徐建平 (新疆生产建设兵团库尔勒第二师畜牧兽医工作站 841023)
金标法与ELASA检测3种猪病的对比试验
徐建平 (新疆生产建设兵团库尔勒第二师畜牧兽医工作站 841023)
检测卡利用抗体快速金标检测卡法 (简称金标法)检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用,标本中的抗体与胶体金结合的抗原相结合,再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。金标法的试剂为试纸条形式,即为金标试纸条。判定标准:猪瘟、口蹄疫抗体阳性≥1:32(5log2),蓝耳抗体阳性≥1:40;猪瘟、口蹄疫抗体阴性<1:32(5log2),蓝耳抗体阴性<1:40。
(1)试验主要试剂:猪瘟检测卡 (深圳康百得公司,批号:20140527);猪口蹄疫检测卡 (深圳康百得公司,批号:20131225)、蓝耳病检测卡 (深圳康百得公司,批号:20140328)。猪瘟ELISA试剂盒 (洛阳莱普生信息科技有限公司,批号:20131208);口蹄疫试剂盒 (洛阳莱普生信息科技有限公司公司,批号:20131201);猪蓝耳ELISA试剂盒 (北京世纪元亨生物技术有限公司,批号:20140107E)。
(2)在农牧团场,随机抽检486头猪,采用检测卡 (金标法)检测猪瘟、蓝耳、O型口蹄疫的抗体效价,采用ELISA法检测这批血作为对照,比较检测卡与ELISA的区别。可以得出检测卡和ELISA法检测猪瘟、蓝耳、O型口蹄疫符合率达90%以上。详细结果见表1。
(3)对检测卡检测阳性的血清采用ELISA检测可以得出,猪瘟、蓝耳、口蹄疫的符合率达100%,说明检测卡检测合格的ELISA检测合格。详细结果见表2。
(4)对检测卡检测阴性的血清采用ELISA检测可以得出,ELISA检测的有阳性,也有阴性。具体结果见表3。对监测卡检测阴性接近阳性的血清中用ELISA法检测有部分血清为阳性,具体结果见表4。对检测卡检测阴性远离阳性的血清中ELISA法检测血清全部为阴性,具体结果见表5。
表1 检测卡与ELISA比较
表2 检测卡检测阳性血清与ELISA比较
表3 检测卡检测阴性血清与Elisa法比较
表4 检测卡检测阴性血清接近阳性与Elisa法比较
表5 检测卡检测阴性血清远离阳性与Elisa法比较
(1)检测卡检测抗体效价合格的,ELISA检测合格。
(2)检测卡检测抗体效价不合格的,ELISA有合格的,这在于人眼与机器的辨别有差异。
(3)可以肯定的说,用检测卡在临床中检测抗体效价是合格的。检测卡可以作为临床免疫效价的检测、检疫、监督的辅助工具。
新疆建设兵团第二师科技项目 (项目编号:2013NYGG1)。