法氏囊活性五肽BPP—Ⅱ对新城疫疫苗免疫鸡免疫水平的影响

闫婉婉　张巫凡　张聪　王臣

摘要：新城疫是由新城疫病毒引起禽的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病，给我国的养鸡业带来了巨大损失。为研制具有良好免疫效果的免疫肽，本实验通过人工合成法氏囊活性肽BPP-Ⅱ，将其作为佐剂添加到新城疫疫苗中免疫雏鸡，通过对体液免疫指标的检测来评价其对新城疫疫苗免疫效果的影响。结果表明：BPP-Ⅱ不仅对新城疫疫苗有免疫增强作用，而且对法氏囊器官的发育有促进作用。

关键词：法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ；新城疫疫苗；法氏囊指数；抗体滴度

新城疫（newcastle disease，ND）具有很高的发病率和死亡率，是危害养禽业的一种主要传染病。给养禽业带来非常巨大的经济损失。研究发现，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ可以促进T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖、提高机体的细胞免疫和体液免疫的水平、还可以提高机体的抗过氧化应激能力，并且具有广泛应用前景。本研究通过人工合成法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ，将其作为免疫添加剂配合疫苗使用，通过检测免疫指标水平的变化评价BPP-Ⅱ对新城疫疫苗免疫效果的影响，从而为BPP-Ⅱ作为免疫佐剂在临床上的应用提供依据并且为进一步研究奠定基础。

一、材料与方法

1.试验材料

1日龄健康的来航鸡购于洛阳峪口禽业有限公司。新城疫弱毒疫苗购于辽宁益康生物制品有限公司。新城疫病毒毒株F48E9，由本实验室保存。

2.法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ合成

法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ，由上海科肽生物科技有限公司合成，纯度达到95%以上。

3.动物分组及免疫

将105只小鸡随机分成3组，每组35只。9日龄首免，14d后进行二免。采用注射免疫，空白对照组免疫PBS；疫苗对照组每只鸡免疫1头份量的新城疫弱毒苗；疫苗加肽组，每只鸡除了免疫1头份量的新城疫疫苗外，还免疫10ug的法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ。

4.雏鸡脾脏、法氏囊指数的测定

首免后14d、21d第二次采集脾脏和法氏囊。常规方法测定脾脏、法氏囊指数。

5.雏鸡HI抗体效价的测定

将雏鸡在首免后21 d分离得到的血清进行HI试验，测定雏鸡HI抗体效价。

6.统计学处理

采用SPSS 17.0软件，不同组间比较采用单因素方差分析。

二、结果与分析

1.法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ对鸡的脾脏器官发育的影响

经SPSS分析，疫苗+肽组的脾脏指数与空白对照和疫苗对照组相比，无显著性差异（P>0.05）。由此可见，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ对鸡的脾脏的生长无明显促进作用。

2.法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ对鸡的法氏囊器官发育的影响

经SPSS进行分析，疫苗+肽组法氏囊指数显著高于空白对照组和疫苗对照组（P<0.05），如表1。由此可见，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ对鸡的法氏囊的生长有一定的促进作用，也即对鸡的免疫器官有一定的促进作用。

3.法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ对抗体效价的影响

两次免疫后发现，只用疫苗的对照组，平均抗体效价达到5.3，而法氏囊活性五肽配合疫苗组，平均抗体效价达到6.2。由此可见，法氏囊活性五肽对鸡新城疫疫苗免疫鸡产生抗体有一定促进作用。

三、讨论

法氏囊活性肽是从法氏囊中提取到的一种活性因子，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ结构简单，其氨基酸序列为：Met-Thr-Leu-Thr-Gly。分子量小，无免疫原性，无化学毒性，制备很简单，可以从鸡或其它禽类的BF中提取，也可以用化学的方法合成，化学合成的成本也很低，可以大量的制备。实验结果表明，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ作为佐剂能显著提高鸡新城疫弱毒疫苗的体液免疫应答，这为法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ作为免疫佐剂配合弱毒疫苗使用提供了参考依据。