气相色谱—串联质谱技术检测水中安眠酮残留量

薛慧婷

(新疆伊犁水文勘测局，新疆 伊犁 835000)

气相色谱—串联质谱技术检测水中安眠酮残留量

薛慧婷

(新疆伊犁水文勘测局，新疆 伊犁 835000)

本实验建立水中安眠酮残留量的气相色谱-串联质谱联用(GC-MS/MS)分析方法。方法 样品采用乙酸乙酯提取，浓缩后甲醇定容待测。采用GC-MS/MS分析时，安眠酮在15 mins内流出。对采集的水样进行两种浓度的加标质控，回收率均在70%以上，相对标准偏差(RSD)在3.0%以内。在0.05～1.00 mg/L的浓度范围内呈线性关系，相关系数大于0.999。检出限为0.50μg/L。该方法可准确用于环境水样中安眠酮残留的定量分析，灵敏度、精密度和准确度均满足残留检测的分析要求。

安眠酮；气相色谱-串联质谱；残留量；水

安眠酮(methaqualone)，又名甲苯喹啉酮(C16H14N2O)，临床上常用作催眠药、镇定药，主要用于动物过度兴奋或惊厥，可使机体平静；但该药副作用较大，进入人体后，会表现出恶心、 呕吐、头晕、无力、四肢及口舌麻木，个别较重患者会有短时间的精神失常，过量服用可出现昏迷、心跳过速、呼吸抑制等症状；近年来，随着养殖业的迅速发展，一些不法分子在经济利益的驱动下，置法律法规于不顾，为达到保活、保重以及增加捕获量的目的，在鱼类产品运输和捕捞过程中擅自在饲料中非法添加安眠酮，导致该药物在产品中的残留，给食品安全带来严重隐患。目前，农业部严禁使用的促生长作用的催眠镇静药安眠酮[1]，但是目前工作对滥用抗生素导致细菌耐药性的研究和监测工作还不到位[2]。针对该类药物残留不同仪器的检测已有相关研究报道[3-11]，这些方法主要用于人体血浆、头发及猪肉、猪肾和饲料中安眠酮的测定，而在采用气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)联用法定性定量测定安眠酮残留量少有报道，由于该类药物存在于鱼塘养殖水体环境中，因此很有必要对于水样进行检测。本研究开发环境水样中痕量安眠酮的残留检测方法，并对方法的有效性进行评价，为环境中安眠酮残留量检测标准的制定提供可靠依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

无公害水产养殖基地：淡水养殖用水。

1.2 主要试剂与材料

乙酸乙酯、甲醇(色谱纯，美国Fisher Scientific公司)；安眠酮标准品(美国Supelco公司)。

1.3 主要仪器

气相色谱-串联质谱仪(7890B-7000B，美国安捷伦公司)；离心机(CT18RT，上海天美公司)；旋转蒸发仪(SB-1100，日本EYELA公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 标准溶液配制

安眠酮标准溶液：配制100.0 mg/L的标准储备液，保存于1℃～4℃冰箱中冷藏，使用时用甲醇稀释至相应浓度做标准工作曲线。

1.4.2 分离提取

准确量取50.0 ml水样品于具塞离心管中，加入20.0 ml乙酸乙酯，振荡后放入高速离心机10 000 r/min离心3 min，将上层有机相倒入浓缩瓶中，40℃减压浓缩近干，用甲醇溶液2.00 ml定容。

1.4.3 标准曲线及质控样

分别配置0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mg/l浓度的标准工作液，同时在试验过程中添加不同浓度的安眠酮做回收率试验。

1.4.4 仪器条件

色谱柱：HP-5MS(30 m×0.25 mm, 0.5 μm)；载气：氦气(99.999%)；恒流模式流速：1.0 ml/min；进样：1.00 μL，不分流；进样口温度：250 ℃；程序升温：80 ℃保持1 min，以20 ℃/min升温至280 ℃，保持10 min；离子化方式：电子轰击(EI)；离子化能量：70 eV；离子源温度：230 ℃；传输线温度270 ℃；溶剂延迟：3 min；扫描方式：多反应监测(MRM)。扫描范围：50～450 amu；定量方式：外标法。

1.4.5 样品测定

按试验过程将定容后的样品及质控样移入进样瓶中，按优化后的仪器条件进行分析测定，通过仪器的色谱工作站记录保留时间、峰面积及二级质谱离子的丰度比进行分析。

图1 安眠酮一级质谱图

2 结果与讨论

2.1 气相色谱-串联质谱方法优化和选择

对安眠酮标准品进行分析，采用全离子扫描确定目标化合物的保留时间和一级质谱图，由图1安眠酮的碎片离子可选择m/z为250为母离子，在设定的色谱及质谱条件下进行子离子及碰撞电压优化试验，通过图2可选择最佳碰撞电压和子离子的参数。

图2 优化母离子及碰撞电压色谱图

2.2 方法的线性范围

通过气相色谱-串联质谱联用仪分析安眠酮标准品的色谱图见图3，以峰面积对应其浓度做标准曲线见图4，安眠酮的方法学参数及优化条件见表1。

2.3 方法回收率、精密度及稳定性

对采集的淡水养殖用水样品添加0.05和0.20 mg/l两种不同浓度的标准，按试验步骤操作，每个浓度各添加5个平行样品，进行回收率重复测定。两个添加水平的样品在24 h内分4个时间段测定，对该方法的稳定性进行研究，结果见表2，标准偏差SD值均小于3.0%，由此可见测试方法具有很好的稳定性。对空白样品基质进行20次测定，按照3倍信噪比(S/N)作为定量检出限，通过计算所得安眠酮检出限为0.50 μg/L。样品加标回收率、相对标准偏差(RSD)见表3。

图3 不同浓度安眠酮的GC-MS/MS色谱图

图4 安眠酮标准曲线(0.01～0.50 mg/L)

2.4 样品的测定

为验证该方法的可靠性和准确性，本次试验选择新疆地区五个大型无公害水产养殖基地的20个淡水养殖用水样品进行检测，在检测的样品中均未检出安眠酮药物残留。

表1 安眠酮的串联质谱检测条件及方法学参数(n=5)

表2 安眠酮测定方法稳定性研究(n=5)

表3 安眠酮的平均回收率、RSD值及检出限(n=5)

3 结语

本实验建立水中安眠酮残留量的方法，采用乙酸乙酯提取水中残留的安眠酮，通过气相色谱串联质谱仪器进行定性、定量检测分析。该方法的线性系数在0.999以上，检出限可达到0.50μg/L。由于待测水样基本没有基质干扰，因此该方法的前处理步骤简便、快速，测定的准确度和精密度较高，适用于水中安眠酮类药物残留的检测工作。

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2016-10-27

薛慧婷(1973-)，女，新疆伊宁人，工程师，主要从事水质分析评价、监测等工作。

P332.7

B

1004-1184(2017)01-0066-02