骨桥蛋白检测在子宫颈鳞癌放疗预后中的应用价值

张 鹏

（中国人民解放军第二0二医院，辽宁 沈阳 110000）

骨桥蛋白检测在子宫颈鳞癌放疗预后中的应用价值

张 鹏

（中国人民解放军第二0二医院，辽宁 沈阳 110000）

目的探讨骨桥蛋白检测在子宫颈鳞癌放疗预后中的应用价值。方法选择子宫颈鳞癌患者90例，均接受骨桥蛋白检测，并进行放疗，总结骨桥蛋白检测在放疗预后效果预测及评价中的作用。结果子宫颈鳞癌患者骨桥蛋白阳性率及外周血中的含量越高，其放疗预后效果越差，且外周血中骨桥蛋白含量再次升高，证明患者病情复发或转移。结论检测骨桥蛋白可预测放疗的治疗效果，还可用于病症诊断或监测治疗后的复发与转移。

子宫颈鳞癌；骨桥蛋白；放疗预后

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择2014年1月至2015年10月，在我院接受治疗的子宫颈鳞癌患者90例，根据放疗的临床治疗效果分为A、B两组。A组患者40例，放疗后的预后效果良好，病灶大部分消失，对放疗具有较高的灵敏度；B组患者50例，放疗后病情未得到有效控制，对放疗具有较高的抵抗性。A、B两组患者排除骨桥蛋白含量，在年龄、性别、病程、FIGO分期等基本资料方面无明显差异，P＞0.05，组间具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 入选的90例子宫颈鳞癌患者均应用免疫组织化学SP法检测骨桥蛋白，统计两组患者骨桥蛋白阴性例数及阳性例数；B组患者接受外周血骨桥蛋白检测，分别统计B1、B2、B3三组患者的骨桥蛋白含量。

1.2.2 骨桥蛋白含量检测：抽取空腹12 h晨起静脉血5 mL，抗凝储藏，离心取上清液；OPN标准蛋白稀释，取骨桥蛋白96孔检测试剂盒备用；除空白孔依次添加不同浓度的血液样本，密封反应孔，37 ℃孵育90 min；洗板，加生物素化抗体100微升/孔，孵育60 min；洗板，加酶结合物100微升/孔，孵育30 min；洗板，加显色剂100微升/孔，孵育15～20 min；加终止液100微升/孔，混勾后即刻测量。

1.2.3 骨桥蛋白阴、阳性检测：检测操作：子宫颈4 µm的石蜡组织切片脱蜡水化，浸入柠檬酸缓冲液后采用高温高压法修复切片组织抗原；冷却后浸泡磷酸盐缓冲液，添加50 µL、3%的过氧化氢孵育15 min，消除切片内源性过氧化物酶活性；冲洗，加入经磷酸盐缓冲液稀释至10%的小牛血清50 µL，孵育；加1∶200比例稀释的骨桥蛋白抗体50 µL，孵育；添加二抗50 µL，孵育；冲洗后添加链霉素抗生物素-过氧化物酶溶液50 µL，孵育；冲洗，添加染色剂后固封。

结果统计：用已知阳性片做阳性染色对照样本，PBS做阴性染色对照样本。染色结果为棕褐色、黄褐色、浅黄色，分别代表强阳性、中度阳性及弱阳性，并依次记录3分、2分、1分，如样本无颜色显示则记0分。阳性细胞数统计结果＞50%、25%～50%、＜25%时，分别记录3分、2分、1分，无阳性细胞则以0分记录。每名患者的两种分数记录结果相加，总分＞3分为骨桥蛋白阳性，低于3分为骨桥蛋白阴性。所有样本分数的判定与统计均由两名医师同时独立完成，当结果出现差异时则由第三名医师复核。

1.3 筛选指标：所有入选患者均符合临床宫颈鳞癌的诊断标准，经病理学检查确诊；排除具有其他癌性病变的患者，排除已具有远端转移的患者；排除放射治疗前接受过手术治疗或其他抗肿瘤治疗的患者，且所有患者在放疗后均未接受手术治疗；排除妊娠及哺乳期患者，排除具有严重脏器功能衰竭或其他会对研究结果形成影响的重大疾病患者；排除具有精神病史或已出现精神障碍的患者；所有患者及其家属对本次观察内容均具有详细的了解，自愿参与并能够积极配合治疗，签署知情同意书。

1.4 评价指标：分别统计A、B两组患者的骨桥蛋白阳性例数及阴性例数，区别B1、B2、B3三个组别的骨桥蛋白的阳性例数及阴性例数，计算骨桥蛋白阳性率；检测B1、B2、B3三个组别的骨桥蛋白含量。

1.5 统计处理：文中数据采用SPSS17.0软件进行处理，计数资料采用%表示，资料采用卡方检验，计量资料采用（x-±s）表示，资料采用t值检验，P＜0.05，数据差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 A、B两组骨桥蛋白阳性及阴性例数：A组患者进行放射治疗后预后效果良好，其40例子宫颈鳞癌患者中骨桥蛋白检查阴性31例，阳性9例，阳性率为22.5%；B组患者进行放射治疗后预后效果不理想，其50例子宫颈鳞癌患者中骨桥蛋白检查阴性14例，阳性36例，阳性率为72%；两组对比χ2=21.87，P＜0.05，数据差异具有统计学意义。

2.2 B1、B2、B3三个组别的骨桥蛋白阳性及阴性例数：B1组患者进行放射治疗后病情持续加重，其19例子宫颈鳞癌患者中骨桥蛋白检查阴性1例，阳性18例，阳性率为94.74%；B2组患者进行放射治疗后，病情有所好转但局部病灶反复复发，其23例子宫颈鳞癌患者中骨桥蛋白检查阴性7例，阳性16例，阳性率为69.57%；B3组患者进行放射治疗后病灶消失，预后具有远端转移，其8例子宫颈鳞癌患者中骨桥蛋白检查阴性6例，阳性2例，阳性率为25%。B1组与B2组对比，χ2=4.3，P＜0.05；B1组与B3组对比，χ2=14.3，P＜0.05；B2组与B3组对比，χ2=4.9，P＜0.05；数据差异具有统计学意义。

2.3 B1、B2、B3三个组别的骨桥蛋白含量：B1组患者进行放射治疗前的骨桥蛋白含量为（312.4±39.7）ng/mL；B2组患者进行放射治疗前的骨桥蛋白含量为（265.3±36.5）ng/mL；B3组患者进行放射治疗前的骨桥蛋白含量为（220.2±34.3）ng/mL。B1组与B2组对比，t=4.00，P＜0.05；B1组与B3组对比，t=7.54，P＜0.05；B2组与B3组对比，t=4.03，P＜0.05；数据差异具有统计学意义。B2组患者放疗病情好转时的骨桥蛋白含量为（172.4±38.2）ng/mL，复发时骨桥蛋白含量为（246.8±34.5）ng/mL；好转时与治疗前骨桥蛋白含量对比t=8.43，P＜0.05；好转时与复发时骨桥蛋白含量对比t=6.93，P＜0.05；数据差异具有统计学意义。B3组患者病灶消除时骨桥蛋白含量为（167.6±39.1）ng/mL，远端转移时骨桥蛋白含量为（232.5 ±41.2）ng/mL；病灶消除时与治疗前骨桥蛋白含量对比t=4.29，P＜0.05，病灶消除时与远端转移时骨桥蛋白含量对比t=4.85，P＜0.05；数据差异具有统计学意义。

3 讨 论

骨桥蛋白是一种非胶原型、富含唾液酸的趋化因子样磷酸化糖蛋白[1]。有学者称之为“肿瘤转移基因”，认为骨桥蛋白在癌症患者的诊断、治疗及发展中具有重要作用，且对癌症患者放疗预后具有一定提示。放射疗法射线作用于肿瘤的强度受病灶区域富氧量的影响，氧量越高则放射疗法的治疗效果越显著。骨桥蛋白是组织内提示氧量的一种内源性标志物，当氧含量降低时，骨桥蛋白的含量就会增加，且与组织内氧含量显负相关。因此，对子宫颈鳞癌患者进行骨桥蛋白检测，能够对放射疗法的治疗效果进行有效评估。文中2.1显示，放射治疗效果良好的A组患者，骨桥蛋白阳性率为22.5%，而放射治疗后临床症状未得到有效控制的B组患者的骨桥蛋白阳性率为72%，A组患者的骨桥蛋白阳性率明显低于B组，P＜0.05。证明，治疗前对患者的骨桥蛋白进行检测，可以对患者放射治疗的预后效果进行有效评估，骨桥蛋白的阳性率越高，子宫颈鳞癌患者的放射治疗效果就越差。文中2.2显示，放射治疗后病情持续加重的B1组患者，骨桥蛋白阳性率为94.74%，局部病灶反复复发的B2组患者阳性率为69.57%、远端转移的B3组患者阳性率为25%。进一步证明了2.1所得出的结论，患者骨桥蛋白阳性率与放疗的治疗效果显负相关。文中2.3显示，B1、B2、B3三个组别治疗前的骨桥蛋白含量显依次减少趋势，且患者放射治疗病情好转后骨桥蛋白含量明显降低。但在病灶局部复发或出现远端转移时，骨桥蛋白含量又再次升高。证明，骨桥蛋白不仅可以预测放射治疗的临床效果，且骨桥蛋白的含量也可作为放疗的预后评估标准，骨桥蛋白含量越低则放射治疗的临床效果越显著。

检测骨桥蛋白可预测放疗的治疗效果，还可用于病症诊断或监测治疗后的复发与转移。 总之，对子宫颈鳞癌患者进行骨桥蛋白检测，可在治疗前对放疗效果进行预测，并在治疗后对放疗效果进行评估。

[1] 李博.子宫颈上皮内瘤变及鳞癌组织中骨桥蛋白表达意义的研究[D].锦州:辽宁医学院,2012.

R737.33

B

1671-8194（2017）05-0166-02