淮安地区6 228例女性感染人乳头瘤病毒的基因型分布

李红林，刘小宁，郭爱霞，时峰俊

（南京医科大学附属淮安第一医院1.检验科，2.中心实验室，3.妇产科，4.感管科，江苏 淮安 223300）

淮安地区6 228例女性感染人乳头瘤病毒的基因型分布

李红林1，刘小宁2，郭爱霞3，时峰俊4

（南京医科大学附属淮安第一医院1.检验科，2.中心实验室，3.妇产科，4.感管科，江苏 淮安 223300）

目的探讨淮安地区女性感染人乳头瘤病毒（HPV）及其基因亚型分布情况，为HPV感染防治和流

人乳头瘤病毒；基因分型；宫颈癌；多重感染

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一类嗜上皮性小双链环状DNA病毒的总称，人类的黏膜鳞状上皮细胞是其天然宿主。主要通过性行为、母婴垂直、直接皮肤接触等方式传播。目前发现的HPV亚型有200多种，其中大约40多种能引起人的生殖道感染，是尖锐湿疣、宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌的主要发病原因[1]。流行病学研究显示，不同地区、种族的人群之间HPV亚型分布具有显著的差异[2]。淮安地区位于江苏省北部，横贯秦玲-淮河一带，是我国地理文化的南北分界线，具有独特的人文地理环境和居民生活方式[3]。但目前关于淮安地区女性HPV基因型感染的相关研究却鲜有报道。本研究应用核酸分子快速杂交基因分型技术对淮安地区女性患者进行HPV基因型检测，以便为该地区HPV感染的防治提供实验室依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2013年11月-2015年10月在淮安市第一人民医院就诊且临床资料完整的6 228例女性患者作为研究对象。年龄16～84岁，平均（38.9±9.5）岁，其中≤25岁患者577例，26～35岁患者1 663例，36～45岁患者2 473例，46～55岁患者1 290例，≥56岁患者225例。在征得患者同意并承诺保护患者隐私的情况下，由妇产科医师专人采集宫颈分泌物，并置于专用的细胞保存液4℃中保存，1周内检测。标本采集前3 d内患者没有阴道内用药或对阴道进行冲洗；24 h内无性行为，且标本采集时患者不处于月经期。排除复查患者的检测结果。

1.2 HPV检测

采用凯普医用核酸分子杂交技术及其配套试剂检测21种常见HPV基因型，其中高危型15种：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68；低危型6种：6、11、42、43、44和CP8304（81）。经DNA分离提取，聚合酶链反应扩增，导流杂交等检测步骤后显色判定结果。

1.3统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计数资料以率或百分比表示，用χ2检验，多组间的两两比较时用Bonferroni法校正检验水准，P＜0.05为差异有统计学意义，

2 结果

2.1 不同年龄段HPV阳性检出率比较

HPV总阳性检出率为37.73%（2 350/6 228），其中单纯低危亚型感染率为4.88%（304/6 228），单纯高危亚型感染率为27.76%（1 729/6 228），混合型感染率为5.09%（317/6 228）。≤25岁、26～35岁、36～45岁、46～55岁、≥56岁年龄段女性HPV阳性检出率分别为41.07%（237/577）、35.38%（588/1 663）、37.73%（933/2 473）、37.91%（489/1 290）、45.78%（103/225），经χ2检验，不同年龄段的阳性检出率比较，差异有统计学意义（χ2=12.950，P=0.012）；且≥56岁年龄段与26～35岁年龄段比较，差异有统计学意义（χ2= 9.273，P=0.002），≥56岁年龄段感染率高于26～35岁年龄段。≤25岁及≥56岁年龄段感染率略高，而26～35岁、36～45岁、46～55岁等3个年龄段的感染率偏低；HPV阳性检出率与年龄段呈近似U形分布。见附图。

附图不同年龄段HPV感染率曲线

2.2HPV阳性的基因亚型重数构成比

将检出1种HPV基因亚型作为单重感染、检出2种HPV基因亚型作为二重感染、检出3种HPV基因亚型作为三重感染，以此类推，分别统计HPV阳性的基因亚型重数构成比。2 350例HPV阳性标本中，单重、双重、三重、四重、五重及以上感染构成比分别为66.03%（1 555例）、22.76%（536例）、7.09%（167例）、2.93%（69例）、1.19%（23例）。各年龄段均以单重感染为主，其中≤25岁年龄段的五重及以上感染构成比最高（2.14%），但与其他年龄段比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；36～45岁年龄段的单重感染构成比最高（68.38%），≥56岁年龄段的单重感染构成比（51.46%）低于其他年龄段（χ2=14.242，P= 0.006）；≥56岁年龄段的二重（31.07%）感染构成比高于其他年龄段（χ2=11.634，P=0.020），三重（9.71%）和四重（5.84%）感染构成比与其他年龄段比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 不同年龄段HPV基因亚型阳性重数构成比例（%）

2.3HPV阳性的基因亚型种类分布

HPV阳性标本中，高危型HPV阳性数为2861例（81.12%）；前5位分别为HPV16（15.23%）、HPV52（11.79%）、HPV58（9.58%）、HPV53（7.00%）和HPV33（6.95%）；低危型阳性数为666例（18.88%），前3位为CP8304（HPV81）（7.14%）、HPV11（5.30%）和HPV6（4.31%）。见表2。

表2 HPV阳性的基因型分布

3 讨论

HPV感染能引起生殖道黏膜上皮发生增生性损伤，现已成为最常见的性传播疾病之一。＞70%女性一生中至少感染1次HPV，但其中大多数是一过性的，一般会在2年内为机体自身免疫系统清除；若2年内没有被清除，则称为HPV的持续感染[4]。根据HPV对宫颈致癌的危险程度，可将HPV基因型分为高危型和低危型。低危型主要引起生殖道尖锐湿疣；高危型则通过产生E6和E7癌蛋白，结合宿主细胞中的抑癌基因p53和Rb，诱导细胞周期调控失常，引发宫颈癌变[5]。高危型HPV的持续感染是宫颈癌变的主要因素。因此，HPV分型检测已成为目前早期筛查宫颈癌、判断疾病类型和选择诊治方案的重要手段之一[6]。

本研究结果显示，①淮安地区女性的HPV感染率为37.73%；高于文献报道的青岛地区（32.2%）[7]、成都地区24.83%[8]、广东地区（7.3%）[9]，以及海南少数民族地区（25.96%）[10]；但低于湖南地区（44.45%）[11]和辽宁地区（45.6%）[12]，这可能与不同研究所选择的目标人群和研究方法不同有关；但也进一步证明HPV的分布存在地域差异性。②淮安地区女性的HPV感染以基因型单重感染为主，但多重基因型感染也存在较大的比例，并且单纯高危亚型HPV感染率（27.76%）高于全国37个城市的综合平均水平（21.07%）[2]，提示淮安地区女性宫颈癌的潜在发生率较高，应引起当地疾控部门和居民的重视，尽早采取预防措施。③淮安地区不同年龄段女性HPV感染率比较，差异有统计学意义。在≤25岁和≥56岁年龄段感染率较高，分别为41.07%和45.78%；而在26～35岁、36～45岁和46～55岁等3个年龄段的感染率略低，分别为35.38%、37.73%和37.91%；HPV感染率与年龄段呈近似U形分布，与广东地区报道的结果相似[9]。这可能是因为≤25岁年轻女性性生活较为活跃，易于发生HPV感染；而≥56岁女性HPV感染率显著高于26～35岁年龄段，则可能是由于≥56岁女性雌激素水平和机体免疫力均较为低下，易于感染HPV；另外本研究所选择的老年人群多是到妇科就诊的宫颈疾病患者，而单纯进行宫颈癌筛查的人群较少，这可能也是引起≥56岁年龄组HPV感染率较高的原因之一。因此，应加强对老年女性HPV感染和宫颈癌筛查知识的宣教力度。④淮安地区女性感染的高危HPV亚型以HPV16、52和58为主，与广东、青岛地区报道的结果相似，而与成都，辽宁地区报道结果稍有不同；另外国内其他地区较少见的低危型HPV81在淮安地区女性中感染率较高；提示未来淮安地区HPV疫苗的研制和选择均应结合当地的地域特点进行。但因本文研究结果均来自淮安地区一家最大的综合性三甲医院，初步提示当地人群HPV基因型感染具有独特的地域特点，但对于该地区各种HPV基因型感染率的确切水平及其与宫颈癌等妇科疾病的相关性，还有待当地开展多中心，大样本的进一步合作研究。

综上所述，淮安地区女性HPV感染率较高，且高于国内37个城市的平均水平。当地应重点做好对≤25岁和≥56岁2个高峰年龄段女性的宣教筛查工作，早诊断、早治疗，预防和控制HPV感染及宫颈癌等相关疾病的发生，提高女性的卫生保健水平。

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（童颖丹 编辑）

Distribution of genotypes of human papillomavirus among 6,228 infected women in Huaian district

Hong-lin Li1,Xiao-lin Liu2,Ai-xia Guo3,Feng-jun Shi4
(1.Clinical Laboratory,2.Central Laboratory,3.Department of Gynecology and Obstetrics, 4.Department of Infection Management,Huaian First Hospital,Nanjing Medical University,Huaian,Jiangsu 223300,China)

Objective To investigate the human papillomavirus(HPV)infection prevalence and subtype distribution among women in Huaian district,in order to provide a scientific basis for intervention,prevention and epidemiological studies of HPV infection.Methods A total of 21 vaginal HPV DNA types were tested among 6,228 women using DNA flow-though hybridization genotyping technique.Results The overall HPV infection rate of involved women in Huaian district was 37.73%(2,350/6,228).The infection rate of single lowrisk HPV subtype was 4.88%(304/6,228),that of single high-risk HPV subtype rate was 27.76%(1,729/ 6,228)and the multiple-infection rate was 5.09%(317/6,228).There were significant differences in HPV infection rates among different age groups(P＜0.05),the paragraph of HPV infection rate in different age group presented as"U"shaped curve.Among the 2,350 HPV-positive specimens,positive infection rates of single, double,three,four and five(including more than five)genotypes were 66.03%(1,555),22.76%(536),7.09% (167),2.93%(69)and 1.19%(23),respectively.The top five high-risk HPV subtypes were HPV16(15.23%), HPV52(11.79%),HPV58(9.58%),HPV53(7.00%)and HPV33(6.95%).The top three low-risk HPV subtypes were CP8304(HPV81,7.14%),HPV11(5.30%)and HPV6(4.31%).Conclusions The rate of HPV in－fection is high in the women of Huaian district.HPV16,52 and 58 are the most common subtypes among high-risk HPV infections,while HPV81,11 and 6 are the most common subtypes among low-risk HPV infections.The peak infection age is≤25 years and≥56 years.

human papillomavirus;genotype;cervical cancer;multiple infection

R737.33

B

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.23.027

1005-8982（2016）23-0128-04

2016-04-11

时峰俊，E-mail：406329841@qq.com

行病学研究提供依据。方法采用核酸分子杂交法筛查6 228例淮安女性生殖道21种HPV基因亚型。结果

淮安地区女性HPV总感染率为37.73%（2 350/6 228），其中单纯低危亚型感染率为4.88%（304/6 228），单纯高危亚型感染率为27.76%（1 729/6 228），混合型感染率为5.09%（317/6 228）。不同年龄段之间HPV感染率比较，差异有统计学意义（P＜0.05），感染率与年龄段呈近似U形曲线。2 350例HPV阳性标本中，单重、双重、三重、四重、五重及以上基因型阳性构成比分别为66.03%（1 555例）；22.76%（536例）、7.09%（167例）、2.93%（69例）和1.19%（23例）；高危亚型阳性构成比前5位分别为HPV16（15.23%）、HPV52（11.79%）、HPV58（9.58%）、HPV53（7.00%）和HPV33（6.95%）；低危亚型阳性构成比前3位分别为CP8304（HPV81）（7.14%）、HPV11（5.30%）、HPV6（4.31%）。结论淮安地区女性HPV感染率较高，高危亚型感染以HPV16、52和58为主，低危亚型感染以HPV81、11和6为主。感染高峰年龄段为≤25岁和≥56岁。