高效液相色谱法同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚含量

罗兴平，杨玲霞

1.西北民族大学化工学院，甘肃 兰州 730000；2.甘肃省食品药品检验研究院，甘肃 兰州 730070

高效液相色谱法同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚含量

罗兴平1，杨玲霞2

1.西北民族大学化工学院，甘肃 兰州 730000；2.甘肃省食品药品检验研究院，甘肃 兰州 730070

目的 建立高效液相色谱法同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚含量的方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为Kromasil C18柱（4.0 mm×250 mm，5.0 µm），流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液（50∶50），流速1.0 mL/min，检测波长360 nm，检测温度为室温。结果 槲皮素、山柰酚分别在0.105 6～2.112 0 μg和0.023 6～0.472 μg范围内具有良好线性关系，平均回收率分别为98.46％（RSD＝2.29％）和98.17％（RSD＝1.99％）。结论 该法准确、灵敏，可用于赶黄草中槲皮素和山柰酚的含量测定。

赶黄草；槲皮素；山柰酚；高效液相色谱法；含量测定

赶黄草为虎耳草科Saxifragaceae扯根菜属Penthorum植物扯根菜Penthorum chinense Pursh.的干燥地上部分，始载于明代《救荒本草》，苗族民间历来作为药食两用植物，被誉为“神仙草”。其性温、味甘、无毒，具有清热解毒、活血散瘀、利水消肿、退黄、平肝的功效，主要分布于华北、华东、中南及陕西、甘肃、四川和贵州等地[1-2]，近年来逐渐驯化为家种，于四川省泸州市古蔺县境内大量种植。

目前关于赶黄草的化学、药理、临床研究已取得一定进展[3-9]，以其为原料开发的肝苏片、肝苏颗粒、肝苏胶囊已在临床得到广泛应用[10-11]，有关赶黄草及其制剂的质量标准评价多为单一的槲皮素、没食子酸或总黄酮测定[12-15]。本研究采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚的含量，为有效控制赶黄草及其制剂的质量，促进其进一步开发应用提供技术支持。

1 仪器与试药

Agilent 1200高效液相色谱仪，美国安捷伦公司；梅特勒XS205DU电子天平，瑞士Mettler toledo公司；B3200S-T型超声波清洗器，上海必能信超声有限公司；MILLI Q超纯水系统，美国Millipore公司。

槲皮素对照品（中国食品药品检定研究院，批号100081-200406）；山柰酚对照品（中国食品药品检定研究院，批号110861-2004050）。赶黄草分别采自四川省古蔺县、四川省成都市新都区、甘肃省康县、甘肃省天水市，由甘肃省食品药品检验所杨玲霞副主任药师鉴定为虎耳草科扯根菜属植物扯根菜Penthorum chinense Pursh.的干燥全草。甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

表2　山柰酚加样回收率试验

2.10 样品测定结果

采用本试验所建立的方法对5批赶黄草样品中槲皮素和山柰酚含量进行测定，计算含量，结果见表3。

表3　样品测定结果（mg/g，n＝3）

3 讨论

赶黄草作为药食两用的药材资源，自明代《救荒本草》至《全国中草药汇编》均有收载，以其为原料研究开发的保健食品也因其解酒醒酒、保肝护肝作用日益受到重视。赶黄草野生资源遍及全国24个省市，但目前仅有四川省泸州市古蔺县境内有大量种植，这一宝贵的自然资源尚未被《中华人民共和国药典》收载。因此，应用现代科技手段，进一步阐明赶黄草的药效物质基础，提高赶黄草的质量标准，促进该药材的进一步推广应用具有重要的意义。

赶黄草主要含有槲皮素、山柰酚及其苷等黄酮类化合物。本试验中曾以甲醇超声提取后直接进样测定，结果槲皮素及山柰酚含量低，杂质峰多，分离度差。采用本文方法，以甲醇-25％盐酸溶液（4∶1）为溶剂加热回流水解提取，槲皮素和山柰酚含量明显提高，杂质峰显著减少，各成分分离度良好。

水解条件的选择系参考2010年版《中华人民共和国药典》（一部）垂盆草项下的含量测定方法，以甲醇-25％盐酸溶液（4∶1）为溶剂加热回流水解1 h。曾对提取时间进行考察，采用四川省古蔺县1号样品分别水解提取30、60、90、120 min，测定槲皮素含量分别为5.09、5.14、5.13、5.15 mg/g，山柰酚含量分别为0.87、0.92、0.93、0.90 mg/g，结果表明水解提取1 h即可提取完全。

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Simultaneous Content Determination of Quercetin and Kaempferol in Penthorum Chinense

Pursh by HPLC

LUO Xing-ping1, YANG Ling-xia2(1. Institute of Chemical Engineering, Northwest University

for Nationalities, Lanzhou 730000, China; 2. Institute for Food and Drug Control of Gansu Province, Lanzhou 730070, China)

Objective To establish an HPLC method for the simultaneous content determination of quercetin and kaempferol in Penthorum Chinense Pursh. Methods The HPLC analysis was carried out on Kromasil C18(250 mm× 4.0 mm, 5.0 μm) with a mixture of methanol-0.1％ phosphate (50:50) as the mobile phase. The determination wavelength was set at 360 nm with the flow rate of 1.0 mL/min. The column temperature was set at room temperature. Results The quercetin and kaempferol showed good linearity in the range of 0.105 6–2.112 0 μg and 0.023 6–0.472 μg respectively. The average recovery rates of quercetin and kaempferol were 98.46％ (RSD=2.29％) and 98.17％ (RSD=1.99％) respectively. Conclusion The method is accurate and sensitive, which can be used for the content determination of quercetin and kaempferol in Penthorum Chinense Pursh.

Penthorum Chinense Pursh; quercetin; kaempferol; HPLC; content determination

10.3969/j.issn.1005-5304.2016.03.021

R284.1

A

1005-5304(2016)03-0077-03

中央高校基本科研业务费专项资金项目(zyz2011058)；西北民族大学科研创新团队计划（2014年）

（2015-04-09）

（2015-05-06；编辑：陈静）