天然植物中草药添加剂对猪常见致病菌的体外抑菌试验

尧国荣，黄新恒，邹志恒（.江西农业工程职业学院，江西 宜春 00；.江西省南昌市新建区农业局动物卫生监督所，南昌 000；.江西省农业科学院畜牧兽医研究所，宜春 000）

营养与饲料

天然植物中草药添加剂对猪常见致病菌的体外抑菌试验

尧国荣1，黄新恒2，邹志恒3
（1.江西农业工程职业学院，江西 宜春 331200；2.江西省南昌市新建区农业局动物卫生监督所，南昌 330100；3.江西省农业科学院畜牧兽医研究所，宜春 330200）

为了检测自制天然植物中草药添加剂对猪常见致病菌的体外抑菌效果，试验以纸片法浸取不同浓度中草药方剂煎出液，检测其对不同菌种的抑菌圈大小，判定其敏感性。结果表明，中草药方剂煎出液对猪大肠杆菌和沙门氏菌抑菌效果较好，对金黄色葡萄球菌和链球菌抑菌效果及敏感性较低。

中草药；致病菌；抑菌试验

自制天然植物中草药添加剂由王不留行、漏芦、路路通、马鞭草、益母草、当归、黄芪和甘草8味组成。本剂根据中兽医原理对母猪补气养血、滋阴补阳、通络活血、益肝补肾，祛瘀生新，重在调节繁殖母猪的生殖生理机能，改善母猪微循环和内分泌系统，促进母猪乳腺细胞的发育，提高母猪泌乳繁殖性能效果的同时，增强机体免疫功能和造血机能，表现消炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、清除自由基及抗氧化等活性。本试验通过所配方剂的水煎剂分别对猪大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和链球菌进行体外抑菌试验，以检测该中草药制剂临床抗菌效果，为临床应用提供参考。

1 试验仪器与材料

1.1 试验时间与地点

试验于2016年10—11月在江西省农业科学院畜牧兽医研究所进行。

1.2 试验仪器

10 mL玻璃试管、250 mL玻璃三角烧瓶、敞口倾斜式夹层锅、手提式压力蒸汽消毒锅、自动双重纯水蒸馏器、电热恒温干燥箱、SXP-250B-C型微电脑培养箱、YG-1型层析试验冷柜、超净工作台、微量移液器、AE-200电子分析天平、抑菌圈读数测量器、麦氏比浊计、医用纱布、滤纸、6 mm打孔器、90 mm平皿、L涂菌棒、镊子等。

1.3 培养试剂

胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤培养基（TSB-YE）和水解酪蛋白（MH）琼脂培养基，分别购自青岛海博生物技术有限公司和杭州微生物试剂有限公司。

1.4 试验菌种

猪大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌和金黄色葡萄球菌均由华中农业大学国家重点微生物实验室提供，江西省农业科学院畜牧兽医研究所冷藏保存。试验前在斜面培养基上接种复活。

1.5 试验药液与试剂

1.5.1 中草药浓缩药液的制备 中草药方剂由王不留行15份、漏芦14份、路路通14份、马鞭草10份、益母草10份、当归8份、黄芪8份、甘草6份制备，药材均购自江西省樟树市中药材交易市场。各味中草药经晾干、切片后，粉碎过100目筛，再分别按比例共称取成品100 g加蒸馏水600 mL，室温浸泡30 min，加热煮沸后改用文火煎煮30 min，晾至常温用4层医用纱布过滤，滤渣重新加蒸馏水400 mL，同法煎煮，过滤药液，合并2次所得药液，将其冷藏6～12 h，再取上清液滤过，将滤液水浴浓缩至100 mL，使其药物含量为1 g/mL（浓度为100%原液）。由于一般中药煎剂pH偏低（2～2.5），煎好后用氢氧化钠水溶液调整至pH 7.4～7.6，浓缩后的水煎剂装入100 mL生理盐水瓶中，高压灭菌15 min，4℃冰箱中保存备用。

1.5.2 不同浓度中草药煎液制备 试验时以蒸馏水将原煎药液分别稀释为1∶2、1∶5、1∶10、1∶20 4个不同浓度的中药煎液，测定各浓度对不同菌种的抑菌效果。

1.5.3 药敏纸片的制备 用6号新华滤纸经打孔器打成直径为6 mm的圆形滤纸片，置于121℃的高压蒸汽灭菌30min，用无菌镊子分别夹取灭菌的滤纸片浸入不同浓度的中药煎剂中，5min后取出，并尽量使之干燥。

1.5.4 菌液制备 将猪大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和链球菌分别接种TSB-YE培养液，经37℃恒温培养箱中24 h培养后，用无菌生理盐水稀释，并用麦氏比浊至每毫升含菌量为1.0×106个。

1.5.5 抑菌试验方法 称取水解酪蛋白琼脂培养基溶于蒸馏水，高压灭菌后倾注入无菌平皿约15～20min，待培养基凝固后，每平皿加入0.2 mL供试菌液，用无菌L棒涂布均匀。再将浸有不同浓度的纸片贴在含菌培养基上，每菌种做3个重复。预扩散15 min后，倒置于37℃培养25 h。用抑菌圈读数测量器测量其抑菌圈直径的大小，判断药液对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和链球菌的抑菌效果。

1.5.6 药物敏感性判定标准 抑菌圈直径d＞20 mm为极敏，15 mm＜d≤20 mm为高敏，10 mm＜d≤15 mm为中敏，d≤10 mm为低敏，无抑菌圈为不敏感[1]。

2 结果与分析

从表1中可看出，本方剂的水煎剂对猪大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和链球菌有一定的抑菌作用，但抑菌效果不同。对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌效果较好，随着其稀释浓度降低由原液的中度敏感降至1∶20时低敏感。对金黄色葡萄球菌和链球菌抑菌效果较大肠杆菌和沙门氏菌敏感性低，金黄色葡萄球菌的抑菌效果始终处于低敏感，而当中药煎液浓度降至1∶10时对链球菌为不敏感。

表1 不同浓度中草药煎液对不同菌种的体外抑菌效果

3 讨论与小结

（1）由上述天然植物中草药制备饲料添加剂在哺乳母猪生产试验中表明，对哺乳母猪泌乳量与乳质有明显提升，对哺乳仔猪生长发育与成活率均有显著提高，表现出哺乳期仔猪的腹泻指数与健康状况有明显改善[2]。说明本组方添加剂在提高母猪泌乳繁殖性能的同时，对仔猪亦具有明显的保健促生长功能。如方剂中马鞭草具有抗菌、消炎、镇咳、止血作用；漏芦表现抗氧化、保肝和提高免疫功能；当归具有增强免疫力、抗炎镇痛、降血脂、利肝保胆、抗肿瘤、抗微生物等作用，可促进红细胞生成和造血干细胞增殖作用；黄芪具有增强机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤、促进机体造血机能等；甘草具有抗溃疡、抗炎、抗变态反应、镇咳止痰作用，对药物、食物和体内代谢产物中毒及细菌毒素所致的中毒均有一定的解毒作用，还具有广泛的抗微生物、抗肿瘤等作用[3]。

（2）本试验表明，本方剂煎出液对猪大肠杆菌和沙门氏菌抑菌效果较好，应用于哺乳母猪能改善母猪乳汁的质量，也同步提高哺乳仔猪的生长发育和健康状况。

[1]袁婷，钟学穗.常见中草药的体外抑菌活性[J].畜牧兽医科技信息，2009（9）：23-25.

[2]尧国荣，朱钱龙，曾作财，等.天然植物中草药饲料添加剂对哺乳母猪泌乳性能的影响[J].养猪，2016（6）：25-28.

[3]田允波，周家容.天然植物饲料添加剂[M].广州：中山大学出版社，2008：228-274.

（编辑：郭玉翠）

旱莲草治老年人夜间口干

旱莲草40克，生地黄12克，加水700毫升，水煎30分钟，频服代茶饮，每日1剂，连服7剂为1个疗程。服药14天后，夜间口干症可缓解。

老年人夜间口干，常由肝肾阴虚引起津液不足所致。旱莲草又叫“墨旱莲”，有养阴益肾、凉血止血的功效，生地黄能滋阴润燥、生津止渴。此方对老年人夜间口干兼头晕、目眩、耳鸣、鼻出血等症状有一定疗效。

（转自《保健与生活》2016年第1期）

In Vitro Bacteriostasis Test of Natural Plant Chinese Herbal Medicine Additives on Common Pathogenic Bacteria in Swine

YAO Guorong1,HUANG Xinheng2,ZOU Zhiheng3
(1.Jiangxi Vocational College of Agricultural Engineering,Yichun 331200,China;2.Nanchang New District Agricultural Bureau of Animal Health Supervision and Administration,Nanchang 330100,China;3.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Jiangxi Academy of Agricultural Sciences,Yichun 330200,China)

In order to detect the self-made Chinese herbal medicine additive of natural plant common antibacterial effect in vitro pathogens of swine,experiment with paper method leaching of different concentrations of Chinese herbal medicine decoction,to detect the size of inhibition zone of different strains, determine its sensitivity.The results showed that the decoction of Chinese herbal medicine had good bacteriostatic effect on Escherichia coli and salmonella,and had low inhibitory effect on staphylococcus aureus and streptococcus.

Chinese herbal medicine;pathogenic bacteria;inhibition test

S816.7

A

1002-1957(2017)01-0011-02

2017-01-02

江西省教育厅科学技术研究项目（GJJ151481）

尧国荣（1965-），男，江西临川人，副教授，主要从事畜禽养殖与疾病防治教学与研究工作.E-mail:yaoguorong_65@126.com