盐酸莫西沙星注射液的溶血、过敏及刺激试验

王莉芳，李晓春，徐长根

(陕西省食品药品检验所，陕西 西安 710065)

莫西沙星是人工合成的含有8-甲氧基的第4代氟喹诺酮类抗菌药物，其抗菌谱广、抗菌能力强，在保留了第3代抗革兰阴性菌活性的 基础上，增强了抗革兰阳性菌、厌氧菌的活性[1]，尤其是对难治性和对 B-内酰胺类抗菌药物耐药的病原体，具有较强的抗菌作用 。有病例使用莫西沙星注射液后发生过敏反应，过敏性休克，四肢及躯干见大片红色丘疹，并发肺部感染。为进一步了解和评价盐酸莫西沙星氯化钠注射液安全性，本文对其溶血、过敏及刺激性进行研究。

1 材料

1.1 药物与试剂

250 mL:含莫西沙星0.4 g氯化钠2.0 g；

阴性对照品：0.9%氯化钠注射液 市售。

1.2 实验动物

家兔：雌雄兼用，体质量2.0～2.4 kg；豚鼠：雌雄兼用，体质量：300～350 g。

1.3 试验仪器

电子天平，德国塞多利斯公司，型号：BS2202S，分度值10mg；水合氯醛，国药集团化学试剂有限公司，批号：20131204；甲醛溶液，国药集团化学试剂有限公司，批号：20131118。

2 方法与结果

2.1 血管刺激性试验[2-5]

2.1.1 供试品配制

盐酸莫西沙星注射液的供试品溶液的配制：原液。

2.1.2 实验

图1 病理学检查结果

取体质量2.0～2.4 kg健康合格、耳缘无损伤大耳白家兔4只，注射体积为5 mL/kg。采用同体左右侧自身对比法给药，4只于右侧耳缘静脉以无菌操作方法缓缓注射盐酸莫西沙星氯化钠注射液的供试品溶液，于左侧等速等量注射0.9%氯化钠注射液。每天给药一次，连续5天。给药后肉眼观察给药局部血管有无血栓形成，周围组织有无红、肿、瘀血等炎症反应。末次给药后24 h、48 h、72 h，及恢复期14天，病理组织学检查:于72 h处死1号、2号、3号家兔，分别于左右耳缘静脉注射处，各取1 cm长一段静脉血管连同周围组织，用10%的甲醛固定48 h，脱水、透明、包埋，3μm切片。观察有无血栓形成、内皮损伤及炎症变化。可逆性症状观察及病理组织学取样4号1只家兔，末次给药观察72 h后，每天进行一般情况观察和给药部位血管刺激性症状观察1次，连续观察14天，观察结束后同前述方法进行病理组织学检查，以了解刺激性反应的可逆程度。病理学检查结果：光学显微镜下观察，兔耳给药静脉与对照静脉血管均规则完整，血管壁无增厚，内皮细胞排列整齐，无血栓形成，血管周围无明显炎症反应及其他病理变化，见图1。

2.2 溶血与凝聚试验

取兔血约20 mL，放入烧杯中，用玻璃棒轻搅10min，除去纤维蛋白原，使之成为脱纤血液。加约10倍量的0.9%氯化钠注射液，摇匀、离心，除去上清液，沉淀的红细胞再用0.9%氯化钠注射液同法洗涤3次，至上清液不呈红色为止。将所得红细胞用0.9%氯化钠注射液稀释成2%的混悬液，供实验当天使用，用时摇匀。

2.2.1 实验方法

取试管7支，1～5号管为供试品管，6号管为阴性对照管，7号管为阳性对照管。按表4用量依次加入2%红细胞混悬液和0.9%氯化钠注射液或蒸馏水，混匀后，立即置37℃±0.5℃恒温箱中进行温育，开始每隔15min观察一次，1h后，每隔1h观察一次，连续观察3 h，如溶液呈澄明红色，表明有溶血发生，如溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，振摇后不分散，表明有红细胞凝聚发生。结果见表1和图2。

表1 盐酸莫西沙星氯化钠注射液溶血与凝聚试验

注：+溶血，++凝聚，-不溶血。

图2 各管至恒温箱温育180min拍照

2.3 过敏性试验[6]

盐酸莫西沙星氯化钠注射液的供试品溶液的配制：原液。

取体重300～350g健康豚鼠24只，分为四组，每组6只。第一组为阳性对照组，注射1%新鲜鸡蛋清0.5 mL/只；第二组为阴性对照组，注射0.9%氯化钠注射液0.5 mL/只；第三组为盐酸莫西沙星氯化钠注射液高剂量组，注射剂量为1.0 mL/只；第四组为盐酸莫西沙星氯化钠注射液低剂量组，注射剂量为0.5 mL/只。隔日每只每次腹腔注射，共3次，进行致敏。各组分别在末次致敏后10天静脉攻击，第一组为阳性对照组，注射1%新鲜鸡蛋清1.0 mL/只；第二组为阴性对照组，注射0.9%氯化钠注射液1.0 mL/只；第三组为供试品高剂量组2.0 mL/只，第四组为供试品低剂量组1.0mL/只。除阳性对照组外，其余各组豚鼠均不得出现过敏反应。第一组攻击后观察有竖毛、呼吸困难、抽搐、虚脱，3～5min后全部死亡，结果为阳性；第二组攻击后均无过敏反应，健康存活，结果为阴性；第三、四组攻击后均无过敏反应，健康存活，结果为阴性。 按全身致敏性评价标准评判为“0”，过敏反应为阴性。试验期间豚鼠体重增长良好，供试品组与阴性对照组比较未见明显异常。未引起豚鼠的过敏性反应。

3 讨论

盐酸莫西沙星氯化钠注射液的药理作用已有广泛的研究报道，但对其安全性的研究还少，盐酸莫西沙星注射液是我国于 2013 年审批上市的仿制药品种，加上近几年过敏反应增多，过敏反应的原因主要是合成、生产过程中引入的杂质，所以，有必要进行盐酸莫西沙星注射液的溶血、过敏和刺激反应的研究。盐酸莫西沙星氯化钠注射液在本实验条件下,在临床拟用量下，体外没有溶血作用和凝聚反应。不引起豚鼠主动过敏反应。对兔耳血管均无刺激作用。

参考文献

[1]朱文静,王少华,张淑立,等.盐酸莫西沙星氯化钠注射液治疗下呼吸道感染的药动学和药效学研究[J].中国药房,2013,24(22):2065-2067.

[2]国家食品药品监督管理总局.药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则[EB/OL].[2014-05-13].http://www.sda.gov.cn/WS01/CL1616/101018.html.

[3]袁伯俊,廖明阳,李 波.药物毒理学实验方法与技术[M].北京:化学工业出版社,2007:255-256.

[4]朱玉云,高允生,成立军,等.利巴韦林葡萄糖注射液的安全性评价[J].泰山医学院学报,1999,20(3):199-201.

[5]李学兰,姜隆梅,张 红,等.乳糖酸红霉素药物浓度和给药次数对血管刺激性的影响[J].泰山医学院学报,2002,23(3):227-228.

[6]国家食品药品监督管理总局.中药.天然药物免疫毒性(过敏性、光过敏性反应)研究技术指导原则[EB/OL].(2005-03-12)[2012-02-23].https://wenku.baidu.com/view/c6721524af45b307e8719725.html.