网织红分群测定对肿瘤化疗患者骨髓造血功能抑制与重建评估的临床价值

陈海泉

（菏泽市立医院检验科，山东 菏泽 274031）

网织红分群测定对肿瘤化疗患者骨髓造血功能抑制与重建评估的临床价值

陈海泉

（菏泽市立医院检验科，山东 菏泽 274031）

目的肿瘤患者在化疗过程中全血细胞多参数的动态变化。方法以Sysmex XN-9000全自动血细胞分析流水线对137例肿瘤化疗患者进行全血细胞检测。分析WBC、网织红（Ret）、未成熟网织红细胞指数（IRF）等参数，通过对137例患者化疗前、化疗后第1天、第3天、第7天、第14天、第21天、第28天的跟踪观察比较，所获数据采用方差分析、t检验和Logistic回归分析。结果发现化疗后外周血WBC、Ret、IRF、PLT等参数化疗后第1天开始降低，未成熟网织红细胞指数(IRF)和白细胞减少呈正相关，高荧光强度网织红细胞比率(HFR%)呈负相关，具有统计学意义(P＜0.05)。结论外周血WBC是反映白血病化疗后白系骨髓造血功能敏感的指标，评估患者在化疗期间的非特异性免疫能力；IRF是肿瘤化疗后红系骨髓造血功能早期恢复的指标，评价携氧能力。与白细胞减少呈正相关。

网织红；未成熟网织红细胞指数；血小板；未成熟网织红细胞指数；肿瘤；化疗；白细胞减少；骨髓造血功能

化疗是恶性肿瘤治疗最常用的手段之一，但化疗使骨髓造血功能常常受到抑制[1]，白细胞（WBC）减少，免疫力下降；血小板计数（PLT）减少，引起出血风险；红细胞（RBC）减少，引起贫血，严重时可出现呼吸困难[2]。目前监测化疗后骨髓造血功能主要依靠WBC和PLT的变化，但我们在临床工作中发现：外周血WBC受生理波动及感染的影响因素较大，并且当WBC或PLT明显下降时，骨髓造血功能已经严重受抑制，错过采取有效治疗措施的最佳时机。因此，寻求一种更加灵敏方便的指标预测骨髓功能状态具有十分重要的临床意义。网织红细胞（Ret）是晚红细胞脱核后至完全成熟红细胞之间的过渡细胞。其胞质中因含嗜碱性物质核糖核酸(RNA)可被荧光染料着色。随着流式技术的发展和激光加荧光染色技术的应用，不仅能对网织红细胞快速准确地计数，而且为红细胞生成活性提供了可靠依据[3]。未成熟网织红细胞指数(IRF)是晚红向成熟红转变的开始[4]，可表达骨髓的造RBC的功能，能早期反映贫血疗效，骨髓被抑制或造血重建等情况[5]。近年来关于IRF在贫血的诊治、骨髓移植方面的报道的颇多，但对肿瘤化疗后骨髓造血功能损伤与恢复评估和药物疗效监测等方面更值得重视，特别是IRF比Ret更敏感,且比患者外周血WBC、PLT等参数和临床症状的变化出现更早。SysmexXN-9000全自动血细胞分析流水线采用流式细胞技术和细胞核酸荧光染色原理对细胞进行多达98个参数的检测。根据荧光强弱可将网织红细胞分为高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）3类。未成熟网织红细胞指数（IRF）是高荧光强度网织红细胞（HFR）与中荧光强度网织红细胞（MFR）的和值，IRF=（HFR+MFR）/(HFR+MFR+LFR)。我们用SysmexXN-9000全自动血细胞分析流水线对137例肿瘤患者化疗前后进行外周血WBC、Ret、IRF对比及动态观察。以求找到评价预测骨髓功能状态更加灵敏的指标。为此，我们自2015年1月10日—11月9日对137例化疗患者外周血进行检测。现将实验结果报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 住院治疗的肿瘤患者137例，年龄14～85岁。平均年龄61.3岁。男性79例，女性58例。食道癌21例，胃癌26例，肝癌24例，肺癌29例，胆囊癌5例，卵巢癌9例，其他肿瘤23例。均经病理学诊断为恶性肿瘤。

1.2 仪器与试剂 SysmexXN-9000全自动血细胞分析流水线DM96阅片系统与配套日本进口原装试剂和日本原装进口高、中、低质控物并参与Sysmex系统全球血球质控及国内省部两级质评。成绩均为A级。

1.3 方法 137例肿瘤患者所用的化疗方案有以下几种：NP、GP、ADM+5-FU、COEP、CHOP、DDP+5-FU。（1）质量控制：每天开机后先预热30min进行室内质控，分别测定高、中、低3种浓度的全血质控物和网织红质控物，重复两次的测定结果均在允许的范围内方可测定标本。（2）标本采集和检测内容：于患者化疗前、化疗后第1天、第3天、第7天、第14天、第21天、第28天采集空腹静脉抗凝血2ml（EDTA-K2防凝）。分别统计WBC、RET、MFR、HFR、LRF数据。

1.4 统计学处理 应用SPSS 17.0统计软件，所得数据采用方差分析、t检验和Logistic回归分析。

2 结果

2.1 化疗后外周血WBC、Ret、IRF等参数化疗后第1天开始降低，LRF第7天最低，WBC第14天最低，以后逐渐回升。LRF第21天恢复正常，WBC第28天恢复正常。见表1。对表1数据比较采用Logistic回归分析发现：未成熟网织红指数（IRF）与白细胞（WBC)减少呈正相关，回归系数为2.416，P＜0.05，有显著差异，有统计学意义，并且IRF的回升早于白细胞和网织红。而低荧光强度网织红细胞（LFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）和网织红（RET%）均无显著性差异（P＞0.05）。高荧光强度网织红细胞比率(HFR%)回归系数为-1.428，呈负相关，P＜0.05，有显著差异。见表2。

2.2 对137例肿瘤患者化疗前后外周血WBC、RET、LRF参数直方图见表3。

2.3 对未成熟网织红细胞指数与白细胞减少的分级分析 表4显示，不成熟网织红细胞IRF越低，白细胞减少发生率越大，骨髓抑制的发生率越高。这与国内其他的研究报道相一致[6]。当未成熟网织红细胞IRF＜5.5%，白细胞减少发生率从34.37%上升为72.22%，有显著性差异(P＜0.005)。

表1 化疗前后外周血WBC、RET、M FR、HFR、LRF变化（±s）

表1 化疗前后外周血WBC、RET、M FR、HFR、LRF变化（±s）

项目 WBC（109/L) RET(%) MFR（%） HFR（%） LRF（%）化疗前 6.5±2.9 1.5±0.4 10.2±4.3 3.4±2.5 8.7±3.9化疗后1天 5.3±1.8 1.3±0.3 8.3±3.7 1.8±1.6 6.6±3.1 3天 4.1±1.5 0.9±0.4 6.4±3.1 0.9±0.7 4.8±2.7 7天 2.9±1.2 0.6±0.3 4.2±2.9 0.5±0.4 3.5±2.4 14天 2.1±0.8 0.5±0.4 8.2±3.8 1.6±1.5 4.2±3.2 21天 4.8±2.1 1.3±0.5 10.0±4.0 3.2±2.4 8.2±4.1 28天 5.7±2.5 1.4±0.6 10.2±4.2 3.3±2.6 8.6±4.0

表2 化疗后白细胞减少网织红分群的相关性回归分析

表4 治疗前后未成熟网织红细胞指数与白细胞减少关系（×10-2，例）

3 讨论

在生理情况下，骨髓中的网织红细胞和成熟红细胞释放进入血液循环，而有核红细胞并不释放至血液循环，这样我们可以通过检查血液中网织红细胞的数量从而进一步推断骨髓生成红细胞的情况[7-8]。化疗是通过血液循环将化疗药物带至全身，在治疗肿瘤的同时对身体内正常的细胞也发生较大的影响[9]。

当化疗时会引起机体出现不同程度的骨髓抑制，使骨髓中的血细胞前体的活性下降，HFR和MFR在早期可能出现降低，所以IRF水平会降低。随后RET才出现减低。随着骨髓功能的恢复，大量较为幼稚的网织红细胞从骨髓释放入外周血，使IRF水平逐渐增高。化疗后外周血WBC、Ret、IRF等参数化疗后第1天开始降低，说明此时已经产生骨髓抑制。当机体化疗7天时IRF已降至最低，而WBC和RET均未达到最低水平，14天后才开始逐渐回升。可以看出IRF在骨髓抑制发生时其变化水平更早于白细胞和RET。所以IRF是反映骨髓造血功能状态较为敏感的指标。而低荧光强度网织红细胞（LFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）和网织红（RET%）均无显著性差异（P＞0.05）。高荧光强度网织红细胞比率(HFR%)回归系数为-1.428，呈负相关。说明高荧光强度网织红细胞比率(HFR%）是骨髓抑制的保护因素。这与国内的相关研究一致[10]。未成熟网织红细胞指数(IRF)可作为恶性肿瘤患者化疗后骨髓抑制的早期预测指标。IRF可作为骨髓造血功能抑制与重建评估的早期预测指标，具有重要的临床指导意义及成本效果的可行性。

参考文献：

[1]刘春燕，付蓉，王瑁，等.重型再生障碍性贫血患者CD8+HLADR+T淋巴细胞效应因子mRNA的表达[J].中华医学杂志，2012，92(18)：1240-1243.

[2]Young NS.Current concepts in the pathophysiology and treatment of aplastie anemia[J].Hematology Am Soe Hemato]Educ Program.2013，2013：76-81.

[3]邢晋苓，杨建英.网织红细胞未成熟分数在肿瘤放化疗中的临床意义[J].检验医学与临床，2010，7(4)：304-305.

[4]彭春林.网织红细胞检测对贫血患者诊疗的意义[J].检验医学与临床，2010，7(13)：1348-1349.

[5]尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第4版，北京：人民卫生出版社，2015：16.

[6]董磊,刘娟,全首祯,等.未成熟网织红细胞分数对评估38例恶性肿瘤患者放疗后造血功能恢复情况的分析[J].国际检验医学杂志，2013，34（3）：311-312.

[7]邢晋苓，杨建英.网织红细胞未成熟分数在肿瘤放化疗中的临床意义[J].检验医学与临床，2010，7(4)：304-305.

[8]冼中任，石汉振，蓝鉴开，等.Sysmex XE-2100血液分析仪网织红细胞检测的性能评价[J].国际医药卫生导报，201l，17(1)：82-85.

[9]胡树珍，杨凤啸，杨素冰，等.血清胱抑素c在肿瘤化疗患者早期肾损害监测中的临床应用[J].临床检验，2011，17(7)：853-855.

[10]李晓京,张时民.网织红细胞检测技术的进展和临床应用[J].中国医刊，2007,42(3):63-66.

Nets Weave Red Based on Determination of Bone Marrow Hematopoietic Function in Patients withTumor Chemotherapy and Evaluate the Clinical Value of Reconstruction

Chen Haiquan
(Heze Municipal Hospital,Heze 274031,Shandong)

ObjectiveTo investigate tumor patients in chemotherapy blood cells parameters of dynam ic change.MethodsBy Sysmex XN-9000 automatic blood cell analysis pipeline of 137 cases of tumor chemotherapy patients of whole blood cell test.Analysis of WBC,reticulocyte(RET),immature reticulocyte erythrocyte index(IRF)and other parameters by of 137 patients with chemotherapy before and after the first day of chemotherapy,the 3 Day,7 days,14 days, 21 days,28 days of tracking were compared.The data obtained using analysis of variance,t test and Logistic regression analysis.ResultsThe results showed that chemotherapy after 1 day after chemotherapy of peripheral blood WBC,RET,IRF, PLT parameters began to decrease,immaturewoven red blood cell index(IRF)and white blood cell reduction was positively related to high fluorescence intensity netswoven red cell ratio(HFR%)w as negatively correlated with statistical significance(P＜0.05).ConclusionPeripheral blood WBC is indicators are sensitive white line of hematopoietic function of bonemarrow after chemotherapy of leukemia,patients during chemotherapy of nonspecific immunity ability evaluation, and IRF Tumor after chemotherapy erythroid hematopoietic function of bonemarrow early recovery index,evaluation of oxygen carrying capacity.And white cell reduction was positively correlated with and early in the white blood cell reduction and recovery.

Network red;Immature index;Platelet;Immature net red blood cell index;Tumor;Chemotherapy; White blood cell;Bonemarrow hematopoietic function

R446.113

：A

：1008-4118（2016）02-0027-04

10.3969/j.issn.1008-4118.2016.02.009

2016-03-15