道地中药材半夏离体快繁技术

2017-01-21 02:46:17贺美忠
中国农业信息 2017年6期
关键词:离体外植体试管

贺美忠

(山西农科院高寒区作物研究所,大同 037008)

道地中药材半夏离体快繁技术

贺美忠

(山西农科院高寒区作物研究所,大同 037008)

半夏是一种草本植物,是常用的药材,具有降逆止呕、消痞散结等作用,已经广泛应用于各种疾病治疗中。但是,由于该药材市场产量较低,经常出现供不应求问题。文章主要对道地中药材半夏离体快繁技术进行介绍,以期给同行提供借鉴。

半夏 快繁技术 研究方法

快繁技术是一种快速培养组织的技术,可以在短时间内产生很多优质的半夏,及时解决临床应用中存在的短缺问题。文章主要对半夏离体快繁技术进行介绍,希望可以促进半夏的产业化发展。

1 材料与方法

主要以商洛地区种植的地道半夏品种为植株。操作方法:(1)选择优质外植体。(2)进行灭菌接种。及时对当天采挖的块茎清洗并去皮,使用清洁液进行浸泡,保证饮用安全。然后将其装入到三角瓶中,加入70%乙醇浸泡,保证块茎完全消毒。再使用无菌水冲洗,并将其放置在无菌滤纸上,进行接种。(3)培养基和条件:①MS+2.4D0.5 mg/L+6-BA1.0 mg/L。② MS+NAA0.5 mg/L+6-BA1.5 mg/L。③1/2MS+NAA0.5 mg/L。④ MS+NAA0.2 mg/L+6-BA2.0 mg/L。⑤ 在200~2 000 Lx光照下,培养10~16 h。(4)移栽试管苗。在日光中进行移栽,并用砖块隔开,方便操作;基质以腐熟药渣、食用菌废纸袋及蛭石等组成,并对基质经常处理。移栽前,必须使用微菌素处理,基质厚度为20 cm。

2 设置实验

首先,对不同诱导途径进行分析,选择最适合的生产防范。然后,设置培养条件,仔细观察生物的生长。最后,配置各种的栽培基质。

3 分析结果

3.1 不同诱导途径

(1)愈伤组织诱导。在1号培养基上,半个月可遇见组织,组成95%为绿色、坚硬。然后将其嫁接、分化培养,产生丛芽。一般部分疏松组织不成芽时,必须及时丢弃。(2)根据愈伤组织诱导不定芽。给愈伤组织诱导培养基上嫁接外植体,一段时间后,产生愈伤组织,再将其转接到2号培养基上,一般20 d左右可定芽。(3)直接诱导生芽。直接将外植体嫁接到4号培养基上。(4)进行无外源激素培养。在5号无外源激素上,一般经过2周培养,可变为黄白色,之后枯萎。

3.2 不同培养条件的比对

(1)将外植体接种到4号培养基上,并放在温度24℃,强度为2 000 Lx的光源下进行照射,通常半个月后可见茎根变色,体积膨胀,再经过20 d后,就会在上部位生长出绿色的芽。接种2个月后,幼芽开始生长,长到3 cm左右会变为淡绿色;叶柄在7 cm时,叶柄基部长出珠芽,并生长出气生根。(2)将相同的培养物给4号培养基接种,放置在光照为200 Lx的温度下照射14~16 h发现,根茎表层呈现绿色,体积增大。经过20 d后,愈伤组织继续膨胀,上部生长为绿色芽状物。接种2个月后,愈伤组织幼苗枯黄,表面呈现黄色。(3)生根诱导。直接将再生芽诱导,产生的不定芽与愈伤组织诱导产生的芽转移到3号培养基上,20 d可见不定根。(4)移植前给基质浇水,并将已经生长好的半夏用试管取出,放置在打好孔的基质中,对其进行机械喷水、覆膜和遮阳处理,2周后可长出新根;40 d后长势较好。

4 讨论分析

(1)愈伤组织与半夏再生诱导,各有优缺。在再生诱导中,芽可继续生长,不需要移植到其他培养基上,操作简单,成苗期短暂,繁殖速度有限。愈伤组织诱导培养基中的组织长到一定程度后,必须移植到其他培养基,虽然操作环节复杂,但复制的半夏种苗较多。(2)半夏试管苗不能在较低温度和黑暗下生长;半夏离体在24℃和2 000 Lx光照下,生长2个月后,长势较好。但在温度低下和黑暗中,幼苗将枯萎。(3)使用腐熟药渣促进发芽成长,且充分利用了废旧资源,操作简单,成本较低。

5 结语

该文主要对道地中药材半夏离体快繁技术进行介绍,对再生诱导与愈伤组织等2组方法进行分析。实际应用中,要有针对性选择。

[1] 陶米林,刘清波,黄红梅.半夏组织培养体系的建立.北方园艺,2013,(04)

[2] 贾永芳.半夏离体培养研究及遗传转化的初探.西南农业大学,2014,(05)

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