郭静
伴有慢性腹泻的HIV感染患者粪便标本病原学检测分析
郭静
目的探讨伴有慢性腹泻的人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者粪便标本的病原微生物检测结果。方法将医院收取的91例伴有慢性腹泻的HIV感染患者作为研究对象,收集粪便标本进行标本病原微生物检测,分析检测结果。结果检出病原微生物感染标本53份,阳性率为58.2%;真菌、隐孢子虫、结核分枝杆菌、难辨梭状芽孢杆菌、空肠弯曲菌、沙门菌感染率分别为47.2%、24.5%、15.1%、7.5%、3.8%、1.9%。结论真菌、隐孢子虫等病原微生物是HIV感染患者伴发慢性腹泻的主要原因,临床中要针对性加强防范。
人类免疫缺陷病毒;慢性腹泻;粪便标本;病原微生物
随着病情进一步发展,人类免疫缺陷病毒(HIV)CD4+细胞水平会逐步下降导致免疫力遭到破坏,为各种病原微生物的入侵创造了有力条件,据资料显示,约超过一半患者会并发肺部感染,约1/3患者会出现神经系统损害,严重时危及生命[1]。消化道是HIV患者并发机会性感染时常见受累部位,其中约有90%患者伴有消化道症状,本研究以91例伴有慢性腹泻的HIV感染患者为研究对象,对其粪便标本进行检查,现将结果报道如下。
1.1 临床资料
样本选取时间:2014年1月—2016年8月;样本对象:91例伴有慢性腹泻的HIV感染患者。纳入标准:(1)所有患者均签署知情同意书;(2)患者经检查均符合HIV感染合并慢性腹泻的诊断标准。排除标准:近期采用蛋白酶类抑制剂、抗病毒药物治疗、肠道肿瘤等患者。现将患者资料整理如下:男64例、女27例,平均年龄(46.2±5.3)岁。
1.2 方法
1.2.1 微生物培养 将标本接种至弱选择性培养基(麦康凯琼脂培养基)、强选择性培养基(SS琼脂平板)、含有氯霉素的沙保罗琼脂平板各1块,然后将其放置于35℃恒温箱中培养24 h,主要检测菌种:沙门菌、真菌、志贺菌等。
1.2.2 涂片检测 将所有标本进行涂片以检测原虫,采用革兰染色法进行真菌孢子以及菌丝检测,采用含有氯霉素的沙保罗琼脂平板进行标本培养,如检出阳性即可在显微镜下检出上述病原菌。分枝杆菌采用萋-尼抗酸染色法进行检测,然后采用甲醛-乙酸乙酯沉淀法对标本进行集卵,然后采用改进之后的抗酸染色法对标本染色以检测隐孢子虫卵囊,具体操作方法参照《全国临床检验操作规程》相关步骤完成[2]。
1.2.3 微需氧培养检测 搜集标本后在3 h内接种于SKIRROW选择性培养基中,之后将其放入微需氧的产气袋中封闭,置于42℃孵育箱中进行培养,时间48 h。如果检出为阳性,在培养基平板上可见无色半透明毛玻璃样小菌落,且单个菌落中心凸起,周边呈现不规则形状,并未发生溶血情况,采用革兰染色则会发现空肠弯曲菌体呈现逗点“S”形状。
1.2.4 金标法 采用Xpect难辨梭菌毒素A/B检测卡进行标本检测,标本搜集后要于3 h内及时送检,如果不能按时检测需要将其放置于2~8℃冰箱中,但必须在72 h内完成检测。
1.3 数据处理
将所得例数均采用构成比或者率描述。
91例伴有慢性腹泻的HIV感染患者粪便标本中,检出病原微生物感染标本53份,阳性率为58.2%,病原菌分别为真菌25份(47.2%)、隐孢子虫13份(24.5%)、结核分枝杆菌8份(15.1%)、难辨梭状芽孢杆菌4份(7.5%)、空肠弯曲菌2份(3.8%)、沙门菌1份(1.9%),其中真菌的构成比最高,其次为隐孢子虫。
本研究结果显示:91份粪便标本中检出病原微生物感染标本53份,阳性率达58.2%,说明病原微生物感染是导致HIV患者感染伴发慢性腹泻的重要原因。其中真菌感染占比最高,可见真菌感染是诱发消化道疾病的重要原因。在临床检验过程中不管采用真菌培养还是革兰染色图片均显示存在真菌感染,与部分学者研究成果相一致,主要源于:正常情况下人体免疫功能能够抵御真菌的入侵,但是HIV患者自身免疫功能遭到破坏,导致抵御真菌的功能明显下降,在一定程度上造成了真菌的大肆入侵[3-4]。
隐孢子虫是一种能够侵袭肠道的寄生虫,主要传播源:饮用被污染的水、食物在污染水源中由于含有隐孢子虫引起感染,该类型感染病症危重且多变,患者大便性质明显改变,病程长,部分患者甚至持续几年,严重时危及生命。有学者研究报道,HIV慢性腹泻患者中存在隐孢子虫感染,尤其是中晚期患者随着病情进一步恶化,CD4+细胞水平、T淋巴细胞水平会明显降低,在一定程度上会增加其发生消化道感染的危险性,因此临床实践中可加以重视[5]。另外也有学者对某市HIV感染伴发慢性腹泻患者的隐孢子虫感染率进行调查,结果显示为21.3%,与本研究结果相近,分析可能与受试者的卫生习惯、生活环境相关[6]。
除了上述两种病原微生物之外,要注意结核分枝杆菌感染,本研究中其感染率为15.1%,致病性源于:细菌在组织细胞内大量繁殖容易引起炎症,对免疫功能造成损伤。此外难辨梭状芽孢杆菌能够诱导患者发生严重腹泻、结肠穿孔等疾病,严重者甚至死亡,且传播速度快,也具有明显的危害性;虽然空肠弯曲菌、沙门菌索然占比较少,但是空肠弯曲菌属于当前国内外人畜共患病原菌,容易导致急性肠炎以及食物中毒,诱发腹泻频率较高,沙门菌会导致人体出现严重的腹泻症状,因此临床也不容忽视[7-8]。
综上所述,病原微生物检测显示真菌、隐孢子虫等病原微生物是HIV感染患者伴发慢性腹泻的主要原因,临床实践中要针对性加强防范。
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Analysis of Pathogen Detection of Stool Samples of HIV Infected Patients Complicated With Chronic Diarrhea
GUO Jing Clinical Laboratory, Tuberculosis Control Center at Changyi District, Jilin Jilin 132001, China
ObjectiveTo investigate the pathogen detection results of stool samples of HIV patients complicated with chronic diarrhea. Methods 91 cases of HIV patients with chronic diarrhea admitted in our hospital were enrolled as research objects, then collected the fecal specimens for pathogenic microorganisms, and the results were analyzed and compared.Results53 cases of detection data showed pathogenic microorganism infection, the positive rate was 58.2%. Fungi, cryptosporidium, mycobacterium tuberculosis, clostridium difficile, campylobacter jejuni, salmonella infection rates were 47.2%, 24.5%, 15.1%, 7.5%, 3.8%, 1.9% respectively.ConclusionFungi, cryptosporidium and other pathogenic microorganisms are major causes of chronic diarrhea in HIV patients. In clinical, The prevention of these pathogen infection should be strengthened.
HIV infection; chronic diarrhea; stool specimen; pathogenic microorganism
R446.5
A
1674-9308(2017)13-0063-02
10.3969/j.issn.1674-9308.2017.13.032
吉林市昌邑区结核病防治所检验科,吉林 吉林 132001