灰树花子实体喷硒对其硒及矿质元素和粗多糖含量的影响

李红侠 方雪梅 刘江南 李 阳 张 颖 杨宜银

（宿州学院生物与食品工程学院，安徽宿州234000）

硒是一种较稀有的重金属元素，1973年世界卫生组织（WHO）宣布，硒是人体必需的14 种微量元素之一[1]，同时是谷胱甘肽过氧化物酶的组成成分[2]，机体缺硒产生如肝病、大骨节病、癌症、免疫功能低下等各种疾病。人体必需的这种硒元素，人们对它的认识越来越深，近几十年以来一直进行与硒相关的疾病的研究，诸如心血管疾病，癌症，帕金森病，心律失常等，一些克山病更是由于缺硒导致[3～4]。我国72%的地区缺硒，中国营养学会推荐日摄入硒量50～200 μg，而我国居民为26～32 μg，这就意味着我国居民膳食缺硒[5～8]。

随着人们生活水平的提高，健康意识的增强，食用菌的摄入量逐渐增加，它不仅具有较高的营养价值，还能防癌、抗癌、增强人体免疫力，是其他食物所不能替代的，尤其食用菌中的多糖能消除自由基、抗病毒和抗肿瘤[9]。灰树花（Grifola frondosa），又名多孔菌，莲花菌，子实体中不仅含有较高的蛋白质、膳食纤维，还富含多种有益的矿物质（K、P、Fe、Zn、Ca、Se 等），多糖[10～11]，灰树花多糖对肿瘤细胞的增长具有较强的抑制作用[12～13]。K、Mg、Zn 等矿质元素在人生理活动中起着重要作用[14～20]，食用菌具有较强的富硒能力，灰树花硒含量高，具有较好的抵御癌肿瘤和抗爱滋病毒等作用。灰树花富硒的研究大多是在菌丝体或培养基层面[21-22]，灰树花多糖的研究国内外较多，而子实体喷硒对其矿质元素及硒的影响报道较少。因此，通过子实体喷硒来改善食用菌硒含量及其他矿物质的含量具有重要意义。

试验旨在探讨喷施不同质量浓度硒液（Na2SeO3）对灰树花子实体中硒的富集及几种主要矿质元素和粗多糖含量的影响，以期找到较适宜的喷施量，提高灰树花子实体中硒、矿质元素和粗多糖的含量，为灰树花在食品、医药以及硒在其他食用菌上应用提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 试验材料灰树花菌种（菌种号:WS1号，安徽宿州市食用菌生产基地供应），杂木屑，棉子壳，麸皮，玉米粉等市场购买。

1.2 试验方法将培养好的灰树花原种，接种到栽培种培养基中（栽培种培养基的原料杂木屑，棉子壳，麸皮，玉米粉等，按照一定的比例混匀装入聚丙烯栽培袋中，经高压灭菌），培养基含水量65%，pH6.0 左右，菌丝黑暗条件下培养（温度23℃左右，相对湿度70%），35～45 d后，菌丝长满袋，拿出等待出菇。待菇蕾长至珊瑚期，开始喷硒，硒以亚硒酸钠计，硒的质量浓度20，40，60，80，100，150 mg/L，每天1 次，向子实体上均匀喷至雾状水滴，连续10 d，对照以喷去离子水。每个处理，重复3 次。数据用SPSS17.0软件处理。

1.3 灰树花子实体中矿质元素的测定灰树花子实体收获后，于烘箱中烘至恒重，温度40℃，用粉碎机打成粉末，过200 目筛，待用。每个样品，分别准确称取0.5000 g，置于100 mL 的烧杯中，加消化液15～20 mL（消化液的组成高氯酸∶硝酸，体积比为1∶4，二者均为优级纯），于通风橱中小火缓缓加热，有黄色浓烟产生，待反应缓和后，拿出通风橱冷却后，沿杯壁加入15～20 mL去离子水，继续置于通风橱中缓慢加热，待溶液变为无色，停止消化，冷却后，加去离子水定容至100 mL。Se，K，Mg，Zn 用火焰原子吸收光谱法测定。

1.4 标准回归曲线由表1 可知，相关系数均在0.99以上。

1.5 灰树花子实体中粗多糖的测定[23～26]取已处理好的子实体粉末，准确称取5 g→于2000 mL 超纯水中，热水90～95℃，超声波，功率600 W，处理时间25 min→离心（5000 r/min，10 min）→将上清液真空浓缩至15 mL，用Sevage 试剂（氯仿∶正丁醇=5∶1）去蛋白2 次→3 倍无水乙醇沉淀→4℃冰箱12 h→离心（5000 r/min，10 min）→除去上清液→将沉淀收集，用无水乙醇洗涤3次→冷冻干燥得粗多糖。

2 结果与分析

2.1 灰树花子实体喷硒对其K含量的影响从图1可看出，灰树花子实体喷不同质量浓度的硒后，子实体中矿质元素K 的含量均高于对照，与对照相比均达到了极显著水平，通过LSD 比较各处理间也均达到极显著差异，当硒质量浓度为20、80 mg/L 时，效果最好，分别高于对照10.9%和9.2%。

2.2 灰树花子实体喷硒对其Se含量的影响由图2可见，喷施不同质量浓度硒，灰树花子实体中Se 含量与对照相比，均达到极显著差异，当喷硒质量浓度为60 mg/L时，子实体中Se含量最高，是对照的12倍，可见灰树花具有较强的富硒能力。不同喷施硒浓度间，灰树花子实体硒含量表现出极显著差异。

2.3 灰树花子实体喷硒对其Mg含量的影响从图3可知，喷施不同质量浓度的硒对灰树花中Mg 含量与对照，均有极显著差异，尤其是喷硒质量浓度在20、80 mg/L 时，灰树花子实体Mg 含量最高，分别高于对照28.94%和40.11%。40 mg/L 与100 mg/L 处理，子实体中Mg 含量没达到显著差异，其余各处理间Mg含量均达到极显著差异。

2.4 灰树花子实体喷硒对其Zn含量的影响由图4可见，灰树花子实体喷硒后，子实体矿质元素Zn 含量与对照差异极显著，各处理间的差异也极显著。20、80 mg/L 处理，Zn 含量分别高于对照74.08%和150.82%，而当硒浓度高于80 mg/L 后，子实体中Zn含量反而下降。

2.5 灰树花子实体喷硒对其粗多糖含量的影响从表2可以看出，随喷硒质量浓度的上升，灰树花子实体中粗多糖的含量也逐渐增加，但喷硒质量浓度20、40 mg/L，粗多糖的含量虽增加，但没达到显著差异，喷硒质量浓度60～150 mg/L，灰树花子实体粗多糖的含量与对照，均达到极显著差异，当硒质量浓度达到100 mg/L，灰树花子实体粗多糖的含量达到最高，高于对照61.3%，当喷硒质量浓度高于100 mg/L，子实体粗多糖的含量不再增加。

表1 各元素回归方程

图1 灰树花子实体喷硒对其K含量的影响

图2 灰树花子实体喷硒对其Se含量的影响

图3 灰树花子实体喷硒对其Mg含量的影响

图4 灰树花子实体喷硒对其Zn含量的影响

表2 喷不同质量浓度的硒灰树花子实体粗多糖含量

3 小 结

灰树花子实体喷硒，可以较好的富集硒，这对发展富硒食用菌有着广阔的前景，也为人们膳食补硒提供了条件。试验结果表明:过高质量浓度硒不利于灰树花子实体硒积累，其机理有待进一步研究。喷硒，也改变了灰树花子实体对矿质元素（K、Zn、Mg）的吸收，它们的吸收有两个高峰点，均是喷硒质量浓度20 mg/L 和80 mg/L 时。喷施20 mg/L 对K 积累效果最好，而对Zn 和Mg 积累，都是喷硒80 mg/L最好。喷施100 mg/L硒，灰树花子实体中粗多糖的含量达到最高。综合试验结果喷硒质量浓度在60～100 mg/L时较为适宜。