急性脑梗死患者蛋白C活性依赖凝固时间标准化比值降低

伍柏青，傅颖媛

(1.南昌大学基础医学院免疫学教研室，南昌 330006；2.江西省人民医院检验科，南昌 330006)

·临床实验研究·

急性脑梗死患者蛋白C活性依赖凝固时间标准化比值降低

伍柏青1,2，傅颖媛1

(1.南昌大学基础医学院免疫学教研室，南昌 330006；2.江西省人民医院检验科，南昌 330006)

目的 观察急性脑梗死患者蛋白C活性依赖凝固时间标准化比值(PCAT-NR)与相关凝血指标纤维蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅶ活性(FⅦ:C)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)、抗凝血酶(AT)、D二聚体(DD)的相关性。方法 经临床及影像学确诊急性脑梗死患者100例为病例组，选取75例体检健康者为健康人对照组，检测Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、AT、PCAT-NR、DD并比较两组间差异；分析急性脑梗死患者PCAT-NR下降组与PCAT-NR正常组Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、DD、AT结果差异；分析急性脑梗死患者PCAT-NR与其他凝血指标的相关性。结果 急性脑梗死组Fib(3.38±1.25)g/L、FⅦ:C(130.5±15.9)%、FⅧ:C(135.8±43.1)%、DD(2.12±3.01)mg/L均高于健康人对照组，而AT(83.94±14.95)%、PCAT-NR(0.87±0.23)结果均低于健康人对照组,P均<0.05；急性脑梗死组患者PCAT-NR下降组Fib(4.03±1.25)g/L、FⅦ:C(138.2±6.9)%和FⅧ:C(151.5±54.9)%结果均高于正常组(P均<0.05)，而DD、AT差异无统计学意义(P均>0.05)；急性脑梗死患者PCAT-NR与Fib、FⅧ:C、DD呈负相关(r分别为-0.484、-0.356、-0.473，P均<0.05)，与FⅦ:C、AT无相关性(P均>0.05)。结论 急性脑梗死患者PCAT-NR水平下降与高凝状态有关，与Fib和凝血因子Ⅷ活性有一定关联。

急性脑梗死；蛋白C活性依赖凝固时间标准化比值；凝血因子Ⅷ；抗凝血酶；D二聚体

急性脑梗死发病原因主要是血栓形成栓塞导致缺血，影像学检查是血栓形成的可靠依据。急性脑梗死发病涉及多项凝血指标异常，如凝血因子活性升高、抗凝指标下降及纤溶指标升高等。抗凝系统指标主要包括抗凝血酶(AT)、蛋白C(PC)和蛋白S(PS)。ProC Global试验是通过测定血浆蛋白C系统的抗凝能力，诊断获得性或遗传性蛋白C系统缺陷的凝固实验，其参数为蛋白C活性依赖凝固时间标准化比值(protein C activity-dependent clotting time normalized ratio，PCAT-NR)。本研究观察纤维蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅶ活性(FⅦ:C)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)等促凝指标，抗凝血酶(AT)、PCAT-NR等抗凝指标，D二聚体(DD)等纤溶指标在急性脑梗死患者中的变化，探讨PCAT-NR与Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、AT、DD的相关性，及其在临床应用中的意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 2013年12月至2014年11月江西省人民医院神经内科收治的诊断明确、资料完整的急性脑梗死患者100例，男69例，女31例，年龄40～89岁，平均65岁；其中，高血压75例；2型糖尿病31例，糖耐量受损1例；高血脂13例；动脉粥样硬化者15例(15.0%)；心房颤动10例(10.0%)。急性脑梗死的诊断标准参考文献[1];排除脑外伤、中毒、癫痫、瘤卒中、出血性脑卒中、高血压脑病、血糖异常、脑炎及躯体重要脏器功能检查障碍等引起的脑部病变。健康人对照组75例，男50例，女25例，年龄范围35～78岁，平均58岁，体检均合格。研究对象年龄、性别差异均无统计学意义。

1.2 试剂与仪器 标准人类血浆、乏Ⅶ因子血浆、乏Ⅷ因子血浆、氯化钙溶液及APTT、Fib、DD、AT、Proc Global等试剂购自德国西门子公司，CS-5100全自动血凝分析仪(日本Sysmex公司)。

1.3 标本采集与处理 采集研究对象静脉血，枸橼酸钠抗凝，2 000×g离心10 min，分离血浆，若凝固、溶血、脂血或标本量不符均重新采血。

1.4 标本检测 质控合格后检测样本。Fib、DD、AT等在血浆分离后立即检测；而ProC Global、FⅦ:C、FⅧ:C等在标本(-80 ℃保存)收集完成后同时检测。

1.5 PCAT-NR检测 测定标准人血浆PCAT和缓冲液PCAT-0，PCAT与PCAT-0的商乘以试剂标注的敏感系数(sensitivifv value，SV)，得到校准因数(calibration factor，CF)，即CF=SV×(PCAT/PCAT-0)。测定患者血浆PCAT和缓冲液PCAT-0，PCAT与PCAT-0的商再乘以CF，得到标准化比值(normalized ratio，NR)，公式为PCAT-NR=(PCAT/PCAT-0)×CF。

2 结果

2.1 急性脑梗死组与健康人对照组患者凝血指标结果 见表1。急性脑梗死组患者血浆Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、DD均高于健康人对照组(P均<0.05)，血浆AT和PCAT-NR均低于正常组(P均<0.05)。

表1 急性脑梗死患者与健康人对照组凝血指标结果

注：*，P<0.05。

2.2 PCAT-NR下降与PCAT-NR正常患者凝血指标结果 根据PCAT-NR参考值0.69～1.56为标准，将急性脑梗死患者分为PCAT-NR正常组和PCAT-NR下降组，PCAT-NR下降组患者Fib、FⅦ:C和FⅧ:C血浆水平均高于正常组(P<0.05)；而DD、AT结果差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 急性脑梗死患者PCAT-NR下降和正常组凝血指标结果

注：*，P<0.05。

2.3 PCAT-NR与Fib、FⅦ:C、FⅧ:C、DD、AT相关性 急性脑梗死组患者Fib、FⅧ:C和DD与PCAT-NR呈负相关(r分别为-0.484、-0.356、-0.473，P均<0.05)；而FⅦ:C、AT与PCAT-NR无相关性(r分别为-0.108、0.133，P均>0.05)。

3 讨论

脑血管疾病中与血栓形成栓塞相关的主要有短暂性缺血发作、脑梗死与颅内静脉及静脉窦血栓形成3类，其中以脑梗死所占比例最高；其危险因素包括遗传性的凝血因子、抗凝因子、纤溶因子及血小板的问题，也有获得性因素，如高血压、电解质紊乱、血脂、吸烟与酗酒及糖尿病等[2]。

急性脑梗死患者Fib、FⅦ:C、FⅧ:C均高于健康人对照组，说明凝血因子的高活性与其发病紧密关联。DD是血栓形成标志物，其升高提示继发性纤溶亢进，血栓形成；急性脑梗死患者脑血管内形成血栓，DD高于健康人对照组。AT是血浆中主要生理性抗凝物质，脑梗死患者发病时机体处于高凝状态，凝血功能亢进，消耗大量AT。急性脑梗死组患者AT结果低于健康人对照组，说明其致病因素和AT下降有关。

血液高凝状态是导致脑梗死的主要风险因素之一。活化蛋白C灭活凝血因子Ⅴa和Ⅷa，阻碍凝血因子Ⅹa与血小板结合，促进纤维蛋白的溶解。当蛋白C系统存在缺陷时，其对凝血系统的抑制将减弱，导致血液呈高凝状态。ProC Global试验反映促凝和抗凝因子之间的相互作用，可作为一项独立的血栓形成倾向的危险因素，对凝血因子ⅤLeiden抵抗及蛋白C和蛋白S缺陷、促凝血因子水平升高敏感[3-4]，可筛选这类抗凝系统缺陷的血栓疾病。对于PC活性低于正常值70%的检出率为90%，PS活性低于正常值60%的检出率为89%，凝血因子Ⅴ Leiden突变的检出率为100%，对检查凝血因子Ⅱ20210 G→A突变的敏感性为84%[5-7]。急性脑梗死患者PCAT-NR为0.87±0.23，低于健康人对照组的1.09±0.15，说明急性脑梗死患者存在PC系统的抗凝缺陷，反映血栓易形成倾向。急性脑梗死患者PCAT-NR下降组Fib、FⅦ:C和FⅧ:C结果均高于PCAT-NR正常组，说明PCAT-NR下降与凝血因子水平升高相关。急性脑梗死患者 PCAT-NR与Fib、FⅧ:C、DD呈负相关，而与FⅦ:C、AT无相关性，说明ProC Global试验和AT虽然均是抗凝系统试验，但前者反映血浆蛋白C系统的整体抗凝能力，与AT是否正常无相关性。综上所述，PCAT-NR是重要的抗凝系统缺陷诊断指标，ProC Global试验是易栓症的重要筛选试验，PCAT-NR水平下降与急性脑梗死患者高凝状态有关，与Fib、凝血因子Ⅷ高水平有一定关联。

[1]中华医学会神经病学分会脑血管病学组急性缺血性脑卒中诊治指南撰写组．中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010[J]．中华神经科杂志，2010，43(2)：146-153．

[2]王振义，李家增，阮长耿，等.血栓与止血基础理论与临床[M].上海科学技术出版社，2004：82-94.

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[5]Chatterjee T，Gupta N，Choudhry VP，etal. Prediction of ischemic stroke in young Indians: is thrombophilia profiling a way out? [J]Blood Coagul Fibrinolysis, 2013, 24(4): 449-453.

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[7]Toulon P, Perez P, Rapp J,etal. An abnormal ProC Global test result is associated with an increased risk of venous thromboembolism independent of test sensitivity for protein C pathway abnormalities[J]. Thromb Haemost, 2007, 98(1): 228-233.

(本文编辑：王海燕)

Decreased protein C activity-dependent clotting time normalized ratio in patients with acute cerebral infarction

WUBai-qing1,2,FUYing-yuan1

(1.TeachingandResearchSectionofImmunology,CollegeofBasicMedicine,NanchangUniversity,Nanchang330006,Jiangxi; 2.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofJiangxiProvince,Nanchang330006,Jiangxi,China)

Objective To observe the correlation between protein C activity-dependent clotting time-normalized ratio (PCAT-NR) and the related blood coagulation parameters, e.g., fibrinogen (Fib), factor Ⅶ coagulant activity (Ⅶ: C), factor Ⅷcoagulant activity (FⅧ: C), antithrombin (AT), D-dimer (DD) in patients with acute cerebral infarction. Methods One hundred cases of patients who were diagnosed as acute cerebral infarction according to clinical manifestations and imaging examinations were taken as the test group and 75 healthy subjects were taken as control group. The values of Fib, FⅦ: C, FⅧ: C, AT, PCAT-NR, DD were tested and the difference between the two groups were compared. The differences of Fib, FⅦ:C, FⅧ:C, DD and AT between declined PCAT-NR group and normal PCAT-NR group in the patients with acute cerebral infarction were analyzed. The correlations of PCAT-NR with other coagulation parameters in acute cerebral infarction cases were compared. Results The values of Fib (3.38±1.25) g/L, FⅦ: C (130.5±15.9)%, FⅧ: C (135.8±43.1)% and DD (2.12±3.01) mg/L in the acute cerebral infarction group were significantly higher than those of control group, while the values of AT (83.94±14.95)% and PCAT-NR (0.87±0.23) in test group were significantly lower than those the control group (P<0.05). The values of Fib (4.03±1.25)g/L, FⅦ: C (138.2±6.9)% and FⅧ: C (151.5±54.9)% of PCAT-NR declined group in the patients with acute cerebral infarction were significantly higher than those of PCAT-NR normal group (P<0.05), while the values of DD, AT were not statistically different between two groups (P>0.05). The values of PCAT-NR were significantly negatively correlated with Fib, FⅧ: C and DD in the patients with acute cerebral infarction (r=-0.484, -0.356 and -0.473, respectively (allP<0.05). There was no correlation of PCAT-NR with FⅦ: C and AT (P>0.05). Conclusion The PCAT-NR decline was associated with high coagulation state in patients with acute cerebral infarction. This decline has some correlation with high level of blood clotting factor Ⅷ and Fib.

acute cerebral infarction; protein C activity-dependent clotting time normalized ratio; clotting factor Ⅷ; antithrombin; D-dimer

10.13602/j.cnki.jcls.2017.02.11

伍柏青，1975年生，男，副主任技师，硕士，主要从事血液学检验工作，E-mail:13507916536@163.com。

R446.11;R651.1

A

2016-12-21)