EB病毒IgM及DNA检测在儿童EB病毒感染相关疾病诊断中的应用价值

王红建 封伟

(衡水市第二人民医院检验科，河北 衡水 053000)



EB病毒IgM及DNA检测在儿童EB病毒感染相关疾病诊断中的应用价值

王红建 封伟

(衡水市第二人民医院检验科，河北 衡水 053000)

目的 研究EB病毒IgM及DNA检测在儿童EB病毒感染相关疾病诊断中的应用价值。方法 选取80例EBV感染患儿作为观察组，100例健康儿童作为对照组，所有儿童均检测EBV-IgM及DNA。比较两组儿童上述指标的阳性率，并分析EBV-IgM及DNA检测在儿童EB病毒感染相关疾病中的诊断价值。结果 观察组EBV-IgM阳性率31.25%，EBV-DNA阳性率36.25%；对照组EBV-IgM阳性率11.00%，EBV-DNA阳性率15.00%，差异具有统计学意义(P<0.05)。EBV-IgM灵敏度31.25%，特异度89.00%，约登指数0.1925；EBV-DNA灵敏度36.25%，特异度85.00%，约登指数0.2125。结论 EB病毒IgM及DNA检测在儿童EBV感染相关疾病诊断中具有应用价值。

EBV感染； 儿童； EB病毒IgM； EB病毒DNA

EB病毒(EBV)属于疱疹病毒科，是小儿常见的感染病毒，90%以上的3～5岁儿童曾感染过EBV[1]。该病毒首先在口咽部上皮细胞内增殖，继而进入呼吸道引起呼吸道感染，并可长期潜伏在组织中并在机体免疫力降低时引起复发感染，感染可累及多系统及器官，患儿临床表现复杂，容易造成误诊或漏诊，给临床治疗工作带来困难[2]。目前，临床上多采用EBV抗体定性测定和EBV-DNA定量测定检测EBV感染，本次研究旨在分析EB病毒IgM及EBV-DNA检测在儿童EB病毒感染相关疾病中的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011年12月至2015年10月期间我院收治的80例患儿作为观察组，其中男43例，女37例，年龄6个月至14岁，平均(4.1±2.9)岁。80例患儿中，上呼吸道感染者29例，传染性单核细胞增多症21例，支气管炎及肺炎17例，病毒性心肌炎13例。所有患儿均符合以下标准：(1)患儿均因不明原因发热、咽炎、皮疹、心律失常、肝脾肿大等疑似EB病毒感染的临床表现；(2)排除其他病原体感染的患儿，如肝炎病毒、人巨细胞病毒、肺炎支原体或肺炎衣原体的感染；(3)所有患儿监护人均自愿参与本次研究，符合医学伦理学原则。选取同一时期来我院进行疫苗接种的健康儿100例作为对照组，其中男58例，女42例，年龄6个月至13岁，平均(3.8±3.0)岁。两组的性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 标本采集 所有患儿在未用药之前于清晨于清晨经抽取空腹血5 mL，置于抗凝管中，标记后保存于-80 ℃冰箱中，批量送检。

1.3 观察指标及检测方法 (1)EB病毒(EBV)的IgM检查采用酶联免疫吸附法(ELISA)，试剂盒由上海基兔实业有限公司提供，操作严格按照说明书进行。样本的吸光度值：标准品的吸光度值≥1.1为阳性。(2)EBV-DNA检查采用荧光定量PCR，引物由上海生工生物工程股份有限公司合成，ABI Prism7300荧光定量PCR仪购自上海迪普生物技术有限公司。将咽拭子或全血标本按照说明书进行处理和DNA提取并加入26 μL的DNA检测体系中，将反应管放入样品槽中进行扩增及检测：循环包括50 ℃预反应2 min，94 ℃预变性5 min，每个循环包括94 ℃ 10 s，60 ℃ 40 s，共进行50个循环。标本荧光强度曲线达到阈值时所需循环数(Ct值)≤39为阳性。比较EBV-IgM及EBV-DNA检测在不同疾病患儿中的检出结果。

2 结 果

2.1 不同疾病EBV-IgM及DNA的检测值 不同疾病患儿的EBV-IgM及EBV-DNA的检测值的差异具有统计学意义(P<0.05)。见表1

表1 不同疾病EBV-IgM及DNA的检测值

注：与对照组相比，*P<0.05。

2.2 不同疾病EBV-IgM及DNA的阳性率 不同疾病患儿的EBV-IgM及EBV-DNA阳性率的差异无统计学意义(P>0.05)。患儿的EBV-IgM及DNA检出率均明显高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同疾病EBV-IgM及DNA的阳性率[n(%)]

注：与对照组相比，*P<0.05。

2.3 EBV-IgM及DNA的诊断价值 EBV-IgM诊断EB感染的灵敏度为32.25%，特异度为89.00%，约登指数0.192 5。EBV-DNA诊断EB病毒感染的灵敏度为36.25%，特异度为85.00，约登指数为0.212 5。

3 讨 论

EBV病毒通过空气-飞沫途径在人群中传播，感染者以儿童多见，患者症状较为多样，预后多良好，但免疫力低下者可出现严重并发症[3]。

目前，临床上最常用的EBV检测方法是血清学抗体检测，具有简便、快捷的优点，其中EBV-IgM是EB病毒感染的患儿在感染后早期即可表现为阳性，一般持续4～8周，是急性感染的可靠指标[4]。荧光定量PCR检测EBV-DNA是近些年来发展的技术，可以定量反应体内的EBV-DNA水平，并准确反应EB病毒感染和病毒的复制情况。EBV-DNA的载量与器官损害程度及疾病种类、疾病的严重程度及病死率呈正相关，临床上可以根据EB-DNA拷贝数大小来判断病情严重程度，从而进行更好的用药量的控制，达到理想的治疗效果；且其扩增及产物检测一步完成，整个检测过程处于全密封环境中，避免产物污染等因素造成的检测偏差[5-6]。

本次研究分别采取ELISA和荧光定量PCR的方法检测患儿的EBV-IgM及EBV-DNA水平，结果表明，EBV-IgM表达量及EBV-DNA的Ct值在上呼吸道感染、传染性单核细胞增多症、支气管肺炎及病毒性心肌炎的患儿间存在显著差异；患儿上述指标的阳性率明显高于对照组，不同疾病患儿的EBV-IgM及EBV-DNA阳性率无显著差异，其中上呼吸道感染及支气管炎肺炎患儿上述指标的阳性率高于传染性单核细胞增多症，而病毒性心肌炎患儿EBV-IgM及EBV-DNA阳性率较低。针对不同疾病的患儿，EBV-IgM及EBV-DNA检测的阳性率无明显差异，二者灵敏度相近，EBV-DNA检测略优于EBV-IgM检测，但EBV-IgM特异度高于EBV-DNA。

对上述指标的诊断价值进行分析： IgM是EBV急性感染的早期指标，但持续时间较短，导致患儿窗口期出现和诊断结果假阴性，且小儿免疫系统尚未完善，病毒不能刺激机体产生相应的能够达到检测下限的病毒抗体[7]。不同疾病EBV-DNA的阳性率均明显高于IgM，其原因可能是部分EBV为条件感染，不能引起足够强度的免疫反应，而DNA检测可以检出这部分感染的患儿[8]。

本次研究结果提示EB病毒IgM及DNA检测在儿童EBV感染相关疾病诊断中具有应用价值，早期进行上述指标检测可以减少小儿EBV相关疾病的漏诊、误诊，尤其是EBV-DNA在部分疾病的诊断中更为敏感。

[1] 任伟,龙晓玲,刘玉玲,等.中山市儿童EB病毒感染情况分析[J].临床儿科杂志,2015,33(2):164-166.

[2] 段巧艳.EB病毒感染临床应用研究进展[J].检验医学与临床,2012,9(10):1232-1233.

[3] 陈佳红,万言珍.480例住院患儿EB病毒相关抗体检测及结果分析[J].中国妇幼保健,2015,30(14):2214-2215.

[4] 刘春梅,田文君,张玥,等.EBV DNA检测在小儿EBV感染相关疾病诊断中的意义[C].第一次全国中西医结合检验医学学术会议论文集，2014:401-404.

[5] 孙志惠,刘鹏.EB 病毒血清学及 DNA 联合检测在婴幼儿传染性单核细胞增多症临床应用研究[J].中国实验诊断学,2015,19(10):1696-1698.

[6] 朱婵虹,郑锦利,刘先鸿,等.335例外周血EB病毒DNA检测的结果分析及临床意义[J].实验与检验医学,2015,33(6):749-750.

[7] 陈刚,张薇,胡冬,等.EB病毒衣壳抗原抗体IgM阳性儿童的免疫功能评估研究[J].国际检验医学杂志,2015,36(15):2152-2153,2155.

[8] 柳文菊,杜昆,刘学政,等.儿童呼吸道EB病毒感染IgM抗体与病毒DNA的相关性分析[J].国际检验医学杂志,2012,33(3):283-284.

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