禽流感新城疫二联重组活疫苗在鹌鹑中的应用试验与探讨

张淑梅，韦方剑，邓建新，贺燕

（1.江苏省连云港市赣榆区畜牧兽医站，江苏连云港　222100；2.连云港市畜产品质量检测中心，江苏连云港　222001）

禽流感新城疫二联重组活疫苗在鹌鹑中的应用试验与探讨

张淑梅1，韦方剑1，邓建新1，贺燕2

（1.江苏省连云港市赣榆区畜牧兽医站，江苏连云港222100；2.连云港市畜产品质量检测中心，江苏连云港222001）

目前国内还没有规范的用于鹌鹑的禽流感免疫程序，传统使用禽流感灭活疫苗免疫，而鹌鹑的个体小，注射免疫困难，导致了免疫密度低，免疫效果差，存在一定的疫情隐患。通过应用禽流感、新城疫重组二联活疫苗（rLH5-6株）在鹌鹑群中进行注射、滴鼻、点眼、饮水等不同方式的应用试验，制订科学的、规范的免疫程序，以实现鹌鹑高致病性禽流感、新城疫免疫科学、经济、高效目标。

鹌鹑；禽流感rLH5；新城疫；免疫；应用试验

目前，我国禽流感防控工作取得了重大进展。禽流感H5N1亚型灭活苗、H5N1+H9二价灭活苗日趋完善，以其生物安全、免疫效果稳定、免疫副反应小的特点被社会接受，并广泛应用于禽流感防控工作，在此基础上以免疫为主的综合防控措施的全面实施，有效地控制了禽流感疫情，家禽禽流感疫情趋于平稳。

随着畜牧业产业结构调整的不断深入，我区养禽业有了较大的发展，规模养禽已成为当今我区畜牧业发展的突出的亮点。全区鹌鹑年饲养量从上世纪80年代中期的1000万羽增至2014年的3000多万羽。全区规模鹌鹑养殖大户发展到800多户，其中2000羽以上的鹌鹑养殖户300多家，5000羽以上的鹌鹑养殖户100多家，1万羽以上的鹌鹑养殖户70多家。但目前国内还没有规范的用于鹌鹑的禽流感免疫程序，传统使用禽流感灭活疫苗免疫，因灭活疫苗仅能注射免疫，而鹌鹑的个体小，注射免疫困难，导致了免疫密度低，免疫效果差，存在一定的疫情隐患。

禽流感、新城疫重组二联活疫苗（rLH5-6株）是哈尔滨维科生物技术开发公司研制生产的一种新型疫苗，具有注射、滴鼻、点眼、饮水等免疫方式的多样性，因此，通过对禽流感、新城疫重组二联活疫苗在鹌鹑群中进行注射、滴鼻、点眼、饮水等不同方式的应用试验，制订科学的、规范的免疫程序及配套的免疫操作规范和消毒规范等，以实现鹌鹑高致病性禽流感、新城疫免疫科学、经济、高效目标，我们开展了禽流感、新城疫二联活疫苗在鹌鹑中的应用试验研究，现将试验结果报告如下并作相关探讨：

1　试验分组、方法及抗体检测

1.1试验在3个养殖场，每场分5组进行

第1组：7日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1羽份滴鼻，22日龄新城疫—禽流感重组二联活疫苗2羽份饮水，50日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.5mL肌注。

第2组：7日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1.5羽份滴鼻，22日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.5mL肌注。

第3组：7日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1羽份饮水，22日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.5mL肌注。

第4组：15日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.3mL肌注，35日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.5mL肌注。

第5组：7日龄新城疫Ⅳ系活疫苗1羽份滴鼻，22日龄禽流感、新城疫感重组二联活疫苗2羽份饮水。

1.2试验用疫苗

禽流感、新城疫重组二联活疫苗（rLH5-6株）由哈尔滨维科生物技术开发公司生产，其批准文号为：兽药生字（2012）080012194。重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗由哈尔滨维科生物技术开发公司生产，其批准文号为：兽药生字（2014）080012228。鸡新城疫活疫苗（La Sota株）由哈药集团生物疫苗有限公司生产，其批准文号为：兽药生字（2011）080072007。

1.3检测方法

采用血凝抑制试验（HI）的方法监测H5N1禽流感及新城疫免疫抗体。

在试验过程中同时检测ND和禽流感H5N1二种抗体，分别选择一免后的7、14、21、28、35d进行抗体监测，获取ND和禽流感H5N1二种抗体消长规律。进行二免的选择二免后的10、20、30、45、60、80、100d进行监测，观察抗体变化情况，获取ND和禽流感H5N1二种抗体消长规律。进行三次免疫的选择三免后分别在10、20、35、50、70、90、110、125、140、150d进行免疫抗体监测，获取ND和禽流感H5N1二种抗体消长规律。

1.4应用试验时间

2015年2月27日～6月2日。

2　试验结果

每组每次采样监测20羽，检测的抗体滴度用log2表示。

3　小结

3.1通过应用试验，禽流感、新城疫重组二联活疫苗（rLH5-6）对鹌鹑的免疫效果不很理想，免疫抗体效价偏低，同时说明鹌鹑对禽流感病毒易感性不高。

3.2选择合理的免疫方式和合理加大免疫剂量，可以缩短免疫保护空白期，提高免疫抗体滴度和免疫合格率，延长免疫抗体的半衰期，进而可以实现延长免疫保护期的目的。

3.3在应用禽流感、新城疫重组二联活疫苗（rLH5-6株）对鹌鹑进行免疫的过程中，选择用禽流感灭活苗和新城疫弱毒苗进行加强免疫可以提高免疫效果。

3.4根据上述研究的结果，建议蛋用鹌鹑禽流感H5N1和新城疫的免疫，按照以下程序进行：19日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1羽份饮水，26日龄禽流感H5N1灭活疫苗0.3mL肌注，90日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗肌肉注射1羽。

肉用鹌鹑禽流感H5N1和新城疫的免疫，按照以下程序进行：7日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗1羽份滴鼻，24日龄禽流感、新城疫重组二联活疫苗2羽份饮水。

4　讨论

4.1关于首免日龄选择问题的探讨。农业部推荐禽流感H5N1灭活疫苗首免日龄是7～14日龄。国内禽流感H5N1灭活疫苗生产厂家推荐的免疫剂量是7～20日龄0.3mL/羽，21日龄以上是0.5mL/羽。在实际免疫过程中，雏鹌鹑注射灭活苗非常困难，推广难度大。根据试验已得的结果，本课题组认为肉用鹌鹑在7日龄、种鹌鹑和蛋鹌鹑在15～20日龄以后进行首免疫是比较好的选择。

4.2鹌鹑免疫抗滴度维持在多少范围内对鹌鹑的保护比较安全，这个问题需进行攻毒试验才能得出结论。

4.3种鹌鹑的免疫抗体滴与同一检测时间种蛋出雏的母源抗体之间的差距也是探讨内容之一。

第1组　免疫抗体检测结果

第2组　免疫抗体检测结果

第3组　免疫抗体检测结果

第4组　免疫抗体检测结果

第5组　免疫抗体检测结果

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2016．11.016