血清胰岛素、瘦素及CRP在乳腺癌合并2型糖尿病患者中的表达水平及其临床意义

郭伍斌　马新　刘翔

【摘要】 目的：探究血清胰岛素、瘦素及C反应蛋白（CRP）在乳腺癌合并2型糖尿病患者中的表达水平及其临床意义。方法：选择2008-2015年入住本院进行治疗的120例患者为研究对象，根据研究参与者类型的不同，分为A组（乳腺癌合并糖尿病患者，40例）、B组（单纯乳腺癌患者，40例）、C组（单纯2型糖尿病患者，40例）；另选取主动参与本次研究的健康志愿者40例作为对照组。160例受试者均静脉采血，离心分离血清后，采用ELISA方法测定受检者血清LEP水平，采用酶联免疫测定法测定胰岛素及CRP水平。分别测定四组患者血清瘦素水平、空腹血浆胰岛素（FINS）、CRP指数，并进行统计学分析。结果：A组、B组、C组的血清胰岛素、瘦素、CRP的水平与对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：血清胰岛素、瘦素及CRP在乳腺癌合并2型糖尿病患者中具有显著的表达，三项指标对于乳腺癌合并2型糖尿病的早期诊断与治疗具有重大意义。

【关键词】 血清胰岛素； 瘦素； CRP； 乳腺癌合并2型糖尿病

Expression and Clinical Significance of Serum Insulin，Leptin and CRP in Breast Cancer Patients with Type 2 Diabetes Mellitus/GUO Wu-bin，MA Xin，LIU Xiang.//Medical Innovation of China，2017，14（03）：013-016

【Abstract】 Objective：To investigate the expression and clinical significance of serum insulin，leptin and C reactive protein（CRP） in breast cancer patients with type 2 diabetes mellitus.Method：120 patients in our hospital from 2008 to 2015 were selected as research subjects，according to the study participants of different types，they were divided into A group（40 cases with breast cancer combined with diabetes mellitus，B group（40 cases of breast cancer patients，C group（40 patients with type 2 diabetes mellitus），this study selected the active participation of 40 healthy volunteers as control group.160 cases were taken venous blood samples，centrifuged serum，ELISA method was used to determine the level of serum LEP，the level of insulin and CRP were measured by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）.The levels of serum leptin，fasting plasma insulin（FINS） and CRP index were measured and analyzed in four groups.Result：The serum insulin，leptin，CRP levels of A group，B group，C group compared with the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：The serum insulin，leptin and CRP in breast cancer patients with type 2 diabetes have significant expression，the three indicators for breast cancer with type 2 diabetes early diagnosis and treatment is of great significance.

【Key words】 Serum insulin； Leptin； CRP； Mammary cancer combined with type 2 diabetes

First-authors address：The Affiliated TCM Hospital of Southwest Medical University，Luzhou 646000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.03.004

近年來，糖尿病及乳腺癌患者日益增多，老年女性是该病的主要发病人群。胰岛素抵抗和高胰岛素血症是2型糖尿病患者的主要特征。国内外的研究表明，乳腺癌的发生与2型糖尿病有着一定的关联。特别是2型糖尿病患者的高胰岛素血症、高血糖等，其作用十分重大。2型糖尿病患者的瘦素明显升高，且与胰岛素抵抗密切相关[1]，这是因为瘦素具有促进乳腺细胞生长的作用。Larsson等[2]从Medline中搜索了大量有关糖尿病与乳腺癌的研究资料，发现患有2型糖尿病的女性发生乳腺癌的危险增加20%，在统计学上有明显差异。对于妊娠期糖尿病的研究，也得出了相同的结论[3]。但也有不同的研究结果，Stattin等[4]的研究发现，<49岁还未绝经的女性中，空腹血糖的升高与患乳腺癌风险增高相关；在≥49岁的女性中，血糖升高与患乳腺癌的风险无关。C反应蛋白（CRP）是低水平炎症的敏感标志物，在多种恶性肿瘤患者中升高，且在糖尿病患者当中也明显升高。本次研究选取了120例不同类型的患者和40例健康对照者作为参考，对这160例参与者进行研究，探究血清胰岛素、瘦素及CRP在乳腺癌合并2型糖尿病患者中的表达水平与临床意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2008-2015年入住本院进行治疗的120例患者为研究对象，根据研究参与者类型的不同，分为A组（乳腺癌合并糖尿病患者，40例）、B组（单纯乳腺癌患者，40例）、C组（单纯2型糖尿病患者，40例）；另选取主动参与本次研究的健康志愿者40例作为对照组。纳入标准：乳腺癌组，病理结果诊断为乳腺癌，全组病例均未接受术前放、化疗或内分泌治疗；对照组，身体各项指标均正常，无乳腺癌、糖尿病；所有患者的糖尿病诊断均采用1999年WHO制订的糖尿病诊断标准进行判定[5]。排除标准：存在急慢性感染的患者；存在严重肝肾功能障碍的患者；对照组同时排除乳腺癌和其他恶性肿瘤。四组患者一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 主要仪器 全自动酶标仪（美国THEROM公司），高速台式冷冻离心机，普通冰箱（青岛海尔公司），移液器（p-10/p-200/p-1000）（德国Eppendorf公司），超净化工作台。

1.3 试剂 血清瘦素（Leptin，LEP）试剂盒（美国eBioscience公司）；胰岛素检测试剂盒（美国eBioscience 公司）；C反应蛋白（CRP）测定试剂盒（德国Diasays公司）。

1.4 检测方法 160例受试者均过夜空腹8 h以上，次晨静脉采血，离心分离血清，立即置于-20 ℃冰箱保存，集中测定。

1.4.1 血清LEP水平 使用人LEP酶联免疫测定试剂盒（Human Leptin Enzyme-Linked Immunosorbent Kit）采用ELISA方法测定受检者血清LEP水平，操作严格按试剂盒说明进行。按照说明书配置洗涤液和分析液，用分析液将样品稀释至25倍。将含有标准品的温控放置在A1-H1的位置，将100 μL双蒸水加入样品孔，随后分别在标准孔和样品孔当中加入双蒸水各150 μL，完成后将已经稀释的样品50 μL计入，随后封板。在常温下静置3 h，洗板拍干后，在每个微孔加入100 μL底物溶液，避光放置10 min。完成后快速给每个孔加入100 μL终止液[6-7]。在1 h内采用酶标仪测定各个孔的吸光度，计算样品浓度。

1.4.2 胰岛素测定 采用酶联免疫法测定法（ELISA）测定空腹血浆胰岛素（FINS），操作严格按照试剂盒的说明进行。分别对四组患者的血清瘦素水平、空腹血浆胰岛素（FINS）进行测定。

1.4.3 CRP测定 采用酶联免疫测定法，采用96孔反应试剂盒进行测定，标本采用平行双孔实验，操作严格按照试剂盒的说明进行，应用酶标仪进行吸光度检测。

1.5 统计学处理 采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用 字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

A组、B组、C组的血清胰岛素、瘦素及CRP水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义（t=2.816，P<0.01，t=5.162，P<0.01，t=3.164，P<0.01；t=3.272，P<0.05，t=2.578，P<0.05，t=4.437，P<0.05；t=2.491，P<0.01；t=4.520，P<0.01，t=3.340，P<0.01），见表1。

*与对照组比较，P<0.01；△与对照组比较，P<0.05

3 讨论

乳腺癌是妇科疾病中常见的一种恶性肿瘤，近年來，乳腺癌的发病率呈现出上升趋势，主要在45～50岁人群中发病率较高，目前对于乳腺癌的发病机制还不是很明确，但是遗传因素、抑郁情绪、生育状况、不良的生活习惯等都有可能会引发乳腺癌，早期乳腺癌的临床表现不是很明显，患者大多是在出现较为明显的临床症状或者体检过程中发现，有明显症状的患者主要表现为乳腺肿块、皮肤改变、乳头异常等。做好早期的诊断对于及时的治疗以及改善患者的生活质量具有重要影响[8]。

近年来，糖尿病与乳腺癌之间的关系研究逐渐得到医学界更多的重视，且众多的研究数据显示糖尿病与乳腺癌之间的关系密切，且已经成为了一项造成糖尿病患者出现乳腺癌的因素之一。大量的研究数据表明，糖尿病患者发生恶性肿瘤的概率显著高于健康人群。褚美珍等[9]采用回顾性分析，发现2型糖尿病可能是乳腺癌的一个潜在预后不良的因素。对2型糖尿病合并乳腺癌的患者更应加强术后随访，以便尽早发现包括第二原发癌在内的肿瘤复发相关事件。文献[10]表明T2DM与乳腺癌存在关联，高血糖、高胰岛素血症以及胰岛素样生长因子对乳腺癌的发生、发展具有重要作用。目前，能够对乳腺癌进行早期诊断的方式在降低乳腺癌死亡率方面大有益处。胰岛素能够促进细胞的有丝分裂、抑制细胞凋亡。Rose等[11]研究证明在体外胰岛素通过磷脂酰肌醇3激酶和丝裂原活化蛋白激酶/Akt信号转导通路刺激一些人类乳腺癌细胞株增殖。同时，胰岛素还能够通过旁分泌机制，刺激乳腺癌细胞增生，进而加重乳腺癌的病情[12-13]。在针对绝经后女性的调查中，发现胰岛素抵抗和高胰岛素血症是乳腺癌发生的独立危险因素[14]，本研究发现，乳腺癌合并糖尿病患者的血清胰岛素、瘦素、CRP均明显升高，其中以乳腺癌合并糖尿病组患者的水平最高。由于患者体内的瘦素分泌受到胰岛素的调节，糖尿病患者的胰岛素水平明显提高，进而对瘦素的升高形成刺激作用，在数据特点上，瘦素与胰岛素之间呈现出一种正相关的关系，进而刺激乳腺癌细胞增生。而单纯2型糖尿病患者的胰岛素水平明显较高。

瘦素（Leptin，LEP）是肥胖基因OB表达产物，通常具有促进能量消耗的作用。研究发现LEP还具有免疫调节和抗炎作用，对创伤愈合、代谢和生殖功能有重要影响[15]。在人体的乳腺、脂肪组织和胰岛细胞表面当中，瘦素有着广泛的分布。研究发现肥胖患者中瘦素水平增高是乳腺癌发病的危险因素，并且瘦素增高是乳腺癌预后不良的因素之一[16]；盛俊等[17]研究发现，在乳腺癌MCF-7细胞中，LEP可能通过STAT3途径促进hTERT（端粒酶反转录酶）的表达，并最终上调端粒酶的活性。而在肿瘤细胞中端粒酶活性的增加是极为重要的，并与其侵袭表型密切相关。陈薇等[18]的研究在中国人群中证实了OB和ObR在乳腺癌组织中广泛表达，阳性率分别为79.8%和85.1%，且OB与ObR的表达相关（r=0.342，P<0.01）。

本次研究中，LEP在2型糖尿病时的表达升高，而单纯乳腺癌患者的LEP也明显升高，而乳腺癌合并糖尿病组患者的水平升高最为明显，三组患者的LEP与对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05），明确LEP水平的升高是2型糖尿病合并乳腺癌的危险因素。

C反应蛋白（CRP）是一种能与肺炎链球菌C多糖反应的急性时相蛋白，在组织损伤、感染等刺激下，被激活的单核细胞释放白细胞介素-1（IL-1），刺激肝细胞加速合成CRP。机体受到伤害和组织损伤后，CRP水平迅速升高，对参与宿主的防御、控制炎症有重要作用[19]。Rolland等[20]研究证实，CRP与乳腺癌的发生有密切关系。本次研究显示，A、B、C三组患者的血清CRP指标均明显提高，且以乳腺癌合并糖尿病患者的增高水平最为显著，提示糖尿病与乳腺癌之间的关系密切。本研究中，乳腺癌合并糖尿病患者的CRP水平比其他三组都高，且2型糖尿病组患者也明显高于对照组（P<0.05）。而单纯2型糖尿病患者的CRP水平也显著升高，推测可能是单纯2型糖尿病患者的血清胰岛素较高，胰岛素能够促进蛋白细胞形成，并对纤维蛋白原和CRP合成形成抑制作用[21]。且2型糖尿病患者存在胰岛素抵抗，胰岛素敏感性较低，导致CRP合成明显增加。

本研究通过检测四组患者的血清瘦素水平，A组、B组、C组均显著高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），表明瘦素与乳腺癌合并糖尿病、单纯乳腺癌、单纯2型糖尿病之间的关系密切。通过此研究，表明胰岛素、瘦素及CRP是2型糖尿病患者发生乳腺癌的预测因子，这三项指标可以作为2型糖尿病患者早期诊断乳腺癌的有效检测指标。

综上所述，血清胰岛素、瘦素及CRP在乳腺癌合并糖尿病、单纯乳腺癌、单纯2型糖尿病患者中均有显著的表达，通过对不同类型患者的血清胰岛素、瘦素及CRP表达水平的比较，表明以上三项指标可以作为乳腺癌合并2型糖尿病的预测指标，对该病的早期诊断与治疗具有积极的临床意义。

参考文献

[1]任昉英，穆维新，刘光，等.乳腺癌合并2型糖尿病癌组织中基质金属蛋白酶的表达及意义[J].山西医药杂志（下半月版），2013，42（8）：366-368.

[2] Larsson S C，Mantzoros C S，Wolk A.Diabetes mellitus and risk of breast cancer：a meta-analysis[J].International Journal of Cancer，2007，121（4）：856-862.

[3] Wolf I，Sadetzki S，Catane R，et al.Diabetes mellitus and breast cancer[J].Lancet Oncology，2008，19（2）：103-111.

[4] Stattin P，Bj?r O，Ferrari P，et al.Prospective Study of Hyperglycemia and Cancer Risk[J].Diabetes Care，2007，30（7）：561-567.

[5]张园园，林健才，朱翠颜，等.2004至2010年中山大学附属江门医院住院2型糖尿病患者伴惡性肿瘤分布情况的回顾性调查[J].中华糖尿病杂志，2012，4（7）：407-411.

[6] Stankowski-Drengler T J，Stankowski R V，Engel J M，et al.The Relationship of Type 2 Diabetes， Oral Diabetes Medications， and Insulin Therapy to Risk for Breast Cancer[J].Current Nutrition Reports，2014，3（1）：1-8.

[7]边坤，王立娜，穆维新，等.二甲双胍对乳腺癌合并2型糖尿病患者癌组织Caspase-3、Caspase-9表达的影响[J].山东医药，2013，53（48）：7-9.

[8]李志华，罗永辉，吴晓波，等.体质指数与进展期乳腺癌新辅助化疗疗效的关系[J].广东医学，2012，33（6）：780-783.

[9]褚美珍，陆翔，陈彩萍.2型糖尿病对乳腺癌患者预后的影响[J].浙江实用医学， 2012，17（4）：265-266.

[10] Schott S，Schneeweiss A，Sohn C.Breast cancer and diabetes mellitus[J].Experimental & Clinical Endocrinology & Diabetes，2010，118（10）：673-677.

[11] Rose D P，Vona-Davis L.The cellular and molecular mechanisms by which insulin influences breast cancer risk and progression[J].Endocrine-related Cancer，2012，19（6）：225-241.

[12] Wang R J，Lu L J，Jin L B，et al.Clinicopathologic features of breast cancer patients with type 2 diabetes mellitus in southwest of China[J].Medical Oncology，2014，31（1）：1-8.

[13]张爱国，穆维新，沈亚欣，等.转化生长因子β1在合并2型糖尿病乳腺癌患者癌组织中的表达及临床意义[J].河北医药，2013，35（15）：2286-2287.

[14] Gunter M J，Hoover D R，Yu H，et al.Insulin，insulin-like growth factor-I，and risk of breast cancer in postmenopausal women[J].Journal of the National Cancer Institute，2009，101（1）：48-60.

[15]李昌文，王伟，刘军，等.胰岛素受体、p53在合并2型糖尿病乳腺癌患者肿瘤组织中的表达及临床研究[J].中国医药指南，2014，12（30）：22-23.

[16] Santillán-Benítez J G，Mendieta-Zerón H，Gómez-Oliván L M，et al.The Tetrad BMI，Leptin，Leptin/Adiponectin（L/A） Ratio and CA 15-3 are Reliable Biomarkers of Breast Cancer[J].Journal of Clinical Laboratory Analysis，2013，27（1）：12-20.

[17]盛俊，苑占娜，李莎莎，等.瘦素上调乳腺癌细胞端粒酶的活性及其分子机制研究[J].中国临床肿瘤，2012，39（5）：241-244.

[18]陈薇，查小明，刘晓安，等.瘦素和瘦素受体在乳腺癌组织中的表达及其与临床预后的关系[J].臨床肿瘤学杂志，2010，15（6）：493-497.

[19]刘扬，薛辉，邓子辉，等.乳腺癌患者血清leptin、CRP、α1-AT检测的临床意义及其相关性分析[J].放射免疫学杂志，2010，23（3）：243-245.

[20] Rolland Y M，Iii H M P，Ping P，et al.Leptin and adiponectin levels in middle-aged postmenopausal women：associations with lifestyle habits，hormones，and inflammatory markers-a cross-sectional study[J].Metabolism-clinical & Experimental，2006，55（12）：1630-1636.

[21]冯凌飞，贺曾.ER、PR、Her-2、Ki-67在合并2型糖尿病的乳腺癌患者肿瘤组织中的表达[J].中国肿瘤外科杂志，2014，6（3）：161-163.

（收稿日期：2016-10-19） （本文编辑：张爽）