制药企业共线生产产品清洁验证

高 歌 张会云 尤春玲 王 晨 苏 娜

1. 天津药物研究院药业有限责任公司，天津 300301 2. 天津红日药业股份有限公司，天津 300700

制药企业共线生产产品清洁验证

高 歌1张会云2尤春玲1王 晨1苏 娜1

1. 天津药物研究院药业有限责任公司，天津 300301 2. 天津红日药业股份有限公司，天津 300700

在制药工业中，清洁是避免污染和交叉污染的重要措施，如何验证是否做到了有效清洁，是一项非常重要的工作。清洁验证就是通过科学的方法，在生产设备有代表性的部位取样进行相关检测，将检测结果与预先设定的标准进行比较，按已制定并经批准的清洁标准操作规程清洁后，设备能始终如一地达到预定的清洁效果，从而证明已制定的清洁标准操作规程的科学性、有效性。

清洁验证目标物选择取样部位选择残留限度标准；HPLC法；TOC法

1 概述

在药品生产的过程中，每道生产工序完成以后，对所使用的设备进行清洁是防止污染和交叉污染的重要手段。在制药工业中，清洁是指对使用后的设备进行清洗，设备中各种残留物（包括微生物及其代谢产物）的总量降低到不会影响下批产品的质量和安全性的状态。清洁验证就是通过科学的方法，在生产设备有代表性的部位取样进行相关检测，将检测结果与预先设定的标准进行比较，按已制定并经批准的清洁标准操作规程清洁后，设备能始终如一地达到预定的清洁效果。

2 清洁验证流程

进行清洁验证，首先要明确目标物，即选择哪个产品进行清洁验证；目标物选定后，要进行残留限度的计算、选择取样部位、样品检测，将检测结果与残留限度标准进行对比分析，得出验证结论。

2.1 目标物选择

以片剂产品为例，通常情况下，同一生产线，很多产品会共用全部或部分设备，那么是不是需要每个产品都要做一次清洁验证呢？答案是否定的。通常情况下，只需挑选出共线产品中，最难清洁的产品作为目标物即可。那么这个“最难清洁的目标物”该如何选择呢？通常情况下可由以下这几个指标来评价：溶解性、毒性（LD50），清洁难易程度、批投料量。将生产线涉及的所有产品按照上述这几个指标进行综合评分，分数最高的即为目标物。

2.2 取样部位选择

清洁验证时，该如何选择取样部位，才能使所取的样品具有代表性或挑战性呢？通常，最难清洁的部位选择可以参照以下这几个条件：死角、清洁剂清洁不到的部位、压力小、流速低的部位、管径变化处、容易吸附残留物的部位。

2.3 残留限度标准

确定残留限度在清洁验证中是非常关键的，同时也是个非常复杂的问题，但如果不确定残留限度标准，就无法进行清洁验证。FDA的清洁验证指南中提到，其不会为清洁验证设定一个通用方法或限度标准，因为不同的产品，不同的设备，必定会有不同的残留限度要求。企业应当根据其生产设备和产品的实际情况，制定科学合理的，能实现并能通过适当的方法检验的限度标准。 通常制定限度标准基于以下原则：

1） 百万分之一（10×10-6）浓度限度——即10ppm；

2） 最低日治疗剂量的1/1000；

3） 目视检查，是限度标准的补充；

2.3.1 残留物限度浓度10ppm

假设下批拟生产产品的批量为M（kg），上批产品的残留物浓度最高为10ppm，即10mg/kg，则残留物总量最大为M×10×10-6=10M（mg）；共用设备的总表面积和为Atotal（cm2），则残留于总表面的限度L为10M/Atotal（mg/cm2），从安全角度出发，再除以安全系数F，即得L=10M/（Atotal×F）（mg/cm2），假设F=10，则L= M/Atotal（mg/cm2）=103M/Atotal(μg/cm2)。通常情况下，设备的内表面积是定值，当批量值取最小值时，即可获取表面残留物限度。

2.3.2 生物活性的限度——最低日治疗剂量（MTDD）的1/1000

依据药物的生物学活性数据——最低日治疗剂量确定残留限度是制药企业普遍采用的方法。根据临床观察统计，个体差异达到1/1000基本是不存在的，这就符合了GMP足够安全的理念，因此这种方法非常适合确定高生物的残留物限度。

清洁的目的是保证A产品的生理作用不会出现在B产品中。根据MTDD计算单位面积残留物限度的过程如下：（1）将涉及的产品、设备列表，表中包含以下几项：最低日治疗剂量MTDD（mg），每个产品单个最小制剂量Uw（g）和说明书中每天允许使用的最大制剂数Dd，最小生产批量M（kg）；（2）设备链内表面积Atotal（cm2）；（3）取最小批量M（kg）；（4）取（3）中对应产品的单个制剂质量Uw和每天允许使用的最大制剂数Dd；计算公式如下：

可根据具体情况决定安全系数的值。

2.3.3 肉眼观察限度——不得有可见的残留物

根据一些国外研究资料显示，目检能发现低至1μg/cm2的残留物，是最简单、直观、定性的评估清洁的程度。但2010版GMP附录2《确认与验证》第八章第三十九条规定，目视检查是一个很重要的标准，但通常不能作为单一可接受标准使用。

2.4 检测方法

清洁验证样品，目前采用的比较普遍的检验方法是HPLC法，在样品检验前，一般要进行方法学的确认，主要确认内容有：检测限、定量限、线性/范围、擦拭回收率，还应有溶液稳定性和棉签回收率（确定取样棉签不干扰样品检测）考察。

TOC（总有机碳）法是目前清洁验证中采用的比较新颖的检测方法，灵敏度可达亿分之一。与HPLC法相比较，TOC法是一种非专属性检验方法，具有不需摸索活性成分和考虑样品的因素，较为省时等优点。在样品检测前要进行包括检测限、定量限、线性/范围、准确度、精确度以及擦拭回收率的考察。

TOC法残留限度标准可通过HPLC法活性残留限度计算，计算公式如下：

TOCLimit =HPLC法目标物活性残留限度(ppm ) ×目标物中碳元素所占目标物分子量的百分比

3 讨论

1. 清洁验证重点关注共线生产的产品，某些高致敏性药品（如青霉素/头孢）和高活性的药物（类固醇/细胞毒素），即使用最好的清洁方法也不能被检出，因此其生产必须是专用设备。

2. HPLC法具有专属性，可对残留物进行明确检测；TOC法为非专属性，不能确定检测残留物是哪个成分，但其具有灵敏度高，检测速度快的优点，适合在线监测和日常清洁的监测。

[1]邹大光,袁曦.一种清洁验证新方法—TOC法[J]. 中国药事. 2002,16(1).

[2] 药品生产验证指南[S].2003.