发光免疫分析仪联合检测超敏C反应蛋白、降钙素原及免疫功能对小儿肺炎诊断的价值

张华俐 王 超 张 蕊 张 健 范 蓉

发光免疫分析仪联合检测超敏C反应蛋白、降钙素原及免疫功能对小儿肺炎诊断的价值

张华俐①王 超①张 蕊②张 健③范 蓉①

目的：探讨发光免疫分析仪联合检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)和免疫功能在小儿肺炎诊断中的价值。方法：选取200例肺炎患儿，按感染的病原体种类将其分为细菌性肺炎组(70例)，支原体肺炎组(65例)和病毒性肺炎组(65例)，同时选取40名健康体检儿童为健康对照组，采集4组血样，采用发光免疫分析仪联合检测，并比较4组的hs-CRP、PCT和免疫功能。结果：4组hs-CRP水平进行比较，其中细菌性肺炎组患儿hs-CRP水平高于其他3组，差异有统计学意义(t=2.358，t=3.062，t=2.816；P＜0.05)；支原体肺炎组患儿hs-CRP高于病毒性肺炎组患儿与健康对照组，差异有统计学意义(t=3.128，t=3.752；P＜0.05)；病毒性肺炎组与对照组比较，无统计学差异。细菌性肺炎组患儿的PCT水平显著高于其他3组，差异有统计学意义(t=2.613，t=2.774，t=5.273；P＜0.05)；而阳性率也显著高于其他3组，差异有统计学意义(x2=24.67，P＜0.05)。3组肺炎患儿CD4+低于健康对照组，差异有统计学意义(t=3.687，t=6.204，t=2.379；P＜0.05)；CD4+/CD8+低于健康对照组，差异有统计学意义(t=2.083，t=3.068，t=6.297；P＜0.05)；CD4+CD25+Treg低于健康对照组，差异有统计学意义(t=7.104，t=2.339，t=2.621；P＜0.05)。细菌性肺炎组和支原体肺炎组的CD8+高于健康对照组，差异有统计学意义(t=3.255，t=2.694；P＜0.05)。结论：发光免疫分析仪联合检测hs-CRP、PCT和免疫功能可以用于儿童肺炎的早期鉴别诊断，并有利于患儿预后。

超敏C反应蛋白；降钙素原；免疫功能；联合测定；小儿肺炎

[First-author’s address]Department of Laboratory, The First Hospital of Shijiazhuang, Shijiazhuang 050011, China.

肺炎是一种严重危害儿童身体健康的多发病和常见病，其发病率和病死率均居儿科各疾病之首[1]。肺炎以病原学角度分类为细菌性肺炎、支原体肺炎及病毒性肺炎，其治疗和预后均有较大差异，故早期的鉴别诊断尤为重要[2-3]。目前，肺炎的诊断主要基于临床症状，或采用X射线检查、咽拭子细菌培养或支原体属检测等方法[4]。但临床症状及X射线检查特异度低，咽拭子或支原体属检测特异性虽高，但耗时较长，细菌培养需3 d以上，不适用于早期诊断。因此，目前亟需寻找快速可行的方案对各型肺炎进行鉴别诊断，以避免抗生素的临床滥用。

发光免疫分析仪联合检测超敏C反应蛋白(high sensitive C reactive protein，hs-CRP)能准确的检测低浓度C反应蛋白，而C反应蛋白又是一种典型的急性期反应蛋白[5]。血清降钙素原(procalcitonin，PCT)是在细菌感染时增高，且与感染程度呈正相关[6]。血清hs-CRP和PCT的检测可用来区别细菌与病毒感染。CD4＋CD25＋调节性T细胞(regulatory T cell，Treg)具有抑制免疫调节功能，对于免疫功能低下患儿需要进行对症治疗，可避免抗生素的滥用，以改善预后[7]。为此，本研究采用发光免疫分析仪联合检测hs-CRP、PCT和免疫功能用于儿童肺炎的早期鉴别诊断。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年7月至2015年7月石家庄市第一医院收治的200例肺炎患儿，按感染的病原体种类将其分为细菌性肺炎组(70例)、支原体肺炎组(65例)和病毒性肺炎组(65例)；同期选取40名健康体检儿童为健康对照组。细菌性肺炎组中男性41例，女性29例；平均年龄(6.4±1.5)岁，平均病程(7.3±2.4)d。支原体肺炎组中男性39例，女性26例；平均年龄(6.6±1.5)岁，平均病程(7.4±2.2)d。病毒性肺炎组中男性38例，女性27例；平均年龄(6.6±1.7)岁，平均病程(7.5±2.3)d。健康对照组中男性23名，女性17名；平均年龄(6.5±1.6)岁。四组儿童的一般资料比较无差异，具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

(1)纳入标准：①符合小儿肺炎的诊断标准；②健康对照组近4周内无呼吸道感染史；③签署研究知情同意书。

(2)排除标准：①患其他肺部疾病者，如肺结核、哮喘等；②伴身体其他系统器质性疾病者；③不能配合研究者。

1.3 仪器设备与试剂

采用MODELAR P800型全自动生化分析仪(瑞士罗氏公司)；Lumino发光免疫分析仪(德国)；EPICS XL流式细胞仪(美国贝克曼库尔特)。试剂来自于南京基蛋生物科技有限公司。

1.4 检测方法

(1)三组肺炎患儿于入院初期均接受治疗前采集空腹静脉血，健康对照组儿童采集抗凝静脉血。

(2)使用MODELAR P800型全自动生化分析仪采用免疫散射比浊法进行hs-CRP检测。

(3)使用Lumino发光免疫分析仪进行PCT检测，PCT＞0.5 μg/L则为阳性。

(4)使用EPICS XL流式细胞仪进行免疫功能检测，检测外周血T淋巴细胞亚群，检测外周血CD4＋CD25＋Treg细胞水平，即CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞百分比。

1.5 观察与评价指标

检测三组肺炎患儿血清hs-CRP、PCT、CD4+、CD4+CD25+Treg水平以及CD4+/CD8+T细胞比值，并与健康对照组儿童进行对比分析。

1.6 统计学方法

使用SPSS 13.0统计软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差(x-±s)表示，多组间比较采用F检验，有统计学差异的进一步比较采用Dunnett t检验；计数资料采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 四组hs-CRP水平检测结果比较

将四组hs-CRP水平检测结果进行比较，其中细菌性肺炎组患儿hs-CRP水平最高，支原体肺炎组患儿hs-CRP水平次之，两组与健康对照组比较，差异有统计学意义(t=2.358，t=3.062，P＜0.05)。病毒性肺炎组患儿与健康对照组比较，差异无统计学意义(t=0.935，P＞0.05)，见表1。

表1 四组hs-CRP水平比较(±s)

表1 四组hs-CRP水平比较(±s)

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2.2 四组PCT检测结果比较

细菌性肺炎组PCT水平及阳性例数显著高于其他3组，其阳性率为44.29%，与健康对照组比较，差异有统计学意义(x2=24.67，P＜0.05)。健康对照组细菌性肺炎组PCT水平与其他3组比较，差异有统计学意义F=487.79，P＜0.05)，见表2。

2.3 四组CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋比值及CD25＋Treg水平比较

(1)三组肺炎患儿CD4＋水平低于健康对照组，其差异有统计学意义(t=3.687，t=6.204，t=2.379；P＜0.05)。

(2)细菌性肺炎组和支原体肺炎组的CD8＋水平高于健康对照组，差异有统计学意义(t=3.255，t=2.694；P＜0.05)。

(3)三组肺炎患儿CD4+/CD8+比值低于健康对照组，差异有统计学意义(t=2.083，t=3.068，t=6.297；P＜0.05)。

(4)三组肺炎患儿CD4+CD25+Treg水平低于健康对照组，差异有统计学意义(t=7.104，t=2.339，t=2.621；P＜0.05)。

(5)四组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值和CD25+Treg水平比较，其差异有统计学意义(F=30.81，F=10.97，F=10.520，F=36.42；P＜0.05)，见表3。

表3 四组CD4＋/CD8＋比值CD4＋、CD4＋CD25＋Treg水平比较(±s)

表3 四组CD4＋/CD8＋比值CD4＋、CD4＋CD25＋Treg水平比较(±s)

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表2 四组PCT检测结果比较(±s)

表2 四组PCT检测结果比较(±s)

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3 讨论

CRP是一种典型的急性期反应蛋白，由细胞因子诱导分泌，当有急性炎症、创伤等CRP会升高[8]。目前，采用先进的超敏感检测技术能够准确地检测出低浓度C反应蛋白，称为hs-CRP，其在疾病急性期即可检测到。hs-CRP不受外界因素的影响，与炎症变化同步，同时其升高程度与感染程度呈正相关，而病毒感染时变化则不明显[9-10]。对hs-CRP动态监测可以辅助临床诊断及治疗。对肺炎患儿而言，血清hs-CRP用来区别细菌与病毒感染。本研究结果显示，将四组hs-CRP水平进行比较，其中细菌性肺炎组患儿hs-CRP水平高于其他3组，病毒性肺炎组与健康对照组比较，无统计学差异。

血清PCT是一种无激素活性的降钙素前肽物质，机体正常情况下其含量极低，但当严重细菌感染时，PCT浓度水平可增高10000倍[11]。PCT的稳定性好，可作为细菌性和非细菌性感染的鉴别依据[12-13]。本研究结果显示，细菌性肺炎组患儿的PCT水平及阳性数显著高于其他三组，与其他3组间比较无差异，这也与前述研究结论类似。

本研究将对肺炎患儿的hs-CRP、PCT和免疫功能进行联合测定，对于小儿肺炎的早期诊断具有极大的参考价值，同时具有较高的特异度，弥补了现有检测方案的不足，如临床症状及X射线检查特异度低，咽拭子或支原体属检测特异性虽高，但耗时较长。

综上所述，联合测定hs-CRP、PCT和免疫功能对于小儿肺炎诊疗而言，具有极大的临床参考价值，值得推广应用。

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Diagnostic value of high sensitive C reactive protein, calcitonin, and immune function in children with pneumonia/

ZHANG Hua-li, WANG Chao, ZHANG Rui, et al// China Medical Equipment,2016,13(12):109-112.

Objective: To evaluate the diagnostic value of high sensitive C reactive protein(,hs-CRP) procalcitonin(PCT), and immune function in children with pneumonia. Methods: 200 children with pneumonia from July 2014 to July 2015 in the hospital were collected, and were divided into three groups according to the kinds of pathogens infection: bacterial pneumonia group (70 cases), mycoplasma pneumonia group (65 cases) and viral pneumonia group (65 cases). And 40 cases of earlier outpatient health physical examination were selected as healthy control group. Blood samples in the four groups were collected, and the hs-CRP, PCT and immune function were compared. Results: The levels of hs-CRP in the 4 groups were compared, and the level of hs-CRP in the bacterial pneumonia group was higher than that in the other 3 groups (t=2.358, t=3.062, t=2.816; P＜0.05). The level of hs-CRP in mycoplasma pneumonia group was higher than that in the control group (t=3.128, t=3.752; P＜0.05). There was no significant difference between viral pneumonia group and the control group (P＞0.05). The level of PCT in bacterial pneumonia group was higher than that in other three groups (t=2.613, t=2.774, t=5.273; P＜0.05) and the positive cases of PCT in bacterial pneumonia group was higher than that in other three groups (x2=24.67, P＜0.05). CD4+in 3 groups of pneumonia patients were lower than those in the control group (t=3.687, t=6.204, t=2.379; P＜0.05). CD4+/ CD8+in 3 groups of pneumonia patients were lower than those in the control group (t=2.083, t=3.068, t=6.297; P＜0.05). Treg CD4+CD25+in 3 groups of pneumonia patients were lower than those in the control group (t=7.104, t=2.339, t=2.621; P＜0.05). Compared with the control group, CD8+of the bacterial and mycoplasma pneumonia group was higher (t=3.255, t=2.694; P＜0.05). Conclusion: The combined detection of hs-CRP, PCT and immune function can be used in early diagnosis of pneumonia in children, and it is beneficial to the prognosis of the patients.

High sensitive C reactive protein; Calcitonin; Immune function; Combined determination; Children with pneumonia

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.12.031

1672-8270(2016)12-0109-04

R725.6

A

2016-09-23

①石家庄市第一医院检验科 河北 石家庄 050011

②石家庄市第三医院检验科 河北 石家庄 050011

③河北医科大学第四医院疼痛科 河北 石家庄 050011

张华俐，女，(1980- )，硕士，主治医师。石家庄市第一医院检验科，从事临床血液检验与诊断工作。