葡萄果肉提取物抗氧化能力研究

俞景圣++闫如梅++陈兆东++王少磊++储军

摘要 研究葡萄果肉不同提取物的抗氧化能力，测定不同果肉提取溶液对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除率以及抗脂质过氧化的保护作用。结果表明：葡萄果肉提取物溶液能清除羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基，有抗脂质过氧化活性和还原能力，说明葡萄果肉提取物具有抗氧化能力。

关键词 葡萄果肉；提取物；抗氧化能力

中图分类号 TS262.4 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）02-0246-02

Research on Anti-oxidative Activity from Grape Pulp Extracts

YU Jing-sheng 1 YAN Ru-mei 2 CHEN Zhao-dong 1 WANG Shao-lei 1 CHU Jun 1

（1 Anhui Yeling Beverage Food Co.，Ltd.，Huoshan Anhui 237271； 2 Huainan Minfen Fruit and Vegetable Specialized Cooperatives）

Abstract The research aimed to study anti-oxidative activity from grape pulp extracts.The scavenging abilities on hydroxyl radicals，superoxide anion radicals，DPPH radicals and anti-lipid peroxidation activity were studied.The results showed that grape pulp extracts could eliminate free radical including hydroxyl radicals，superoxide anion radicals，and DPPH，and have inhibit anti-lipid peroxidation activity and reducing activity.The results indicated grape pulp extracts possess anti-oxidative activity.

Key words grape pulp；extract；antioxidant activity

葡萄屬葡萄科植物葡萄的果实，为落叶藤本植物，是世界最古老的植物之一。葡萄原产于欧洲、西亚和北非一带，在我国已有2 000多年栽培历史，主要产于新疆、甘肃、山西、河北、山东等地。近年来，随着社会的发展和人们生活水平的提高以及保健意识的增强，葡萄及葡萄酒的需求量越来越大。已有大量研究发现，葡萄皮和葡萄籽中所含的白藜芦醇和原花青素具有明显的抗氧化性、抑制肿瘤细胞增殖活性及抑制新生血管形成的能力。葡萄在鲜食中果皮摄入比例很小，且葡萄籽多剔除不食用，因此鲜食中葡萄果肉的摄入量最大。以去皮的巨峰葡萄作为研究材料，对其不同乙醇和水浸提物的抗氧化能力进行评价，以全面认识葡萄的功效。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试葡萄品种为巨峰；供试仪器有KL04A离心机、752紫外分光光度计、RE-10/20旋转蒸发仪、LGJ-10试验型真空冷冻干燥机。

1.2 试验方法

葡萄果肉提取物的制备：500 g去皮葡萄→匀浆→各加入不同溶剂（蒸馏水、100%乙醇、75%乙醇与50%乙醇溶液）室温振荡浸提2次→合并滤液→真空浓缩→冷冻真空干燥获得提取固形物，用水稀释得各浓度梯度的样品溶液。

采用邻苯三酚自氧化法[1]清除超氧阴离子自由基；采用D-脱氧核糖-Fe体系法[2]清除羟基自由基；采用亚油酸体系法[3]测定抗脂质过氧化活性；采用普鲁士兰法[4]测定提取物还原力。清除DPPH[5]：吸取1 mL样液，移入试管中，加1 mL 0.1 mmol/L DPPH的乙醇溶液，室温静置30 min，于525 nm波长测定吸光度。以空白作参比，计算公式如下：

清除率（%）=[1-（A-A1）/A0]×100

式中：A0—DPPH与无水乙醇吸光度；A1—样品与无水乙醇吸光度；A—样品与DPPH吸光度。

2 结果与分析

2.1 提取物对超氧阴离子自由基的清除能力

由图1可以看出，随着提取物浓度的增大，对超氧阴离子自由基的清除能力就越大。不同乙醇浓度的提取物随着乙醇浓度的增加，提取物对超氧阴离子自由基的清除能力也逐步增强。其中100%乙醇浓度下的提取物较其他提取物对超氧阴离子自由基的清除能力最强。75%乙醇、50%乙醇、水3种提取物的清除能力相近。葡萄果肉提取物对超氧阴离子自由基的清除能力均小于VC。

2.2 提取物对羟基自由基的清除能力

采用Fenton提供羟基自由基，向反应体系中加入不同的样品，以水杨酸钠作为羟基自由基的捕获受体测定样品对羟基自由基的清除率。随溶液浓度增加，不同提取物对羟基自由基的清除能力逐步增加，溶液浓度为0.02～0.05 mg/mL时，对羟基自由基的清除能力呈直线上升趋势。100%乙醇葡萄果肉提取物对羟基自由基的清除能力最强，接近VC的清除能力；水提取物对羟基自由基的清除能力最弱（图2）。

2.3 提取物对DPPH自由基的清除能力

由图3可看出，不同提取物对DPPH自由基的清除率都随浓度的增加而增加，相同浓度下，提取所用乙醇浓度越高，提取物对DPPH自由基的清除率越高；VC对DPPH自由基的清除率最高，其次是100%乙醇提取物和75%乙醇提取物，它们对DPPH自由基的清除能力相近；50%乙醇和水的提取物对DPPH自由基的清除率最低。

2.4 提取物的抗脂质过氧化能力

采用亚油酸体系法测定抗脂质过氧化活性，于234 nm下测定吸光度，计算其脂质过氧化抑制率。随着葡萄果肉提取物浓度增高，其抗脂质过氧化的抑制率增高（图4）。VC的抑制力最高，其次为100%乙醇、75%乙醇、50%乙醇和水提取物。

2.5 还原能力

采用普鲁士兰法测定还原力，在700 nm下测定OD值。OD值越大，还原能力越强。由图5可以看出，在一定浓度的乙醇提取物中，随着样品浓度的增加，测得OD值越大，说明其还原能力越强，其中VC的还原能力最强。相同浓度下，还原能力从大到小依次为100%乙醇提取物>75%乙醇提取物>水提取物>50%乙醇提取物。

3 结论

在一定溶液浓度范围内，葡萄提取物对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除率、抗脂质过氧化以及还原力是随着溶液浓度的增加，但是其抗氧化的能力低于VC。总体试验揭示葡萄果肉提取物具有较强的综合抗氧化能力，但是不同溶剂获得提取物其具有不同的抗氧化能力[6]。

4 参考文献

[1] 陈卫军，曹 炜.麦胚提取物的抗氧化性研究[J].食品科学，2004，25（10）：294-300.

[2] 陈彦，孙玉军，方伟.威灵仙多糖的抗氧化活性研究[J].中华中医药杂志，2008，23（3）：266-270.

[3] 张赟彬，龚钢明，戴妙妙.甘薯多酚粗提取液的抗氧化活性研究[J].中国粮油学报，2007，22（5）：76-79.

[4] 赵爱云，刘宗国，王燕娜.山楂提取物对猪油抗氧化作用研究[J].中国粮油学报，2008，23（2）：114-116.

[5] 刘富岗，弓建红，杨云，等.白扁豆等4种中药多糖的体外抗氧化活性研究[J].河南科学，2009（10）：7-10.

[6] 孙文凯，袁怀波，许卫，等.芡实壳提取物抗氧化能力研究[J].食品工业科技，2011（4）：100-102.q