45日龄断奶死亡的仔猪体内分离链球菌具有很强的致病性。

6药敏试验

用K-B药敏纸片法对仔猪源链球菌进行药敏试验，结果显示，分离菌株对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢他定、青霉素6种药物高度敏感。

7结论

从病死的45日龄的断奶仔猪体内分离到的病原菌为致病性链球菌，致病性链球菌，药敏试验结果显示，致病性链球菌对头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林、头孢他定、青霉素6种药物高度敏感，当发生该病时，应选择敏感的药物进行治疗。

参考文献

[1]张广斌，李舫，袁东芳，等.猪链球菌2型的分离鉴定及猪场带菌情况调查[J].中国动物疫，2017，（09）：92-95.

[2]惠艳华，丁宁，沈莉萍，等.一例猪链球菌2型感染的病原分离鉴定及药敏试验[J].中国动物检疫，2017，34（08）：97-99.