JWA基因多态性与消化道肿瘤易感性关系的研究*

丁后友

(安徽人口职业学院附属医院，安徽 池州 247000)



JWA基因多态性与消化道肿瘤易感性关系的研究*

丁后友

(安徽人口职业学院附属医院，安徽 池州 247000)

目的 分析JWA基因多态性与消化道肿瘤易感性关系。方法 2011年2月—2013年9月，非肿瘤患者181例，纳入普通疾病组，消化道恶性肿瘤170例，纳入恶性肿瘤组，体检正常患者200例作为对照组，进行JWA基因多态性分析、易感性分析。结果 -76G/C变异有更高的易感性，调整OR(95%CI)=1.99(1.41～3.47)，风险增减2倍左右。结论 JWA基因变异确实可增加消化道肿瘤易感性。

消化道肿瘤；易感性；JWA基因；基因多态性

消化道肿瘤是一类最常见的肿瘤，主要包括食管癌、胃癌、肠癌等，近年来因社会环境的改变，特别是饮食结构的变化，消化道恶性肿瘤发病率呈逐年上升趋势[1]。消化道肿瘤早期常无典型症状表现，预后较差。绝大多数肿瘤是环境与遗传因素共同作用的结果，DNA修复与肿瘤的发生密切相关，不同个体DNA修复能力存在明显差异。JWA是一种从原代人气管和支气管上皮细胞中分离克隆受全反式维甲酸诱导的与细胞分化相关的新的细胞骨架相关蛋白，近年来研究显示其序列变异，影响该基因可影响细胞对肿瘤发生环境应答，参与肿瘤发生机制。本次研究试分析医院消化道肿瘤患者JWA基因变异与遗传易感性相关性。

1 资料及方法

1.1 一般资料 以2011年2月—2013年9月，医院收治经活检确诊的消化道疾病患者作为研究对象。其中非肿瘤患者181例，纳入普通疾病组，其中食管炎以及Barrett食管45例、浅表性胃炎以及慢性萎缩性胃炎伴高级别上皮瘤样变104例、结肠炎以及结肠息肉32例，其中男120例、女61例，年龄18～88岁、平均(55±10)岁。同期收治的消化道恶性肿瘤170例，纳入恶性肿瘤组，其中食管癌44例、胃癌102例、直结肠癌24例。另选择年龄18～75岁体检正常患者200例作为对照组。纳入标准：①内镜下活检，临床确诊，无误漏诊；②未合并其他类型恶性肿瘤；③服用过可能影响研究药物。

1.2 方法

1.2.1 基因多态性分析 首先：提取基因组DNA，采用无菌ddHO2配置，配置溶血试剂，取外周全血3～5 ml，EDTA抗凝，转入50 ml离心管，加入20 ml溶血试剂，裂解红细胞，2500 r/min，10 min，弃上清液，重复1次直至无明显红色，沉淀加入1 ml含0.5SDS核悬液与10 μl蛋白酶K,转入2 ml离心管，37 ℃水浴过夜，加入1 ml饱和酚，混匀4000 r/min,离心10 min，取上清液，重复1次，上清液中加等体积氯仿与异戊醇混合液(24∶1)，4000 r/min，10 min，取上清，重复1次，上清液中加十分之一体积的3M醋酸钠，加入总体积异丙醇，混匀，以80000 r/min～10000 r/min，离心5 min，弃上清。沉淀中加1 ml无水乙醇，8000 r/min，离心5 min，弃上清，沉淀加500 μl无水乙醇，再次离心。37 ℃下风干，加入适量TE缓冲液。读取紫外线分光光密度值，1.7～2.0之间DNA，纯度合格。以TE统一稀释至1 μg/μl，分装备用。采用标准化PCR试剂检查，JWA启动子，引物序列，Forward:5'-CCTGTACCAACCAAGAGCCAAT -3',Reverse:5'-CGTGGGGCGATATTAACGTCCAT-3',PCR 反应条件，95 ℃预变性5 min，95 ℃30 s，62 ℃40 s,72 ℃45 s，循环33次后72 ℃，延伸10 min。进行凝胶电泳分析。而后进行JWA外显子3扩增反应。最后进行酶切反应。

1.2.2 易感性分析 调取患者病例资料，主要包括年龄、性别、吸烟与饮酒史，进行分层分析，不同疾病以及健康人群进行JWA基因型分布对比。

1.3 统计学处理

2 结 果

普通疾病组、恶性肿瘤组、对照组男性率组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。三组年龄(55±10)岁、(56±12)岁、(54±9)岁，差异无统计学意义(P>0.05)。三组吸烟者、饮酒率差异无统计学意义(P>0.05)。进行多因素Logistic回归性分析显示，-76G/C变异有更高的易感性调整OR(95%CI)=1.99(1.41～3.47),风险增减2倍左右(见表1)。

表1 消化道恶性肿瘤易感性多因素分布与分析结果[n(%)]

3 讨 论

JWA定位于人染色体3p14,基因全长21 kb，近年来研究显示，JWA是一种新的微管相关蛋白，大量研究证实，其对细胞内H2O2诱导环境应答基因，他的变异可影响该基因对肿瘤发生有关环境因素应答，进而影响环境因素所致DNA损伤修复过程，参与许多重大疾病发生机制[2]。目前，已证实在乳腺癌等疾病中具有高度易感性[3]。本次研究显示，在排除性别、吸烟、饮酒等常见的易感性因素后，JWA上-76G/C变异可增加易感性，风险增加2倍左右，尽管相较于男性、吸烟、饮酒OR比并无明显上升，但这种风险是可以叠加的，即在已伴有多种易感因素对象中，若伴有JWA基因改变，则消化道肿瘤易感性明显上升。对于携带有此类基因定位者，应提高其他易感因素控制水平。目前已鉴定的消化道肿瘤发生、进展相关分子遗传事件较多，开展详尽的基因组范围内关联分析，有助于精确地认识消化道肿瘤发生、进展的精确调控网络，推动新的预防、诊断、治疗消化道肿瘤方法。

[1] 邹小农,孙喜斌,陈万青,等.2003—2007年中国胃癌发病与死亡情况分析[J].肿瘤，2012，32(2):109-14.

[2] 汤唯艳,宋雪,朱立伟，等.JWA基因多态性与紫杉类药物对晚期胃癌化疗疗效相关性的研究[J].实用临床医药杂志，2012，16(23):12-14.

[3] 徐丽娟，李进，高勇，等.JWA基因的研究进展[J].检验医学与临床，2015，12(8):2795-2797.

Association of JWA gene polymorphism with susceptibility to digestive tract tumor

DING Hou-you

(Affiliated Hospital of Anhui Vocational College of Population，Chizhou 247000，China)

Objective: To analyze the relationship between JWA gene polymorphism and susceptibility of digestive tract tumors.Methods: From February 2011 to September 2013, 181 patients with non-cancer patients were enrolled in the general disease group, 170 patients with malignant tumors of the digestive tract, 200 patients with malignant tumor and 200 normal controls as control group.JWA gene polymorphism Analysis, susceptibility analysis.Results: The-76G / C mutation had higher susceptibility, adjusted OR (95% CI) = 1.99 (1.41～3.47), and the risk was increased by about 2 times.Conclusion: JWA gene mutation and can increase the susceptibility of gastrointestinal cancer.

HTF; gastrointestinal neoplasms; susceptibility; JWA gene; gene polymorphism

2013年安徽省教育厅省级教学团队项目(2013jxtd108)；2013安徽省教育厅省级示范试验实训中心项目(2013SXZX051)；安徽人口职业学院《内科护理学》精品开放课程(jy2013002)。

丁后友(1976—),男，安徽东至人，讲师，学士，主要从事消化内科教学医疗工作。

R735

B

1004-7115(2016)10-1096-02

10.3969/j.issn.1004-7115.2016.10.005

2016-07-04)