丙型肝炎患者基因分型与抗HCV、HCV-RNA的相关性研究

冀敏

(新乡市妇幼保健院检验科，河南新乡453000)

丙型肝炎患者基因分型与抗HCV、HCV-RNA的相关性研究

冀敏

(新乡市妇幼保健院检验科，河南新乡453000)

目的探讨丙型肝炎患者基因分型与抗HCV、HCV－RNA的相关性，为丙型肝炎的防治提供参考。方法选取2015年6月－2016年6月期间诊治的80例丙型肝炎患者，以ABI3500dx基因测序仪对基因分型进行测序，确定基因分型，以化学发光法检测抗HCV浓度，计算测定值/临界值（S/CO）比值，采用荧光定量PCR技术检测HCV－RNA浓度。结果患者基因分型主要为1b、1c、2a分别有48例、14例、8例，占60．00%、17．50%、10．00%，其中1型共62例、非1型18例，分别占77．50%、22．50%；抗HCV阳性者79例、HCV－RNA阳性者53例，阳性率分别为98．75%、66．25%；基因型1型的患者抗HCV（S/CO）比值、HCV－RNA浓度分别为（13．27±3．33）、（6．54±1．24）×106copies/ml均高于非1型患者（11．28±3．25）、（5．86±1．03）× 106copies/ml，比较差异有统计学意义（P＜0．05）；HCV－RNA阳性患者抗HCV(S/CO）比值为（13．33±4．39）高于阴性患者（9．74± 3．84），比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论丙型肝炎患者基因分型主要为1b、1c、2a，不同基因型时抗HCV、HCV－RNA浓度不同，基因分型与抗HCV、HCV－RNA的之间存在一定相关性。

丙型肝炎；基因分型；抗HCV；HCV－RNA

肝脏是人体重要代谢器官，在肝脏受损时可发生代谢异常，最终部分患者可发生肝衰竭等病变引起死亡。病毒性肝炎是肝脏最常见的传染性疾病，是由肝炎病毒感染所致，其中丙型肝炎病毒（HCV）感染所致的丙型肝炎在病毒性肝炎中占到第二位，在我国人群感染率在0．1%～10%之间[1，2]，其中80%的患者为慢性病变，丙型肝炎患者中约20%的患者可发展为肝硬化，因此丙型肝炎的防治与乙型肝炎有同等重要地位。本研究对丙型肝炎患者基因分型与抗HCV、HCV－RNA的相关性进行了研究，为丙型肝炎的防治提供参考，结果报道如下。

1 资料与方法

1．1临床资料选取2015年6月－2016年6月期间诊治的80例丙型肝炎患者，纳入标准：⑴均符合丙型肝炎诊断标准[3]。⑵年龄≥18岁。⑶患者自愿进行本研究，知情同意。排除标准：⑴合并有甲、乙、丁、戊等其他肝炎病毒感染。⑵合并有酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝、肝脏肿瘤特异性免疫原性肝病等其他肝脏疾病。⑶妊娠期及哺乳期妇女。80例患者临床资料分布及构成比见表1。

表1 患者临床资料分布及构成比（%）

1．2方法抽取患者空腹外周静脉血，以EDTA抗凝血浆TRlzo LS试剂提取法提取HCV－DNA，采用ABI3500dx基因测序仪对基因分型进行测序，确定基因分型；以HCV核酸定量检测试剂盒采用荧光定量PCR技术检测HCV－RNA浓度；对抽取患者外周血液标本，以化学发光法检测抗HCV浓度，计算测定值/临界值（S/CO）比值，（S/CO）比值≥1为阳性。

1．3统计学方法数据采用SPSS 19．0统计学软件进行统计分析，计量资料采用t检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1患者基因分型分布及构成比与抗HCV、HCVRNA阳性率分布患者基因分型主要为1b、1c、2a，分别有48例、14例、8例，占60．00%、17．50%、10．00%，其中1型共62例、非1型18例，分别占77．50%、22．50%，见表2；抗HCV阳性者79例、HCV－RNA阳性者53例，阳性率分别为98．75%、66．25%，见表3。

表2 患者基因分型分布及构成比（%）

表3 患者基因分型、抗HCV、HCV-RNA阳性率（%）分布

2．2不同基因分型患者抗HCV浓度及HCV－RNA比较基因型为1型的患者抗HCV（S/CO）比值、HCV－RNA浓度分别为（13．27±3．33）、（6．54±1．24）× 106copies/ml均高于非1型患者（11．28±3．25）、（5．86±1．03）×106copies/ml，比较差异有统计学意义（P＜0．05），见表4。

表4 不同基因分型患者抗HCV（S/CO）比值及HCV-RNA比较（x±s）

2．3 HCV－RNA不同定性患者抗HCV浓度比较HCV－RNA阳性患者抗HCV(S/CO）比值为（13．33± 4．39）高于阴性患者（9．74±3．84），比较差异有统计学意义（P＜0．05），见表5。

表5 HCV-RNA不同定性患者抗HCV(S/CO）比值比较（x±s）

3 讨论

丙型肝炎与肝脏病变的严重程度、干扰素应答等均有密切关系，对HCV基因型进行检测对于HCV的感染及治疗可提供一定参考依据，目前临床研究显示HCV基因型主要分为1、2、3、4、5、6六个基因型及68个亚型，在不同国家和地区HCV基因型分布稍有不同[4－7]，全球范围内1型和2型均有流行，欧洲部分国家、北美及亚洲地区主要流行3型，欧洲部分国家、中东及中非流行4型，欧洲部分国家及非洲流行5型，6型在北美部分地区及东南亚相对多见，在我国则主要以1b期2a型相对多见[8，9]，其中1b型占优势，混合型则主要在有输血史及吸毒史患者中相对多见，本研究中丙型肝炎患者基因分型主要为1b、1c、2a，分别占60．00%、17．50%、10．00%，其中1型共62例、非1型18例，分别占77．50%、22．50%，基因型分布趋势与临床报道现状一致，同时也有6例患者为混合型。

HCV是RNA病毒，感染后可引起肝细胞的慢性损伤，在患者体内可出现免疫功能的紊乱，HCV病毒可激活自身反应性CD8T细胞，诱导出现自身免疫，抗HCV是HCV感染后产生的抗体，能反应出机体免疫应答状态，HCV-RNA则是反应病毒水平的一项主要指标[10，11]，以上两项指标均是临床HCV检测常用指标，有的患者可表现为以上两项指标同时阳性，有时为单一阳性，HCV-RNA检测窗口期一般在1~2周，抗HCV检测窗口期在15d左右，两者窗口期接近，但是临床报道显示抗HCV漏诊率相对较高，因此HCV-RNA相对于抗HCV准确性更高，而且HCV-RNA阴性这也不能排除HCV感染，抗HCV阴性时也不能排除HCV感染，比如患者正处于病毒复制不活跃状态则HCVRNA可能出现阴性，在血清抗体尚未转阳的窗口期可出现抗HCV阴性，因此是否确定HCV感染需对以上两项指标进行同时检测。本研究中80例丙型肝炎患者抗HCV阳性者79例、HCV-RNA阳性者53例，阳性率分别为98.75%、66.25%，HCVRNA阳性率低于抗HCV阳性率，分析原因，可能是由于纳入病例已经均得到一定时间段的治疗，患者非保护性抗体均基本产生，而HCV-RNA已经部分患者转阴。有报道显示丙型肝炎基因型与抗HCV、HCV-RNA之间缺乏相关性支持证据、有报道认为之间存在一定相关性[12-16]，本研究对不同基因型患者抗HCV（S/CO）比值及HCV-RNV浓度进行了比较，结果显示基因型1型的患者抗HCV（S/CO）比值、HCV-RNA浓度均高于非1型患者，HCV-RNA阳性患者抗HCV(S/CO）浓度高于阴性患者，提示基因型与抗HCV及HCV-RNA之间有一定相关性，是否是1型基因型患者多为难治性丙型肝炎患者有关，尚需要进一步研究，而且本研究样本量也较少，未能将1型基因型及其他基因型进一步行抗HCV及HCV-RNA水平的比较，是否也存在一定差异性尚不确定。

丙型肝炎患者基因分型主要为1b、1c、2a，不同基因型时抗HCV（S/CO）比值、HCV-RNA浓度不同，基因分型与抗HCV、HCV-RNA的之间存在一定相关性，但尚需要大样本数据进一步研究对本结果进行支持。

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Relationship between HCV genotypes，Anti HCV and HCV-RNA in patients with chronic hepatitis

C JI Min.Department of Clinical Laboratory，Xinxiang Maternal and Child Health Hospital，Xinxiang Henan，453000，China.

Objective To discuss relationship between HCV genotypes，Anti HCV and HCV－RNA in patients with chronic hepatitis C，and provide reference for prevention and control of chronic hepatitis C．Methods Eighty cases in patients with chronic hepatitis C from June 2015－June 2016 were included．The HCV genotypes were determined by ABI3500dx gene sequencing machine，and the level of serum Anti HCV was measured with Chemiluminescence method，determining the value calculation/critical value(S/CO)，the level of serum HCV－RNA was measured with Light real－time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction system．Results Among the 80 cases，48 cases(60．00%)for 1b，14 cases(17．50%)for 1c，8 cases(10．00%) for 1a，62 cases(77．50%)for 1 type HCV infection，18 cases(22．50%)for no 1 type HCV infection；79 cases(98．75%)for Anti HCV positive，53 cases(66．25%)for HCV－RNA positive；HCV（S/CO）were(13．27±3．33)and HCV－RNA were(6．54±1．24)×106copies/ml in patients with 1 type，HCV（S/CO）were(11．28±3．25)and HCV－RNA were(5．86±1．03)×106copies/ml in patients with no 1 type，the difference was statistically significant(P＜0．05)；HCV（S/CO）were(13．33±4．39)in HCV－RNA positive，HCV（S/CO）were(9．74±3．84)in HCV－RNA negative，the difference was statistically significant(P＜0．05)．Conclusion HCV lb，1c and 2a are the main prevalent genotypes in patients with chronic hepatitis C，and there is certain correlation between different Anti HCV and HCV－RNA of different genotypes．

Chronic hepatitis C；Genotypes；Anti HCV；HCV－RNA

R446．62，R512．6+3，Q523

A

1674－1129(2017)02－0202－03

10．3969/j.issn.1674－1129．2017．02．020

2016-11-08；

2017-02-27)

冀敏，女，1975年生，本科学历，学士学位，主管检验师，研究方向：免疫学。