刘忠慧��李国辉+狄和双��
摘要:以GH和基因作为影响鸡繁殖性状的候选基因,采用PCR-SSCP方法检测仙居鸡GH基因外显子4和[WTBX]基因外显子3区域的单核苷酸多态性,并分析GH单基因型及2个基因合并基因型与65周龄产蛋数的关联。结果表明:GH基因exon4(C2338G/C2341T)的突变和基因exon2的突变(C826T)基因型CC型与该鸡品种的65周龄产蛋数显著相关(P<0.05),AA、CC型对产蛋数的加性效应分别为3.56、3.60;合并基因型AACC型个体65周龄产蛋数与对照组相比差异显著(P<0.05);2个基因间的互作效应不显著(P>0.05)。
关键词:GH基因]基因;仙居鸡;基因合并;产蛋数
中图分类号: S831.2文献标志码:
文章编号:1002-1302(2016)08-0300-03
仙居鸡原产于浙江省台州市仙居县、临海市等地,是我国优良蛋用鸡品种。仙居鸡具有单冠、颈部细长、背部平直、尾羽高翘、羽毛紧密等特点,体型虽小但很健壮。公鸡羽毛呈黄色或红色,体质量约为1.5 kg;母鸡羽毛多呈黄色,少呈黑色或花色,体质量约为1 kg,500日龄产蛋数为180~200枚。仙居鸡存在体质量小、繁殖性能不高的缺点,寻找与仙居鸡繁殖性能相关的候选基因,实施分子标记辅助选择是提高其产蛋数的有效途径。
生长激素(growth hormone,GH)是促进机体新陈代谢、提高动物瘦肉率、降低脂肪沉积的一种激素,主要由脑垂体分泌,通过与生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合,并通过类胰岛素生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)的媒介作用来促进细胞的增生与分化[1]。GH编码的基因全长3 901 bp,包括4个内含子和5个外显子,编码191个氨基酸[2]。GH基因变异会影响家畜家禽生长发育、繁殖及其他生产性状,此项研究越来越受到人们的关注。
细胞视黄醇结合蛋白(cellular retionol-binding proteins,CRBPs)担任着转运维生素A(视黄醇)的任务,维生素A主要参与机体的视觉、胚胎发育、繁殖、细胞增殖与分化、脂类代谢等生理过程。畜禽机体自身不能直接合成维生素A,必须通过食物间接获取。缺乏维生素A会影响鸡的体质量、饲料利用率、产蛋力、蛋质量、蛋品质、孵化率、免疫应答[3];因此,细胞视黄醇结合蛋白参与视觉、繁殖、上皮细胞的维持、骨的生长发育等诸多生物学过程。鸡的细胞视黄醇结合蛋白CRBPs共有4种,CRBP4是其中重要的一种,鸡的[WTBX][STBX]CRBP4[WTBZ][STBZ]基因位于21号染色体,有3个外显子[4]。
合并基因型在植物育种中已得到应用并取得了良好效果[5],在动物育种中也有报道。刘婵娟等研究表明,ESR和FSH基因的合并基因型对地方猪种初产、经产胎次的产仔数具有显著影响[6]。在家禽育种上,洪坤月等采用PCR-SSCP法对太湖鸡促卵泡激素β亚基(FSH-β)基因、生长素(GH)及其受体基因(GHR)进行多态性检测,结果发现产蛋量较高的合并基因型AADD可作为太湖鸡选育的参考[7]。于吉英等对NPY、ESR基因的联合效应进行分析,结果表明,合并基因型AAAC的300日龄产蛋数、400日龄产蛋数、平均连产时间均最高[8]。李俊营等对淮南麻黄鸡[WTBX][STBX]CRBP4[WTBZ][STBZ]基因多态性与早期产蛋性状、蛋品质的相关性进行分析,结果表明,
3结论与讨论
近年来,动物基因组的研究迅速发展,基因转移、基因聚合等现代分子生物技术手段的应用使分子标记辅助选择(MAS)广泛应用于动植物的遗传改良,并取得了长足的进展。传统育种方法通过表现型间接对基因型进行选择,普遍存在选育效率低、周期长的缺点。本研究将传统方法与分子标记辅助选择相结合,以期获得更好的育种效果。
通过分析仙居鸡群体[WTBX][STBX]CRBP4[WTBZ][STBZ]和GH标记2个基因各基因型与产蛋数的关联,确定了[WTBX][STBX]CRBP4[WTBZ][STBZ]和GH的有利单个基因型为AA、CC型,其在仙居鸡群体中的分布比例分别达30%、34%,且GH、[WTBX][STBX]CRBP4[WTBZ][STBZ]基因对65周龄产蛋数均一致表现为正加性效应与负显性效应,A、C 2个等位基因位点对65周龄产蛋数表现为负效应。在9种合并基因型中,只有单基因合并后的AACC基因型个体的65周龄产蛋数显著高于其他组合合并基因型个体,分别比GH单基因AA型、[WTBX][STBX]CRBP4[WTBZ][STBZ]单基因CC型的产蛋数提高了2.57、1.91枚,但差异均未达到显著水平(P<0.05)。2种优势单基因型间的互作效应并不显著(P>0.05),与单基因型相比,合并基因型对产蛋数的主效作用(Eta2GH×[WTBX][STBX]CRBP4[WTBZ][STBZ] 通过分子标记手段对与产蛋数关联的[WTBX][STBX]CRBP4[WTBZ][STBZ]、GH基因优势单基因型进行基因合并育种,能使仙居鸡的产蛋数有所提高,為基因合并在家禽育种中的进一步应用提供依据。 参考文献: [1]Scanes C G,Proudman J A,Radecki S V. Influence of continuous growth hormone or insulin-like growth factor Ⅰ administration in adult female chickens[J]. General and Comparative Endocrinology,1999,114(3):315-323.
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