基于免疫组织化学方法和荧光原位杂交技术的检测试剂的注册管理模式探讨

韩昭昭 国家食品药品监督管理总局医疗器械技术审评中心 （北京 100044）

基于免疫组织化学方法和荧光原位杂交技术的检测试剂的注册管理模式探讨

韩昭昭 国家食品药品监督管理总局医疗器械技术审评中心 （北京 100044）

文章旨在对基于免疫组织化学方法和荧光原位杂交技术的体外诊断试剂的注册监管模式进行分析并提出建议。通过介绍该类试剂在临床使用中存在的问题及申报情况，分析我国与国际此类试剂的注册监管模式间差别，综合临床应用风险，对该类试剂的注册监管模式进行探讨。

免疫组织化学 注册管理 荧光原位杂交 体外诊断试剂

Abstract: This paper aims to analysis and give a suggestion on the administration of registration of in vitro dignostic devices by immunohistochemistry(IHC) and fluorescence in situ hybridization (FISH) methods. On the basis of introducing registration of the reagents and the problems existing in the clinical use, analysis the administration of registration different between of our country and the International , considering the risk of clinical application, this paper probes into the mode of administration of registration of in vitro dignostic device by IHC and FISH methods.

Key words: IHC, administration of registration, FISH, in vitro dignostic device

免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）检测试剂是指一类利用免疫学原理结合酶催化底物显色的化学方法，检测细胞的特异性抗原以确定细胞的表型的检测试剂。该类试剂包括第一抗体试剂及配套的显色系统、对照试剂、质控片及其他辅助试剂。预期用途与诊断、鉴别诊断、预后判断、指导用药相关。荧光免疫杂交（Fluorescence In Situ Hybridization，FISH）是由细胞遗传学、分子生物学及免疫学技术相结合而产生的一种新技术，用荧光色素标记的核酸作为探针，按照碱基互补的原则，与待检样本中的核酸进行特异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸，可检测间期核和中期相上特定DNA序列，快速识基因的缺失、重复和结构异常[1]。目前各大医院病理科或其他相关科室都有开展基于IHC和FISH技术的检测项目，广泛应用于遗传病及肿瘤的检测中。

1.注册监管模式

1.1 我国监管模式

依据《体外诊断试剂注册管理办法》和《6840体外诊断试剂分类子目录（2013）版》规定，基于免疫组织化学方法和荧光原位杂交技术的检测试剂按第Ⅲ类体外诊断试剂管理。其中，按第Ⅲ类体外诊断试剂管理的IHC体外诊断试剂根据风险程度又划分为A、B两类。

A类：主要包括二大类，一是Her2/Neu、ER、PR、ALK、c-met、CD20、EGFR等与临床治疗、用药密切相关的标志物；二是全新标记物，具有新的临床意义。B类：临床使用多个指标综合诊治的标志物之一，与辅助诊断、鉴别诊断、病情监测、预后相关标志物：如Ki67、CK5/6等。A、B两类产品的注册申报资料不同，主要体现为临床试验样本例数的不同[2]。

1.2 国际监管模式

美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administraion，FDA）该类试剂按风险高低分三类管理，大部分IHC试剂用于病理科属于Ⅰ类普通管理，豁免上市前通告程序510（k），用于疾病的辅助诊断，不作为单独指导临床的诊治指标。少部分作为Ⅱ类管理，上市前需提交510(k)文件。作为Ⅱ类管理的IHC试剂，独立用于疾病的预测与预后判断。除了上述作为Ⅰ类及Ⅱ管理的IHC试剂，具有全新临床意义的新标志物检测项目作为Ⅲ上市前批准管理[3]。基于FISH技术的检测试剂，按Ⅱ类和Ⅲ类项目进行特殊控制和上市前批准管理。

在FDA，IHC试剂和FISH试剂除按体外诊断试剂管理外，还有部分以分析物特异性试剂（Analyte Specific Reagent，ASR）的管理模式，应用于临床诊断。ASR是指识别特定疾病或状况所使用检测产品的“活性成分”，本身不具备明确的预期用途，无使用说明书和声称的产品性能指标。ASR的使用者包括普通体外诊断试剂的制造商和开发实验室研发试剂（Laboratory-Developed Tests，LDTs）的临床实验室。制造商购买后将其作为普通体外诊断试剂的组成成分；临床实验室使用ASR开发本实验室专用LDTs。根据检测的风险水平FDA对ASRs分三类进行管理，从Ⅰ到Ⅲ类风险依次升高，其中大部分ASRs属于Ⅰ类，FDA对于Ⅰ类ASRs进行一般控制[4]。

欧盟对IVD产品管理遵循诊断试剂指令（IVDD 98/79/EEC），指令按产品的风险程度进行分类，对其进行不同程度的控制。诊断指令将IVD按目录A项目、目录B项目和“其他”三类管理，本文讨论的检测试剂，均按“其他”管理，上市前仅需自行签署EC符合性声明，并对生产场所进行注册，即可上市销售。近年来欧盟启动了诊断试剂指令的修订，新版指令对体外诊断试剂的监管将更加严格。

1.3 监管模式区别

从基于产品风险进行分类管理的角度来看，我国与国际上对体外诊断试剂的管理模式是相同的。对IHC检测试剂和FISH检测试剂中各个检测靶标的风险划分考虑，我国与FDA基本相同。我国对于IHC检测试剂的A、B分类申报资料要求，将90%以上项目划为B类项目，简化了注册申报要求。

不同点在于我国将此类试剂全部作为Ⅲ类体外诊断管理，仅提交资料的要求上有所不同；欧盟的管理最为宽松，全部按“其他”管理。而美国FDA则直接将低风险体外诊断试剂划分为低类别进行管理，直接豁免了产品上市前的通告程序。因此，对于此类体外诊断试剂中风险较低的检测项目的上市来说，美国FDA的监管相对我国更为宽松。另外FDA对于体外检测人体样本的检测试剂管理模式更加多样化，目前对其中的LDTs并没有实施有效的监管。

值得注意的是，近年国际监管模式有收紧趋势。随着LDTs对患者的潜在风险显著升高，FDA借鉴IVDs分类管理模式结合美国联邦法规要求和LDTs自由裁量权的实施，发布了LDTs法规监管框架草案，计划根据产品的风险等级对此类产品逐步实施法规监管[5]。欧盟也启动了诊断试剂指令的修订，新版指令对体外诊断试剂的监管将更加严格。

2.注册申报情况

目前病理科常用涉及免疫组化检测项目170余项，已有注册证的涵盖其中51个项目，其中部分项目有多家公司生产的产品已获得批准。涉及开展荧光原位杂交项目100项左右，已有注册证产品可检测24个项目，其中常用HER-2、TOP2A等基因检测有多家公司生产的产品已获批准。

3.存在的问题及建议

3.1 申请注册的产品数量少

2016年提交注册申请的相关产品仅12项，与临床应用需求不相匹配，亦与各企业拥有但尚未递交申报的几百项产品项目相差甚远。分析企业注册申请的消极表现可能有以下几个原因，首先部分检测项目临床虽有开展但使用量不大，不足以支持产品注册消耗的费用；其次对于境外产品，部分检测项目在原产国或生产地址所在国家的管理类别较低，无可以满足我国注册申报资料要求的相关技术资料，阻碍产品在我国的注册；最后此类试剂的检测样本与常规体外诊断试剂的体液样本不同为人体组织样本，样本难于获得，加大了企业注册申报时，临床试验的难度。

3.2 无证产品的大量使用

从申报产品统计数据可以看到目前已经批准的检测项目与临床开展项目数量之间存在一定差距，造成出现临床使用单位选择无医疗器械注册证产品使用的现实情况。2015年我国启动了体外诊断试剂综合治理工作，查处大量临床“无证”使用产品，这其中一大部分即为IHC和FISH检测试剂。

3.3 注册管理建议

IHC和FISH检测试剂在国外属于相对成熟的一类产品，并且产品已进入我国市场应用多年，但国内企业起步晚，并且在产品自主研发、风险控制及评价等方面与国外仍有差距。从企业情况看，企业总数少，有的企业品种数量也比较少；另外从管理模式来看，我国与国外并不相同，且国际上有对医疗器械收紧从严管理的趋势。综上对于该类检测试剂项目还需要进行注册管理，对于有已上市产品的检测项目，医疗机构应选择使用已上市产品进行检测。

结合临床应用风险，建议HIC检测试剂中A类项目保持原管理类别，B类项目适当降低管理类别，减小注册申报难度，缩短该类产品的申报时间。建议FISH检测试剂中明确与肿瘤及产前诊断相关的项目，保持原管理类别，其他项目可适当降低管理类别。

[1] 张鼎,胡小梅,胡爱武.荧光原位杂交技术及其在遗传学中的应用进展[J].中华全科医学,2010,8(6):762-764.

[2] 国家食品药品监督管理总局.体外诊断试剂临床试验技术指导原则[Z].国家食品药品监督管理总局公告2014第16号.2014.

[3] CFR - Code of Federal Regulations Title 21[OL].http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfcfr/CFRSearch.cfm.

[4] Guidance for Industry and FDA Staff Commercially Distributed Analyte Specific Reagents (ASRs):Frequently Asked Questions [OL].http://www.fda.gov/downloads/MedicalDevices/DeviceRegulationandGuidance/GuidanceDocuments/ucm071269.pdf.

[5] Guidance for Industry,Food and Drug Administration Staff,and Clinical Laboratories:Framework for Regulatory Oversight of Laboratory Developed Tests (LDTs) [OL].http://www.fda.gov/ucm/groups/fdagov-public/@fdagov-meddev-gen/documents/document/ucm416685.pdf.

Discussion on Administration of Registration of In Vitro Dignostic Device by Immunohistochemistry and Fluorescence In Situ Hybridization Methods

HAN Zhao-zhao Center for Medical Device Evaluation, CFDA (Beijing 100044)

1006-6586(2017)15-0004-02

R197.39

A

2017-03-09