付蕾
【摘要】 目的 探究丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)含量与丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的关系。方法 120例HCV患者的血清标本同时以荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测HCV-RNA及全自动生化分析仪检测ALT水平, 对两组关系进行统计分析。结果 120例患者的标本中, 82例ALT水平异常, 其ALT水平及异常率随RNA含量的升高而增加, 经相关性分析, ALT水平及异常率与HCV-RNA含量呈正相关性(r=0.986, P<0.05)。结论 HCV-RNA是反映HCV复制的有效指标, 通过检测ALT水平可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的炎性反应状态。
【关键词】 丙型肝炎病毒核糖核酸;丙氨酸氨基转移酶
DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.29.017
Relationship between changed serum HCV-RNA content and ALT FU Lei. Department of Clinical Laboratory, Xian City Ninth Hospital, Xian 710054, China
【Abstract】 Objective To investigate relationship between hepatitis C virus-ribonucleic acid (HCV-RNA) content and alanine aminotransferase (ALT) level. Methods Fluorescent quantitative polymerase chain reaction (PCR) was applied to detect HCV-RNA in blood samples of 120 HCV patients, and fully automatic biochemical analyzer was used to detect ALT levels. Relationship between the two indexes was statistically analyzed. Results Among the 120 patients, there were 82 cases with abnormal ALT levels, and their ALT level and abnormality were increased along with increasing RNA content. Analysis showed positive correlation between ALT level, abnormality and HCV-RNA content (r=0.986, P<0.05). Conclusion HCV-RNA is an effective index for showing HCV replication. Detection of ALT level is helpful to comprehend HCV replication state and liver inflammatory reaction.
【Key words】 Hepatitis C virus; Ribonucleic acid; Alanine aminotransferase
由于近几年丙型肝炎病毒的克隆成功, 使得HCV的研究有了很大进展。现在发现HCV在我国感染率较高, 尤其在有过多次献血史的人群中, 感染率更高, 进而引起医源性输血后, 肝炎的发病率增高。因此加强HCV的检测方法, 提高检测敏感性是当前急待解决的问题。本文对此进行研究, 报告如下。
1 材料与方法
1. 1 材料来源 收集西安市第九医院2015年1月~2016年1月治疗的120例HCV患者的血清标本。
1. 2 仪器与试剂 丙型肝炎抗体ELISA检测试剂(上海科华生物有限公司), 仪器为上海圣荷西生产的SJ-8酶标仪。HCV-RNA核酸检测试剂盒(上海科华股份有限公司), 实时荧光定量PCR仪(上海科华股份有限公司), 丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒(北京中生生物科技有限公司), 仪器为日立7180生化分析仪。
1. 3 方法 抗-HCV检测采用酶联免疫吸附法, HCV-RNA实时荧光定量PCR(HCV-RNA含量的阳性参考值<500 copies/ml), 严格按照试剂盒说明书进行操作。ALT测定采用酶法在日立7180全自动生化仪上检测, ALT血清含量<40 U/L为正常。
1. 4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析。相关性分析采用Spearman分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
120例患者的标本中, 82例ALT水平异常, 其ALT水平及异常率随RNA含量的升高而增加, 经相关性分析, ALT水平及异常率与HCV-RNA含量呈正相关性(r=0.986, P<0.05)。不同血清HCV-RNA含量变化对应ALT异常率见表1。
3 讨论
HCV是一类非肠道传播的病毒, 全世界大约1%的普通人群感染此病, 约50%以上的慢性肝炎是由HCV感染引起的, 其中20%~30%的患者可发展为肝硬化, 临床预后较差, 死亡率较高[1]。临床对丙型肝炎的诊断主要有检测血中抗-HCV抗体, 但在感染中, 抗体出现较晚, 感染HCV后一般在1~15个月内产生抗体, 此时只能检出HCV-RNA, 机体免疫力低下, 不能产生相应的免疫应答。即使抗-HCV阳性, 也不能显示血中是否有病毒颗粒, 其原因是抗-HCV抗体阳性仅提示有HCV感染史。因此要采用快速、准确、敏感的检测病毒RNA的逆转录-聚合酶链反应的方法, 证实血中病毒RNA的存在, 是目前许多实验室常用的方法。HCV感染慢性化, 约40%慢性丙型肝炎患者可能发展为肝硬化, 并可导致肝癌。尽早诊断、尽早开始抗病毒治疗可望中止或延缓病情发展, 从而改善患者愈后。因此, HCV感染的早期诊断显得十分重要。
本研究结果显示, 120例患者的标本中, 82例ALT水平异常, 其ALT水平及异常率随RNA含量的升高而增加, 经相关性分析, ALT水平及异常率与HCV-RNA含量呈正相关性(r=0.986, P<0.05), 通过血清HCV-RNA含量及ALT检测结果的比较, 从分子学定量角度证实了HCV-RNA含量与ALT水平呈正相关, 与相关研究[2, 3]报告一致, 也说明了HCV-RNA是在肝细胞中复制, 对细胞产生直接或间接的损伤。
通过本实验作者认为检测抗-HCV抗体只是反映机体对HCV的免疫状态, 并不能反映丙型肝炎患者体内HCV的感染情况, 而HCV-RNA的检测才能直接反映HCV本身状况。分子生物学方法检测无疑是HCV肝炎的一个敏感可靠的辅助诊断方法。因为丙型肝炎病毒感染是引起慢性肝病的主要原因之一。HCV-RNA检测对于HCV诊断、疗效监测以及治疗终点评估具有重要意义。目前, 国内外广泛使用的HCV-RNA定量检测试剂大多基于实时荧光定量PCR技术。由于标准品的不同, 不同厂家仪器检测结果之间会存在较大差异, 即使用同一种方法, 由于环境以及操作人员不同, 反应自身扩增效率也会存在一定变化, 造成结果存在差异。因此在实际临床工作中, 通常要求患者在不同时间点检测HCV-RNA时, 尽可能在同一个实验室, 使用相同的检测方法, 以保证结果的一致性, 其检测较为复杂。ALT在肝细胞中含量较多, 当肝脏遭到损伤是, 此酶释放到血液中, 故作为诊断肝炎的一项重要指标。
综上所述, HCV-RNA是反映HCV复制的有效指标, 通过检测ALT水平可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的炎性反应状态。
参考文献
[1] 梅儒齐. 溶质载体家族及Kruppel样因子12相关基因多态性可影响中国慢性丙型肝炎患者干扰素/利巴韦林联合治疗预后及治疗引起的血细胞减少症. 临床肝胆病杂志, 2016(4):618.
[2] 赵颖, 魏军, 王菊英. 丙型肝炎病毒核酸定量测定的临床价值. 宁夏医学杂志, 2005, 27(4):233.
[3] 宋予娟. FQ-PCR法对丙肝病毒RNA载量、抗-HCV、ALT异常的相关性探讨. 中外医疗, 2016, 35(3):48-49.
[收稿日期:2016-09-12]