防风药材HPLC特征图谱的研究

杨 颖，于翠霞

（1.吉林省吉测检测技术有限公司，吉林 长春 130117；2.国药控股吉林有限公司，吉林 长春 130012）

防风药材HPLC特征图谱的研究

杨 颖1，于翠霞2

（1.吉林省吉测检测技术有限公司，吉林 长春 130117；2.国药控股吉林有限公司，吉林 长春 130012）

目的建立防风药材HPLC特征图谱的质量评价方法。方法色谱柱：Agilent HC C18（250×4.6mm，5μ）；甲醇-水（45：55）为流动相；检测波长为254nm；柱温35℃。结果所建立的特征图谱信息丰富，4种色原酮类成分重复性和稳定性都较好。结论本研究建立的防风药材的特征图谱特征性和专属性强，且方法快速、简便、可靠，可用于全面控制市场流通防风药材的质量。

防风药材；HPLC；特征图谱

中药特征图谱技术方便可靠，是一种科学、新型、理想的中药鉴定方法。本实验采用高效液相色谱法对防风药材进行特征图谱研究，为更好地对防风药材进行质量评价提供了良好的实验基础。

1 仪器与试药

LC-2010AHT高效液相色谱仪；试剂：水为超纯水，甲醇（德国默克，色谱级）；对照品：5-O-甲基维斯阿米醇苷（111523-200405）、亥矛酚苷（111714-200501）、升麻素（111710-200602）、升麻素苷（111522-200406），均购自中国药品生物制品检定所。防风药材样品产地：辽宁。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

固定相：Agilent HC C18色谱柱（5μ，250×4.6mm）；流动相：甲醇-水（45：55）；流速：1.0mL/min

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液.

取5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品、亥茅酚苷对照品、升麻素对照品、升麻素苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释制成每1mL约含5-O-甲基维斯阿米醇苷90μg、亥茅酚90μg升麻素70μg、升麻素苷50μg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液

取防风药材5g进行粉碎，取混匀的细粉约0.25g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，带瓶称定并记录重量，水浴加热回流提取2小时，放冷至室温，瓶外壁擦拭干净，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm滤头滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

2.3 专属性试验

分别吸取上述对照品溶液、供试品溶液及甲醇（阴性空白）各5μL，按上述色谱条件进行测定，记录色谱图。结果表明其它成分无干扰，本方法专属性较好。

2.4 精密度试验

取同一供试品溶液，连续进样6次，计算供试品中与4个对照品保留时间一致的色谱峰的保留时间，各特征峰的相对保留时间的RSD（%）小于1.0%，结果表明，实验仪器精密度良好。

2.5 稳定性试验

取同一供试品溶液，设置仪器分别在0、4、8、16、24小时自动采样，照正文方法测定，按保留时间计算，结果未发生明显变化，稳定性良好。

2.6 重现性试验

取同一供试品6份，依法独立测定，计算供试品中与4个对照品保留时间一致的色谱峰的保留时间，各特征峰保留时间的RSD（%）均小于1%，结果表明，本法的重现性良好。

3 讨 论

3.1 测定波长的选择

取供试品溶液2μL，注入液相色谱仪，分别在254nm、270nm、280nm、300nm、320nm进行检测，结果在254nm波长下，给出信息最多，各色谱峰信号最强，故选取254nm作为检测波长。

3.2 流动相的选择

参照中国药典2010年版一部“防风”含量测定项下的方法，以甲醇：水（40：60）为流动相，流速0.8mL/min，亥矛酚苷色谱峰保留时间太长，故将流动相比例调整为甲醇：水（45：55），流速0.8mL/min，对照品色谱峰保留时间适当，供试品色谱峰分离度良好。等度洗脱，采集时间100min，40min以后未出现其它特征峰。故采用甲醇-水（45：55）为本法的流动相。

3.3 色谱柱的选择

本文比较了Agilent HC C18色谱柱（4.6×250mm，5μm）、Luna C18色谱柱（4.6×250mm，5μm）和Shiseido色谱柱（4.6×250mm，5μm），三种色谱柱均满足本方法系统适用性的要求。表明本实验耐用性较好。

[1] 中国药典2010年版一部.

[2] 不同产地防风中4种色原酮成分比较研究中草药第38卷第5期2007年5月.

[3] 防风的研究进展中国药业 2006第15卷第10期.

R931.5

B

ISSN.2095-8242.2017.050.9877.01

本文编辑：赵小龙