丙型肝炎病毒抗原、抗体及核酸标志物检测结果的关联性研究

梁晓燕

丙型肝炎病毒抗原、抗体及核酸标志物检测结果的关联性研究

梁晓燕

目的 探讨丙型肝炎病毒抗原、抗体和核酸标志物检测结果的相关性。方法 对302份血浆样本的HCV RNA载量、HCV Ag和抗-HCV指标分别使用HCV RNA定量试剂、HCV核心抗原试剂盒、HCV抗体试剂进行检测。结果 HCV RNA载量上升，HCV Ag和抗-HCV阳性符合率上升，各血清指标在不同HCV RNA载量的阳性率对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）。HCV RNA阳性样本中，基因分型检测率为46.51%。结论 HCV RNA基因分型试剂的检测能力不高，效果差，需进一步筛查，应联合早期确诊进行HCV感染诊断。

丙型肝炎病毒抗原；抗体；核酸标志物；检测

丙型肝炎是常见传染性疾病，其主要通过丙型肝炎病毒（HCV）感染致病，目前我国感染丙型肝炎发病率为3.2%，而实验室检查是诊断丙型肝炎重要手段[1-2]。在本次研究中对HCV RNA载量、HCV Ag和抗-HCV指标采用相应检测方法。现将结果表示如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2010年11月—2015年11月收集的302份人血浆样本，对所有样本的HCV不同标志物采用相应方法检查。

1.2 方法

（1）HCV Ag检测：使用两步法免疫检测原理检测，将HCV单克隆抗体包被微粒子与HCV抗原结合，进行冲洗，加入吖啶酯标记HCV抗体结合物冲洗，添加激发液与预激发液，采用相对发光单位（RLUs）表示。样本浓度≥3.00 fmol/L，HCV抗原呈阳性。（2）HCV Ab检测：采用化学发光微粒子免疫技术检测，对人血清、血浆内HCV抗体行定性检测。方法同HCV Ag检测，吖啶酯标记物为鼠抗人抗体结合物。比较反应中化学发光信号与HCV Ag检测的HCV抗体，确定cut-off信号，若样本内化学发光信号＞cut-off值，HCV抗体呈阳性。（3）HCV RNA检测：采用样本核酸提纯系统、实时荧光定量PCR仪以及体外反转录聚合酶链式反应检测技术，选择HCV基因组的5’端高度保守区作为目标序列，确保完全检测到相对应的1、2、3、4、5、6基因型。

1.3 统计学方法

采用SPSS 18.0软件对数据进行分析处理，计数资料以率表示，采用χ2检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 HCV RNA载量与HCV Ag和HCV Ab含量的相关性分析

HCV RNA阳性86份，检出率为28.48%；HCV Ag阳性45份，检出率为14.90%；抗-HCV阳性142份，检出率为47.02%。HCV RNA载量≥500 IU/ml 24份，HCV Ag浓度≥3.00 fmol/L阳性22份，阳性率为91.67%；抗-HCV信号值/判断值≥1有23份，阳性率为95.83%。HCV RNA载量在30～500 IU/ml 18份，HCV Ag浓度≥3.00 fmol/L 9份，阳性率为50.00%；抗-HCV信号值/判断值≥115份，阳性率为83.33%。其中HCV RNA载量＜30 IU/ml 44份，HCV Ag浓度≥3.00 fmol/L阳性5份，阳性率为11.36%；抗-HCV信号值/判断值≥1的阳性33份，阳性率为75.00%。HCV RNA载量上升，HCV Ag和抗-HCV阳性符合率也上升，各血清指标在不同HCV RNA载量的阳性率对比，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 HCV RNA载量与基因分型的相关性分析

86份HCV RNA阳性样本中，有四个基因型（1、2、3、6），总检出40份，检测率为46.51%（40/86），其中基因1型32份，2型4份，3型1份，6型3份。HCV RNA载量≥500 IU/ml 24份，基因分型检查率100.00%；HCV RNA载量在30～500 IU/ml份，其中1型血浆样本12份，6型血浆样本1份，基因分型检测率为72.22%；HCV RNA载量＜30 IU/ml 44份，其中1型血浆样本1份，2型血浆样本1份，基因分型检测率为4.55%。另外有46份样本不能够检测出基因型别。

3 讨论

丙型肝炎主要是通过HCV感染所致，主要传染途径为输血、吸毒以及针刺等方式[3]。患者在早期症状不明显，因此需要采用血清学和分子生物学进行检查。前者主要是运用已知抗原或抗体进行病原学检测，该检测方法操作简单、敏感性较高，但是此方法存在抗体生成的窗口期[4]。后者主要是经已知HCV序列设计特异性引物，具有高敏感性及特异性，并且还能够缩短检测窗口期，对于早期丙型肝炎病毒感染患者具有显著诊断意义[5-6]。

在本次研究中，在所有血浆样本中，HCV RNA阳性检出率为28.48%；HCV Ag阳性检出率为14.90%；抗-HCV阳性检出率为47.02%。在HCV RNA载量不断上升的同时，HCV Ag和抗-HCV阳性符合率也显著上升，各血清指标在不同HCV RNA载量的阳性率对比，差异有统计学意义（P＜0.05）。其与侯健、谷金莲[7-8]等研究结果相类似。说明在HCV RNA阳性和抗-HCV阴性时提示患者为急性丙型肝炎，并且患者大部分为免疫力较低者；而当HCV RNA和抗-HCV均为阳性时，即确诊为急性丙型感染；若抗-HCV阳性，HCV RNA阴性时，提示患者为慢性丙型肝炎或其处于恢复期。所有86份HCV RNA阳性样本中，总共检测出基因分型40份，基因分型检测率为46.51%（40/86）。说明HCV RNA基因分型试剂的检测有待提高。

综上所述，HCV RNA基因分型试剂的检测能力并不高，无法达到满意效果，需要进一步筛查，应与早期确诊进行联合诊断HCV感染情况。

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Correlation of Detected Results of HCV Ag, Antibody, Nucleic Acid Marker

LIANG Xiaoyan Faculty of Basic Medicine, Nanyang Medical College, Nanyang He’nan 473000, China

Objective To investigate correlation of detected results of hepatitis C virus antigen (HCA Ag), antibody, nucleic acid marker. Methods HCV RNA load, HCV Ag and anti-HCV index of 302 plasma samples were detected by HCV RNA quantitative reagent, HCV core antigen reagent, HCV antibody reagent. Results HCV RNA load increased, positive accordance rate of HCV Ag and anti-HCV increased, positive rate of serum indexes in different HCV RNA loads had difference (P < 0.05). Detection rate of genotyping was 46.51% in HVC RNA positive samples. Conclusion HCV RNA genotyping reagent has no high detectability with bad effect and needs screening. It needs early diagnosis to conf i rm HCV infection.

HCV Ag; antibody; nucleic acid marker; detection

R446

A

1674-9316（2017）10-0110-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.10.061

南阳医学高等专科学校基础医学部，河南 南阳 473000