左春磊,汪海清,孙召东,刘 波,蒋红周,朱学涛
(连云港市第一人民医院检验科,江苏连云港222002)
乳糜血样对血液分析仪测定血红蛋白结果的影响及消除
左春磊,汪海清,孙召东,刘 波,蒋红周,朱学涛
(连云港市第一人民医院检验科,江苏连云港222002)
目的探讨乳糜血样的脂浊程度对血液分析仪测定血红蛋白(Hb)结果的影响及相关分析,对乳糜血样采取血浆置换的方法,使血液分析仪能够准确测定血红蛋白。方法健康体检者75例并随机分成3组,每组25例,血浆置换等量的25μl,50μl,75μl脂肪乳,模拟不同程度的乳糜标本,观察脂肪乳对血液分析仪测定Hb的影响;临床输入脂肪乳住院患者乳糜血样70例,分别直接上机测定和低速离心后进行血浆置换后上机测定,观察血浆置换等量生理盐水的方法,消除乳糜因素对血液分析仪测定Hb的影响。结果本次实验中75例健康体检者加入不同量的脂肪乳后引起Hb假性增高,置换后增加比为3.77%、6.41%、10.73%,差异均有统计学意义(P<0.05),随着脂肪乳含量的增加,对Hb的影响也增大。70例乳糜血样患者,低速离心进行血浆置换前后检测Hb,降低比例4.25%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血液分析仪测定乳糜血样血红蛋白假性增高,随着脂肪乳含量的增加对Hb的影响也增大,可用生理盐水置换等量血浆的方法消除脂浊影响,保证血红蛋白检测结果的准确性。
乳糜血样;血液分析仪;血红蛋白;消除
血常规检测是一项几乎所有患者到医院常做的常规检查,其检测结果直接对患者的治疗起到关键作用,因此血常规项目检测的准确性非常重要,值得临床上引起高度重视。随着血细胞分析仪使用的逐步普及,血液分析仪的精密度和准确度亦不断提高,对于采集静脉血标本,是否需要空腹和血浆浑浊对血常规测定结果是否有影响,加之由于这些标本是血细胞与血浆混悬液,因此血浆浑浊与否不易被发现,所以血浆浑浊对血常规测定结果的影响一直被人们所忽视。引起血浆浑浊最常见原因是餐后标本,特别是高脂肪、高蛋白饮食后。另外调查中发现,脂肪乳是医院住院病人常用的营养剂,特别是消耗性疾病、不能进食病人等营养不良病人常需输脂肪乳。脂肪乳是由大豆油与卵磷脂合成,临床上主要用于手术后营养失调、急性消化道疾病、烧伤和创伤、肾功能损害、早产儿、虚弱性疾病等,其可供给人体足够热量和必需脂肪酸的较为理想的静脉营养液,能促进氨基酸的吸收,节省蛋白质,以利患者维持身体能量和体力恢复,进而促进伤口愈合[1]。一直以来,输入脂肪乳是否引起血常规项目测定结果的改变尚未引起实验室工作者和临床医生的重视。但有相关研究表明[2,3],血脂升高对血常规检测结果存在一定的影响。为探讨脂肪乳对Hb检测结果的影响,因此本研究拟选取75例健康体检者作为研究对象,通过加入不同量的脂肪乳的方法模拟不同程度的乳糜标本,分析其对迈瑞BC-6800血液分析测定血红蛋白的不同影响,同时选取70例输注脂肪乳患者,用血浆置换等量生理盐水的方法,消除乳糜因素对血液分析仪测定Hb的影响,从而得到更准确的检验结果,为临床诊断提供依据,现报告如下。
1.1 材料收集2015年10月至2016年2月期间,本院健康体检者75例,男性40例,女性35例,年龄25~56岁;本院住院患者70例,其中男40例,女30例,年龄28~61岁,三酰甘油在8.71±1.61mmol/L以上。所有受试对象均排除高胆红素血症、白细胞增高、异常血浆蛋白症。
1.2 仪器与试剂使用迈瑞BC-6800全自动血液分析仪,迈瑞公司提供配套试剂和质控品每日进行室内质控。力保脂宁中/长脂脂肪乳注射液(C8-24Ve)德国制造贝朗医疗(苏州)有限公司分装,产品批号:144918082。
1.3 方法
1.3.1 75例新鲜的体检血标本均用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管静脉采血2ml,并随机分成3组,每组25例,混匀2h内完成全血细胞分析,所有标本均无溶血、凝集、脂血。标本以800r/min离心半径13cm离心10min避免红细胞发生变形破坏[4],随机分成3组,每组25例,分别置换等量的25μl,50μl,75μl脂肪乳,充分混匀后再进行检测。
1.3.2 70例乳糜血样均用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管静脉采血2ml混匀2h内完成全血细胞分析,所有标本均无溶血、凝集。标本以800r/min离心半径13cm离心10min,吸掉上层浑浊血浆部分,用等量生理盐水进行替换,充分混匀后再进行检测。
1.4 统计分析检验结果以均值±标准差(x±s)表示,采用统计学软件SPSS 19.0处理,通过配对χ2检验对置换等量脂肪乳前后各组Hb测定结果增加比进行数据处理,以P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 置换等量脂肪乳前后各组Hb测定结果增加比较75例健康体检者随机分成3组,每组25例,分别置换等量的25μl、50μl、75μl脂肪乳,模拟不同程度的乳糜标本,迈瑞BC-6800血液分析仪测定Hb,置换后增加比为3.77%、6.41%、10.73%,差异均有统计学意义(P<0.05),随着脂肪乳含量的增加,对Hb的影响也越大,见表1。
表1 置换等量脂肪乳前后各组Hb测定结果增加比较
2.2 乳糜血样置换生理盐水前后Hb测定的比较70例乳糜血样住院患者,分别直接上机测定和低速离心后进行血浆置换后上机测定,吸掉上层浑浊血浆部分,用等量生理盐水进行替换,充分混匀后检测Hb结果降低明显,降低比例4.25%,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。
表2 乳糜血样置换生理盐水前后Hb测定的比较(x±s)
血细胞分析作为检验科最基本的检测项目之一,现在大多数医院采用全血标本,因此血浆浑浊与否不容易被发现。临床工作中,高脂血标本很常见,当血清三酰甘油水平大于4.0mmol/L时,血清外观可呈现不同程度的浑浊,影响血红蛋白的检测[5],脂浊可散射光线,对吸光度产生正干扰,导致某些测定结果升高[6]。从而对检测结果造成影响。高脂血症是引起Hb测定假性增高的主要病理因素之一[7]。检测过程中血浆浑浊引起血红蛋白结果升高,MCH、MCHC结果亦升高,而MCV结果不升高,这是因为MCV、MCH、MCHC均为计算值,前者Hb不参与计算,后二者Hb参与计算,当临床上用这些错误结果在临床用作贫血分类时,会影响临床的贫血类型诊断。
临床上氰化高铁红蛋白法测定测定Hb,出现WBC过多引起的比色液浑浊可离心后取上清液比色;若因球蛋白异常增高引起的浑浊,可向比色液中加入少许固体氯化钠或碳酸钾,混匀后可使溶液澄清再测定。但目前随着全自动血细胞分析仪的不断普及应用,在全自动血细胞分析仪中比色液浑浊与否,不易被实验室工作者所发现。本研究表1显示健康体检者血样分别置换等量的25μl、50μl、75μl脂肪乳,血液分析仪测定Hb随着脂肪乳含量的增加,对Hb的影响也越大,说明是单纯浑浊引起测定结果的升高。特别是临床上因治疗营养不良及消耗性疾病输入脂肪乳而导致高脂血症的患者,脂肪乳中的中/长链脂肪乳主要成份为乳糜微粒和极低密度脂蛋白的悬浮颗粒,当检测光通过时,会产生散射或衍射的现象。
输入脂肪乳后的6h内或餐后尤其是高脂、高蛋白饮食后不应急于采集血常规标本,建议待脂肪乳代谢后再采血,但此时有急需检测血常规,可采取用生理盐水置换的方法消除乳糜血样对Hb干扰。从表2可见70例乳糜血样住院患者,分别直接上机测定和低速离心后进行血浆置换后上机测定,检测Hb结果降低明显,降低比例-4.25%,差异有统计学意义(P<0.05),通过用等量生理盐水置换血浆,一方面避免了标本发生容量改变和溶血造成的测定误差,同时消除高脂血标本对血红蛋白测定的干扰,这种方法简便易行。所以实验室工作者在审核结果时,应特别重视血浆是否有浑浊现象,可以在血样检测后20min后肉眼观察血浆外观,排除乳糜血样对检测Hb的假性增高。
有学者认为可以采取稀释血液样本的方法,以减小乳糜血样对血液分析仪测定Hb影响[8,9],但往往血液样本的脂血程度不一,采取多大的稀释比例一直困扰着临床应用,需进一步研究;也有作者建议血液分析仪测定Hb无吸收处的波长空白比浊,并将此处浊度与测定波长的浊度进行比较,然后在测定血红蛋白时减去合适的吸光度,排除比色液浑浊对测定结果影响的方法[10]。
输脂肪乳的同时输入大量的其他液体,由于浑浊和稀释的共同作用,对测定结果的影响较为复杂,需结合与Hb有关的MCH、MCHC等指标仍可发现浑浊的影响。脂肪乳在体内的代谢一般为5~6h,个别病人可能更长,因此输注脂肪乳的同时输入大量的其他液体的患者,建议一定要在输液6h以后检查血液常规,才能得出较为准确的结果。
[1]钱小敏,张晓杰.病人输入脂肪乳后血小板计数准确性的探讨[J].临床检验杂志,2010,18(11):156-159.
[2]陈海涛,林明辉,赵琪琪,等.现代血细胞分析技术与临床[J].现代医学杂志,2010,11(23):112-115.
[3]吕斌斌,梁海丽,王湛国.黄疸、乳糜对血液分析仪结果的影响[J].临床检验杂志,2003,21(21):38.
[4]马骥,杨游萍,陈炜烨,等.高脂血对两种方法测定血红蛋白的影响及其校正[J].国际检验医学杂志,2012,33(9):321-322.
[5]曾素根,曾婷婷,江虹,等.不同脂血浓度对血液分析仪的影响[J].检验医学,2013,28(2):131-133.
[6]高杰.检验科应重视分析前标本因素对检验结果的影响[J].实验与检验医学,2012,30(5):461-462.
[7]马书丽,徐龙强.高脂血症致血红蛋白测定假性增高1例[J].青岛大学医学院学报,2007,43(6):548.
[8]张辉亮,黄树华,刘健玲.重度乳糜血标本对三种常见类型生化检测方法的影响[J].现代检验医学杂志,2015,30(1):128-130.
[9]朱如月,柯敏.稀释液置换法在HmX血细胞分析仪脂血检测中的应用[J].检验医学与临床,2013,11(22):3000-3001,3003.
[10]滕龙,金美琴,蒋晓东.输脂肪乳引起血红蛋白测定结果假性升高[J].实验与检验医学,2008,26(2):196,199.
R446.11+1
A
1674-1129(2017)01-0073-03
10.3969/j.issn.1674-1129.2017.01.022
2016-07-27;
2016-11-25)
朱学涛,电子信箱:zxtdoctor@126.com