NF-κB信号通路在小鼠脑缺血再灌注细胞凋亡中的作用

朱晓瓞， 余资江， 孙宝飞， 余 彦， 李玉美， 罗时鹏， 肖朝伦， 贺菊芳



NF-κB信号通路在小鼠脑缺血再灌注细胞凋亡中的作用

朱晓瓞1， 余资江1， 孙宝飞1， 余 彦1， 李玉美1， 罗时鹏1， 肖朝伦2， 贺菊芳1

目的 初探核因子-κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)信号通路在小鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury，CIRI)细胞凋亡中的作用。方法 通过夹闭小鼠双侧颈总动脉建立动物模型。模型组分为3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d、21 d，共8组。TTC染色确定脑缺血损伤区域，TUNEL法检测不同时间缺血区细胞凋亡数，原位杂交法和Western blotting检测NF-κB信号通路靶基因/蛋白Bcl-2和C-myc mRNA及蛋白表达。PDTC抑制NF-κB信号通路后，TUNEL法和原位杂交检测建模后1 d、7 d、14 d神经细胞凋亡数及Bcl-2和C-myc mRNA变化情况。结果 各模型组海马CA3区凋亡细胞数量、Bcl-2 mRNA和C-myc mRNA阳性细胞数及二者蛋白表达量高于正常组和假手术组(P<0.05)；PDTC抑制NF-κB信号通路后，各抑制组与对应时间点模型组相比，Bcl-2 mRNA阳性细胞数减少，TUNEL阳性细胞数和C-myc mRNA阳性细胞数增加(P<0.05)。结论 CIRI早期即出现有凋亡细胞数的增加，并在其后较长一段时间内细胞凋亡过程仍存在着持续性的进展；NF-κB信号通路在CIRI病程进展中对神经细胞凋亡起抑制作用，其机制可能通过Bcl-2诱导和C-myc抑制共同发挥调节作用。

脑缺血再灌注； 细胞凋亡； NF-κB信号通路； Bcl-2； C-myc； 小鼠

脑缺血再灌注损伤是由于脑血管疾病导致脑组织缺血、恢复血流再灌注后引发脑组织及神经细胞损害加重的现象。目前研究表明，其发生的病理生理改变可能涉及包括：兴奋性损害、Ca2+超载、自由基及脂质过氧化、线粒体功能障碍、一氧化氮、细胞因子、立早基因和热休克蛋白表达紊乱、细胞凋亡等多因素的共同作用，发生机制复杂[1]。近年来，NF-κB信号通路因作为炎症反应的中心环节参与脑缺血再灌注损伤病理发生发展过程而被学者们大量研究。然而，除了参与炎性反应进而影响、加重脑缺血再灌注损伤外，此信号通路还可能也参与了细胞凋亡的调节过程。在脑缺血再灌注损伤病理机制中，细胞凋亡的过程是在多种因素的作用下进行的。在NF-κB众多靶基因/蛋白中，也有许多参与了细胞循环及凋亡过程，如C-myc基因、p53基因、肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necrosis factor receptor associated factor，TNFR)TNFR1、TNFR2、凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein，IAP)家族的c-IAP1、c-IAP2及抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma 2，Bcl-2)、Bcl-xl等[2]。本研究通过观察、测定小鼠脑缺血再灌注损伤发生发展过程中不同时间节点及应用抑制剂PDTC后，NF-κB信号通路的靶基因/蛋白Bcl-2和C-myc的动态变化，探讨NF-κB信号通路在脑缺血再灌注细胞凋亡过程中可能起到的作用，以期为脑缺血再灌注损伤的有关基础研究及临床治疗提供一定的理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 实验动物 清洁级健康雄性昆明种小鼠260只，体重(25±5)g，购自贵州医科大学实验动物中心[合格证号：SCXK(黔)(2012-0004)]。

1.1.2 主要试剂 水合氯醛购自中国医药(集团)上海化学试剂公司； PDTC、TTC购自北京索莱宝科技有限公司；Bcl-2、C-myc原位杂交检测试剂盒、及兔抗鼠Bcl-2一抗、兔抗鼠C-myc一抗、HRP标记的生物素化二抗(羊抗兔IgG)、BCA蛋白定量试剂盒、Western blotting制胶试剂盒及DAB显色试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司； 兔抗鼠GAPDH一抗购自巴奥德生物科技有限公司；罗氏TUNEL细胞凋亡检测试剂盒购自Roche公司(美国)。

1.2 方 法

1.2.1 动物模型建立 采用随机法将260只昆明小鼠随机分为13组：正常组、假手术组、缺血再灌注组(3 h组、6 h组、12 h组、1 d组、3 d组、7 d组、14 d组、21 d组)和PDTC抑制组(1 d-PDTC组、7 d-PDTC组和14 d-PDTC组)，每组20只。5%水合氯醛腹腔注射麻醉，无菌操作，颈正中切口，逐层分离皮下组织，钝性游离并同时夹闭双侧颈总动脉15 min后恢复灌注血流15 min，重复上述操作3次。术中观察小鼠心率增快、呼吸深慢、双眼球及口唇灰暗为成功阻断脑部血供的标志。术后密观生命体征，分笼饲养，正常饮食。PDTC组分别于术前、术后30 min腹腔注射PDTC稀释液。假手术组仅同法分离双侧颈总动脉而不夹闭，正常组无任何操作。

1.2.2 TTC染色 各组取5只小鼠经左心室快速灌注生理盐水后取脑，-20 ℃速冻切片(第1刀：脑前极与视交叉连线中点；第2刀：视交叉；第3刀：漏斗柄；第4刀：漏斗柄与后叶尾极之间)。1%TTC溶液中37 ℃避光孵育15 min，4%多聚甲醛固定后拍照。

1.2.3 TUNEL法检测细胞凋亡 各组取5只小鼠5%水合氯醛过量腹腔注射麻醉小鼠后迅速以生理盐水及4%多聚甲醛灌注固定，常规脱水石蜡包埋，制备5 μm连续冠状防脱切片。采用TUNEL法依据试剂盒使用说明书进行具体操作，细胞核呈棕色或黄褐色即为凋亡细胞，200倍高倍显微镜下每切片取5个互补重叠视野计算平均凋亡细胞数。

1.2.4 原位杂交检测各模型组Bcl-2和C-myc阳性细胞数 各组取5只小鼠经左心室灌注生理盐水及4%多聚甲醛(含0.1%DEPC)固定后取脑，酒精梯度脱水，石蜡包埋切片，按照Bcl-2和C-myc原位杂交试剂盒使用说明书进行染色。200倍显微镜下观察，细胞核或细胞浆呈棕色颗粒即为染色阳性，在5个不重叠视野下，计数脑损伤区域Bcl-2和C-myc mRNA阳性染色细胞总数并计算均数。

1.2.5 Western blotting法检测各组海马中Bcl-2和C-myc蛋白表达情况 取各组小鼠5只，断颈处死后，提取双侧大脑海马总蛋白(冰上裂解30 min，4 ℃下12000 r/min离心15 min)，BCA试剂盒进行蛋白定量测定。蛋白凝胶电泳检测Bcl-2及C-myc蛋白表达水平，以GAPDH为内对照，图像经过Imagin J软件处理，计算Bcl-2和C-myc蛋白条带与GAPDH蛋白像素灰度值比值作为蛋白表达相对水平。

2 结 果

2.1 建模后一般行为观察 模型各组于夹闭双侧颈总动脉后迅速出现呼吸深快，口唇及双眼灰暗；血管再通后，能在数秒内恢复鲜红；术后约1 h苏醒并伴随不同程度神经损害症状，如头部不规则颤动、焦躁、惊觉、爆发性运动、转圈、活动减少或迟钝等。

2.2 TTC染色 正常组及假手术组各层面脑片未见明显苍白缺血区；模型组出现主要分布于海马所在冠状平面的大脑皮质层、海马区、中脑等处的苍白缺血区；随着再灌注时间的不同苍白程度有所差异，以7 d组最为明显(见图1)。

2.3 细胞凋亡 阳性细胞主要出现在脑海马各扇区、齿状回、缰内侧核，大脑皮质层也有少量阳性细胞分布。正常组和假手术组海马CA3区的TUNEL阳性细胞数量极少， 3 h后阳性细胞已增加，并随着病程的延长呈递增趋势，第7天至峰值，随后逐渐下降，但下降后的阳性细胞数仍高于正常组和假手术组水平(见图2)。统计海马CA3区的阳性细胞结果：正常组与假手术组的TUNEL阳性细胞数之间的差异不具有统计学意义(P>0.05)，各模型组与正常组、假手术组相比明显增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。PDTC抑制NF-κB信号通路后1 d、7 d和14 d，阳性细胞数与相对应时间点的模型组相比均增加(见图3)，差异具有统计学意义(P<0.05)。

2.4 原位杂交 Bcl-2 mRNA和C-myc mRNA阳性细胞主要表达在海马各区域、齿状回及大脑皮质。镜下观察海马CA3区内，正常组和假手术组Bcl-2 mRNA和C-myc mRNA低表达，3 h后两者阳性细胞数均增高，7 d时达到最大值，以后开始下降(见图4、图5)。各模型组Bcl-2和C-myc mRNA阳性细胞数与正常组、假手术组相比，差异具有统计学意义(P<0.05)。应用PDTC抑制NF-κB信号通路以后，海马CA3区内Bcl-2 mRNA阳性细胞数较同时间点的模型组均有所下降；而C-myc mRNA阳性细胞数在各时间点则有所上升。差异具有统计学意义(P<0.05)(见图6～图8)。

2.5 Western blotting法检测各组Bcl-2和C-myc蛋白表达情况 从再灌注3 h开始，Bcl-2和C-myc蛋白表达量随着再灌注时间延长而增加，至灌注第7天时达峰值，以后开始下降，到21 d时二者表达量均近乎正常水平(见图9、图10)。除14 d组(C-myc和Bcl-2)、21 d组(Bcl-2)外，各模型组与正常组/假手术组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)(见图11)。

图1 TT染色。A：缺血再灌注7 d不同层面TTC染色；B：海马所在冠状层面各时间点TTC染色(B1：正常组；B2：假手术组；B3：1 d组；B4：7 d组；B5：14 d组；B6：21 d组)

图2 模型组TUNEL、Bcl-2 mRNA和C-myc mRNA阳性细胞数

与模型1 d组相比▲P<0.05；与模型7 d组相比◆P<0.05；与模型14 d组相比■P<0.05

图3 海马CA3区TUNEL阳性细胞PDTC组与相应时间点模型组的比较

图4 正常组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(A)；3 d组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(B)； 1 d组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(C)； 7 d组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(D)； 14 d组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(E)； 21 d组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(F)×200

图5 正常组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(A)；3 d组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(B)； 1d组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(C)； 7 d组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(D)； 14 d组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(E)； 21 d组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(F)×200

图6 1 d组正常组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(A)；7 d组正常组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(B)；14 d组正常组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(C)；1 d-PDTC组正常组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(D)；7 d-PDTC组正常组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(E)；14 d-PDTC组正常组海马CA3区Bcl-2 mRNA阳性细胞(F)×200

图7 1 d组正常组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(A)；7 d组正常组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(B)；14 d组正常组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(C)；1 d-PDTC组正常组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(D)；7 d-PDTC组正常组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(E)；14 d-PDTC组正常组海马CA3区C-myc mRNA阳性细胞(F)×200

与模型1d组相比*P<0.05；与模型7 d组相比▲P<0.05；与模型14 d组相比■P<0.05

图8 海马CA3区Bcl-2和C-myc mRNA阳性细胞PDTC组与相应时间点模型组的比较

图9 正常组海马Bcl-2蛋白表达(1)；假手术组海马Bcl-2蛋白表达(2)； 3 h组海马Bcl-2蛋白表达(3)； 6 h组海马Bcl-2蛋白表达(4)； 12 h组海马Bcl-2蛋白表达(5)； 1 d组海马Bcl-2蛋白表达(6)； 3 d组海马Bcl-2蛋白表达(7)； 7 d组海马Bcl-2蛋白表达(8)； 14 d组海马Bcl-2蛋白表达(9)； 21 d组海马Bcl-2蛋白表达(10)

图10 正常组海马C-myc蛋白表达(1)；假手术组海马C-myc蛋白表达(2)；3 h组海马C-myc蛋白表达(3)；6 h组海马C-myc蛋白表达(4)；12 h组海马C-myc蛋白表达(5)； 1 d组海马C-myc蛋白表达(6)；3 d组海马C-myc蛋白表达(7)；7 d组海马C-myc蛋白表达(8)；14 d组海马C-myc蛋白表达(9)；21 d组海马C-myc蛋白表达(10)

与正常组、假手术组相比*P<0.05

图11 各组Bcl-2和C-myc蛋白表达的相对灰度值比较

3 讨 论

脑组织对缺氧极为敏感，即使短时间的缺血缺氧也会对其造成严重的功能影响甚至不可逆损伤。目前，脑血管疾病是我国致死率和致残率第一位的疾病，而缺血性脑卒中占80%以上。对于缺血性脑卒中疾病的治疗，目前以达到缺血部位再灌注为原则，主要通过各种治疗手段，力争在最短的时间内完成对脑缺血部位的再灌注[3]。但伴随着缺血部位组织血流成功再灌注而发生的可能功能障碍和结构破坏的进一步加重，即缺血再灌注损伤。脑组织内神经细胞凋亡的增加，往往发生脑损伤后，是脑组织内神经细胞死亡的一种重要形式。它是由相关控制基因诱发并受外部信号调节的主动性、有序性的细胞死亡过程。相关研究已经证实[4]，位于缺血中央区的神经细胞主要表现为坏死；而缺血半暗带则为凋亡。多项研究已证实，CIRI与细胞凋亡有着极为紧密的联系[5]。CIRI后诱发的细胞凋亡是炎症反应、氧自由基、胞内钙失衡、蛋白酶激活、凋亡基因激活等多个环节互相作用、紧密联系，共同所致的结果[6]。

本研究结果发现，脑缺血再灌注早期细胞凋亡极少，随着缺血缺氧后，再灌注时间延长，脑组织内TUNEL阳性凋亡细胞数量不断增多，至第7天达到峰值后开始逐渐下降，但下降后的细胞凋亡数目仍高于正常组及假手术组。这一结果与刘斌[7]等研究报道的脑缺血再灌注后细胞凋亡变化特点相符合。NF-κB信号通路是参与调节细胞的免疫应答、炎症反应、细胞生长、分化及凋亡的最重要信号通路之一。该信号通路反应网多样而复杂，可因多种因素(如肿瘤、感染、损伤等)刺激后而被激活，从而对病理生理状态下的组织细胞进行调控[8]。活化的NF-κB可与许多基因启动子或增强子上特异的κB序列结合，通过调控这些下游靶基因的表达，能有直接或间接地参与调节机体的各项病理生理反应过程。很多研究发现，NF-κB信号通路可通过调节凋亡相关基因的表达来干预细胞凋亡[9]，改变神经细胞的存活率[2,10]。

正常情况下，NF-κB与其抑制蛋白(inhibitor of nuclear factor kappa-B，IκB)相结合，以静息无活性状态的三聚体状态分布于胞质内。CIRI后NF-κB在神经元和胶质细胞中被广泛激活，通过IκB激酶(inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase，IκK)导致IκB磷酸化、泛素化及降解， NF-κB被解离为游离状态后，相应结合位点暴露促使NF-κB转移入核，进而与下游基因的特定序列结合后诱导相关基因转录和表达。其中，也涉及到能够诱导细胞产生促凋亡蛋白及基因(如:C-myc、Fas配体等)的目的蛋白/基因，促进多种黏附因子、细胞因子、趋化因子的表达[11,12]。经过级联反应，最后激活半胱天冬酶导致神经细胞凋亡[13]。一般认为NF-κB对细胞凋亡具有双向调控作用。研究表明，NF-κB的下游靶基因C-myc的表达异常是导致细胞凋亡的主要诱因。NF-κB对细胞凋亡的抑制作用可以体现在它转录激活其下游抗凋亡基因(如Bcl-2家族)[14,15]上。Bcl-2可通过影响神经元分化、腺嘌呤核苷三磷酸(Adenosine triphosphate，ATP)水平、游离钙浓度、蛋白合成等方式抑制神经细胞凋亡[16,17]，提高细胞存活能力。

本研究结果发现，在CIRI的早期海马CA3区的Bcl-2 mRNA和C-myc mRNA阳性细胞数和两种蛋白的表达量均增高，并随着再灌注时间延长至7 d时达峰后逐渐下降。提示CIRI病程中C-myc的过度表达，可能是促进脑组织细胞凋亡的原因之一[18,19]。 Bcl-2与C-myc的变化趋同，可能是由于机体通过上调Bcl-2的表达来阻止病理损伤引起的神经细胞凋亡，此可能为机体在损伤后的一种自我功能修复、保护的体现。当应用PDTC抑制NF-κB信号通路后，各时间点抑制组与模型组相比海马CA3区TUNEL阳性细胞数和C-myc mRNA阳性细胞数均有所上升，而Bcl-2 mRNA阳性细胞数在各时间点则有所下降。这一实验结果提示， NF-κB信号通路参与了CIRI后细胞凋亡的病理过程。其机制可能是，一方面通过诱导产生抗凋亡蛋白Bcl-2而增强抑制细胞凋亡的作用；同时也通过抑制C-myc的表达，减少C-myc对细胞凋亡的促进。二者协同作用，最终达到抑制、减轻CIRI后的神经细胞凋亡。

综上所述，在CIRI引发的神经细胞凋亡过程中，NF-κB信号通路可能通过Bcl-2诱导和C-myc抑制来共同参与其调节过程，对该病理状态下神经细胞凋亡起到一定的抑制作用。然而，NF-κB细胞信号传导通路对CIRI中神经细胞凋亡的调控是一个多方向、多途径的过程，因此，仍需大量的后续试验对其作用及机制加以补充和全面阐释。

[1]朱衍菲,王琳琳,董为人,等.脂肪组织源性干细胞分化为神经细胞及其治疗脑缺血的研究现状 [J].中国组织工程研究,2012,16(1):153-157.

[2]邓冰湘,卢金冬.NF-κB信号通路在脑缺血再灌注损伤中的作用及中药有效组(成)分的干预研究[J].湖南中医药大学学报,2014,34(7):54-58.

[3]Arnaout OM,Rahme RJ,Ahmadieh TYE,et al.Past,present,and future perspectives on the endovascular treatment of acute isehemic stroke[J].Tech Vasc Interv Radiol,2012,15(1):87-92.

[4]王向慧,王 迪.尼莫地平对大鼠急性脑缺血再灌注损伤NF-κB和caspase-3蛋白表达的影响[J].中国生化药物杂志,2015,35(1):10-13.

[5]Wang H,Lu S,Yu Q,et al.Sevoflurane preconditioning confers neuroprotection via anti-inflammatory effects[J].Front Biosci,2011,3:604-615.

[6]甘照儒,桑栎楠.脑缺血/再灌注损伤级联反应研究进展[J].医学综述,2009,15(1):43-45.

[7]刘 斌,董 静,李建民,等.人脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响[J].临床神经病学杂志,2010,23(1):42-45.

[8]郑 重,赵维莅.核因子κB信号转导通路表观遗传学调控的研究进展[J].诊断学理论与实践,2012,11(2):182-185.

[9]Ho JQ,Asagiri M,Hoffmann A,et al.NF-κB Potentiates caspase independent hydrogen peroxide induced cell death[J].PLoS One,2011,6(2):e16815.

[10]Li WL,Yu SP,Chen D,et al.The regulatory role of NF-κB in autophagy-like cell death after focal cerebral isehemia in mice [J].Neuroscience,2013,24(4):16-30.

[11]叶 治,郭曲练,王 锷,等.七氟醚迟发性预处理对大鼠局灶性脑缺血损伤后NF-κB表达的影响[J].中南大学学报(医学版),2010,35(3):262-266.

[12]Huang B,Yang XD,Lang A,et al.Posttranslational modification of NF-κB:another layer of regulation for NF-κB signaling pathway[J].Cell Signal,2010,22(9):1282-1290.

[13]Campos-Esparza M,Sanchez-Gomez M,Matute C,et al.Molecular mechanisms of neuroprotection by two natural antio-xidant polyphenols[J].Cell Calcium,2009,45(4):358-368.

[14]Yin YY,Li WP,Gong HL,et al.Protective effect of Astagaloside on focal cerebral ischemia/reperfusion injury in rats[J]．Am J Chin Med,2010,38(3):517-527.

[15]Jiang W,Zhang S,Fu F,et al.Inhibition of nuclear factor-κB by 6-0-acetyl shanzhiside methyl ester protects brain against injury in a rat model of ischemia and reperfusion[J].J Neuroinflammation,2010,7(41-60):1-10.

[16]Kim YG,Park B,Lee S,et al.Effect of mitochondrial and ER-targeted Bcl-2 overexpression on apoptosis in recombinant Chinese hamster ovary cells treated with sodium butyrate[J].Process Biochem,2012,47(12):2518-2522.

[17]Santiveri CM,Sborgi L,Alba ED.Nuclear magnetic resonance study of protein-protein interactions involving apoptosis regulator Diva (Boo) and the BH3 domain of proapoptotic Bcl-2 members[J].Jpn J Clin Oncol,2002,32(9):358-362.

[18]Fang IM,Yang CH,Yang CH,et al.Transplantation of induced pluripotent stem cells without C-Myc attenuates retinal ischemia and reperfusion injury in rats[J].Exp Eye Res,2013,113:49-59.

[19]Leskov I,Pallasch CP,Drake A,et al.Rapid generation of human B-cell lymphomas via combined expression of Myc and Bcl-2 and their use as a preclinical model for biological therapies[J].Oncogene,2013,32(8):1066-1072.

The effect of NF-κB signaling pathway on apoptosis in cerebral ischemia reperfusion injury in mice

ZHU Xiaodie,YU Zijiang,SUN Baofei,et al.

(Human Anatomy Department of Basic Medical College,Guizhou Medical University,Guiyang 55004,China)

Objective To investigate the possible effect of NF-κB signaling pathway on apoptosis in cerebral ischemia reperfusion injury (CIRI) in mice.Methods CIRI models were copied by stopping the blood of common carotid arteries in both sides at the same time.Mice models were divided into 8 groups according to the reperfusion time:3 h,6 h,12 h,1 d,3 d,7 d,14 d and 21 d.The accurate injured region was confirmed by TTC staining.The number of apoptotic cells was detected by TUNEL and the changes of the target gene/protein Bcl-2 and C-myc in NF-κB signaling pathway were detected by in-situ hybridization (ISH) detection and western blotting.And the TUNEL and ISH detection were used again for the groups in which the NF-κB signaling pathway was controlled by using PDTC.The groups were also divided into 1 d,7 d and 14 d group.Results The number of apoptotic cells,expression of mRNA and protein of Bcl-2 and C-myc significantly increased compared with the normal group and sham-operated group(P<0.05).The number of Bcl-2 mRNA positive cells significantly decreased compared with the model group at the same reperfusion time when PDTC was used to restrain NF-κB,while the number of TUNEL and C-myc mRNA positive cells increased(P<0.05).Conclusion Apoptosis happens in the early of CIRI and is in a sustainable progress for a longer time.NF-κB signaling pathway may play a suppressive role in the regulation of apoptosis in cerebral ischemia reperfusion injury by controling both of Bcl-2 up-regulation and C-myc down-regulation.

Cerebral ischemia reperfusion; Apoptosis; NF-κB signaling pathway; Bcl-2; C-myc; Mice

1003-2754(2016)06-0484-05

2016-04-12；

2016-05-30

国家自然基金(No.81060108)；贵州省科技厅2012年社会发展攻关项目[黔科合SY字(2012)3153号]

(1.贵州医科大学基础医学院人体解剖学教研室，贵州 贵阳 550025；2.贵州医科大学基础医学院人体解剖学实验中心，贵州 贵阳 550025)

余资江，E-mail：yzj0112@126.com

R743.3

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