马国平+杨晨+王广基+朱萱萱+张迪+王健鲲
[摘要] 目的 比较9种临床常用润肺化痰中药的排痰效果,评价祛痰有效性,为临床应用提供理论依据。 方法 本研究选用9种临床常用润肺化痰中药:旋覆花、桔梗、浙贝母、金荞麦、前胡、川贝母、瓜蒌皮、百合、石斛,分别采用小鼠呼吸道酚红排痰量法、大鼠毛细管排痰量法观察其排痰效果。 结果 9种不同中药均可以增加小鼠呼吸道的酚红排痰量及大鼠毛细管的排痰量,与空白组比较差异有高度统计学意义(P < 0.01)。其中,百合、桔梗、旋覆花、瓜蒌皮、前胡、浙贝母的效果较佳。 结论 9种不同中药均有较好的祛痰效果,具有促进呼吸道分泌物增加的作用。
[关键词] 润肺化痰;中药;祛痰
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2017)03(a)-0016-04
Comparison of eliminating phlegm effects of 9 traditional Chinese medicine of moistening the lung and eliminating phlegm
MA Guoping1 YANG Chen1 WANG Guangji2 ZHU Xuanxuan1 ZHANG Di1 WANG Jiankun2
1.Department of Pharmacology, Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine, Jiangsu Province, Nanjing 210029, China; 2.Key Laboratory of Drug Metabolism and Pharmacokinetics, China Pharmaceutical University, Jiangsu Province, Nanjing 210009, China
[Abstract] Objective To observe the pharmacological phlegm expelling effect of nine clinical commonly used Chinese medicine of moistening the lung and eliminating phlegm, to evaluate their effectiveness and to provide theoretical foundation for clinical application. Methods This experiment selected 9 kinds of commonly used clinical Chinese medicine of moistening the lung and eliminating phlegm: Flos Inulae, Radix Platycodonis, Bulbus Fritillariae Thunbergii, Rhizoma Fagopyri Dibotryis, Radix Peucedani, Bulbus Fritillariae Cirrhosae, Pericarpium Trichosanthis, Bulbus Lilii, Herba Dendrobii. The phlegm expelling effect was observed by phenol red on mice and eliminating phlegm on rat capillary. Results Nine different Chinese medicine could apparently increase excretion of phenol red and phlegm from the respiratory tract, there were significant differences compared with the blank group (P < 0.01). Among them, Bulbus Lilii, Radix Platycodonis, Flos Inulae, Pericarpium Trichosanthis, Radix Peucedani, Bulbus Fritillariae Thunbergii had better effects. Conclusion Nine Chinese medicine have good expectorant effects and good productive role in promoting the effect of respiratory secretions.
[Key words] Moistening the lung and eliminating phlegm; Traditional Chinese medicine; Expectorant
近年來,人们对大气PM2.5的健康危害日益重视,对PM2.5致机体损伤的机制研究日趋深入,PM2.5虽然粒径小,但由于其相对表面积较大,能够吸附的重金属和其他有毒物质相对较多,并且也会加速这些物质在肺中的溶解度,在一定程度上会造成肺部损伤或引起继发性的血液学改变,引发心血管疾病,严重者甚至导致死亡。中药对PM2.5致肺损伤有一定的干预作用。本文选用临床常用的润肺化痰中药,分别为旋覆花、桔梗、浙贝母、金荞麦、前胡、川贝母、瓜蒌皮、百合、石斛,以这9种中药为研究对象,进行排痰作用的比较,以筛选祛痰效果较佳的中药,为临床用药提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药
氯化铵:南京化学试剂厂,批号100905;秋梨润肺膏:湖北武当金鼎制药有限公司,批号141122;旋覆花:批号20140721,产地河南;桔梗:批号20140721,产地安徽;浙贝母:批号20140721,产地浙江;金荞麦:批号20140721,产地江苏;前胡:批号20140721,产地浙江;川贝母:批号20140721,产地四川;瓜蒌皮:批号20140721,产地山东,以上中药材购自南京药业股份有限公司中药饮片厂。百合:批号20140827,产地江苏;石斛:批号20140827,产地云南,购自安徽省万生中药饮片有限公司。以上药材由江苏省中医院药学部药材库房提供,并由朱育凤主任药师鉴定。756PC紫外线分光光度计:上海光谱仪器有限公司;AR1140型电子分析天平:梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;苯酚红:上海试剂三厂,批号100914;氢氧化钠:广东西陇化工厂,批号20120610;玻璃点样毛细管(内径0.5 mm,长100 mm):华西医科大学仪器厂提供。
1.2 实验动物
ICR小鼠:雌雄各半,18~22 g,由南通大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK(苏)2014-0001。SD大鼠:雄性,180~220 g,南京军区总医院提供,合格证号:SCXK(军)2012-0014。全价营养颗粒饲料:江苏省协同医药生物技术有限公司提供,合格证号:20150107。饲养环境:室温(20±2)℃,湿度55%~65%,光照适度,通风洁净良好。
1.3 药物配制及给药方法
1.3.1 小鼠给药配制方法 氯化铵:精密称取氯化铵5.0 g,加蒸馏水至100 mL,配成浓度为0.05 g/ mL溶液。按0.2 mL/10 g灌胃给药。秋梨润肺膏:规格140 mL(180 g)/瓶,13.3 g(10 mL)/kg(临床人用剂量的20倍),取药液原液50 mL,加50 mL双蒸水稀释,按0.2 mL/10 g灌胃给药。旋覆花的配制:取0.5 kg旋覆花中药饮片,加蒸馏水浸泡1 h后煎煮2次,第1次1 h,第2次40 min;将一煎和二煎合并浓缩至500 mL,配制成1 g/mL的药液,按0.2 mL/10 g灌胃给药。其他各组煎煮方法及给药方法同上。
1.3.2 大鼠给药配制方法 氯化铵:精密称取氯化铵10.0 g,加蒸馏水至100 mL,配成浓度为0.1 g/mL溶液。按0.8 mL/100 g灌胃给药。秋梨润肺膏:规格140 mL(180 g)/瓶,10.66 g/kg(临床人用剂量的16倍),取秋梨润肺膏原液50 mL(1.29 g/mL),加蒸馏水至100 mL,配成0.645 g/mL的秋梨润肺膏溶液,按1.64 mL/100 g灌胃给药。旋覆花的配制:取0.5 kg旋覆花中药饮片,加蒸馏水浸泡1 h后煎煮2次,第1次1 h,第2次40 min;将一煎和二煎合并浓缩至500 mL,配制成1 g/mL的药液,按1.6 mL/100 g灌胃给药。其他各组煎煮方法及给药方法同上。
1.4 实验方法
1.4.1 不同中药对小鼠呼吸道酚红排痰量的影响[2-3] 取120只健康ICR小鼠,雌雄各半。称重后,按体重随机分为12组,分别为空白组、氯化铵组、秋梨润肺膏组、旋覆花组、桔梗组、浙贝母组、金荞麦组、前胡组、川贝母组、瓜蒌皮组、百合组、石斛组,每组10只。按不同分组灌胃给予相应的药液,0.2 mL/10 g灌胃给药,连续给药10 d。末次给药1 h后,腹腔注射酚红0.1 mL(5 mg)/10 g体重,注射酚红后半小时,处死动物,剥离气管周围组织,剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管,放入盛有2 mL生理盐水的试管中,再加1 mol/L氢氧化钠,用756PC紫外线分光光度计,波长546 nm处测OD值,与对照组比较。根据所测出的OD值,根据酚红标准曲线方程计算小鼠酚红的排泌量。
1.4.2 不同中药对大鼠毛细管排痰量的影响[4-6] 取SD大鼠120只,雄性,称重后,按体重随机分为12组,分组同“1.4.1”。适应饲养3 d后,按不同分组灌胃给予相应剂量的药液,10 mL/kg灌胃给药,连续给药10 d。实验前禁食不禁水8~12 h,于末次给药后,10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉,仰位固定。剪开颈中部皮肤,分离出气管,在甲状腺软骨下缘正中两软骨环之间用尖锐的注射针头扎一小孔,然后插入预先采用肝素化的玻璃毛细管一根,使毛细管刚好接触气管底部表面,借以吸取气管后部之痰液。当痰液充满毛细血管时,立即另换一根。以毛细管吸取痰液长度作为评价药物的化痰效果。记录2 h各组痰液的分泌量,比较各给药组平均每小时痰液分泌量,并作统计学分析。
1.5 统计学方法
采用SPSS 19.0统计软件进行统计分析,计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,重复测量的计量资料采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 对小鼠呼吸道酚红排痰量的影响
2.1.1 酚红标准曲线及方程 用分析天平精确称取0.05 g酚红,加1 mL 5%碳酸氢钠溶解,配成1 mL含50 μg,然后顺次稀释成每毫升含酚红0.025、0.0125、0.006 25、0.003 125、0.001 562 5、0.000 781 25、0.000 390 625 μg,用分光光度计测OD值,其相对应的OD值分别为1.665、0.860、0.423、0.221、0.115、0.054、0.039。以OD值为横坐标,酚红浓度为纵坐标,各交点连成直线,即为酚红标准曲线,见图1。根据标准曲线得到酚红标准曲线线性方程:y=0.0150x-0.0002,R2 = 0.9998。
2.1.2 不同润肺化痰中药对小鼠体重及气管酚红排泌量(OD值和酚红浓度)的影响 灌服川贝母的小鼠体重与空白组比较明显减轻(P < 0.01),其他各组小鼠体重与空白组比较差异均无统计学意义(P > 0.05)。根据紫外分光光度计所测出的OD值,按酚红标准曲线方程计算小鼠酚红的排泌量。与空白组比较,各中药组小鼠气管分泌物的酚红浓度都明显增大,差异有高度统计学意义(P < 0.01)。提示:选取的9种中药中川贝母可能会使小鼠体重减轻,其他的中药对小鼠体重影响不明显。9种润肺化痰中药均可使小鼠的气管分泌物酚红含量增加,具有较好的排痰作用,其中以桔梗组、百合组效果最佳。见表1~2。
2.2 不同润肺化痰中药对大鼠体重及毛细管排痰量的影响
灌服旋覆花、桔梗、浙贝母、金荞麦、前胡、川贝母、瓜蒌皮、百合、石斛这9种中药的大鼠体重与空白组比较差异均无统计学意义(P > 0.05),9种中药的毛细管吸取痰液长度均明显增加,与空白组比较差异有高度统计学意义(P < 0.01)。表明选取的9种中药均可以促进呼吸道分泌物外排,具有良好的排痰作用。其中,百合、旋覆花、瓜蔞皮、前胡、浙贝母的祛痰效果较佳。见表3。