李 颖石 瑜袁雪涛丁 壮
(1.吉林大学动物医学学院,吉林长春 130000;
2.天津市动物疫病预防控制中心,天津 300402)
天津市种鸡场禽白血病的流行病学调查
李 颖1,2石 瑜2袁雪涛2丁 壮1*
(1.吉林大学动物医学学院,吉林长春130000;
2.天津市动物疫病预防控制中心,天津300402)
为了解天津地区种鸡场禽白血病(Avian Leukosis,AL)流行情况,在全市8个父母代种鸡场采集了血清样本2024份,泄殖腔棉拭子2030份,通过 ELISA 试剂盒进行了 ALV-J、ALV-AB抗体检测及 P27 抗原检测,检测结果显示,天津地区种鸡场禽白血病AB亚群抗体阳性率4.25%;禽白血病J亚群抗体阳性率11.12%。明显高于ALV-AB抗体阳性水平,P27抗原的阳性率10.74%,表明天津市种鸡场禽白血病感染普遍。
禽白血病流行病学调查ELISA
禽白血病(Avian Leukosis)是由禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus,ALV)引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称,该病能引起多种具有传染性的良性和恶性肿瘤。ALV主要诱发髓样细胞瘤、成红细胞瘤、骨硬化、淋巴细胞瘤、黏液纤维肉瘤、纤维肉瘤、血管瘤等多样类型的肿瘤。临床可见鸡生长缓慢、精神沉郁、贫血、食废、脱水、腹泻、血管瘤等,蛋鸡还可见产蛋率下降或产薄壳蛋、畸形蛋等,剖检可见肝、脾、肾、法氏囊肿大及其肿瘤等。1908年首次报道至今,该病在世界上许多国家流行和发生。近年来,禽白血病受到高度重视,成为关注的热点。禽白血病的病原学、流行病学、诊断技术、防治措施等方面的研究也不断取得了一些进展。
近年来在我国大部分地区禽白血病的发病率呈逐渐上升的趋势,并且感染情况越来越复杂,造成一些鸡场经济损失惨重。天津作为北方的经济中心,种禽业的健康发展不仅关系到市场供给、养殖场增收,也与公共卫生安全息息相关。为摸清天津市种鸡场禽白血病的感染状况,本次调查采集了天津8个种鸡场的血清和泄殖腔棉拭子样品,利用IDEXX公司的禽白血病病毒抗体检测试剂盒、禽白血病J亚群抗体检测试剂盒和禽白血病抗原检测试剂盒分别检测鸡血清中禽白血病病毒AB亚群、J亚群抗体和p27抗原检测。
1.1 检测样品
样品为2015年6月至2016年4月期间在天津5个区县的8个种鸡场分别采集的血清和泄殖腔棉拭子样品。种鸡场内鸡群随机采样,翅静脉或心脏采血,分离血清并4℃保存备用。棉拭子样品采样前在样品管中加入0.8mL样品保存液,无菌棉签采集鸡泄殖腔棉拭子,与稀释液混匀后冷冻。各类样品做好标记。采集的血清样品用于禽白血病抗体ELISA检测,棉拭子样品用于禽白血病抗原检测。结果详见表1。
表1 样品采集数量表
1.2 检测试剂与仪器
1.2.1 检测试剂
检测试剂盒均购自IDEXX公司:
禽白血病病毒抗体检测试剂盒:用于鸡血清中禽白血病病毒(ALV)A 和B亚群的抗体检测;
禽白血病J亚群抗体检测试剂盒:用于鸡血清中禽白血病病毒(ALV)J亚群的抗体检测;
禽白血病抗原检测试剂盒:用于泄殖腔棉拭子p27蛋白检测。
1.2.2 仪器
全自动酶免工作站(Freedom EVOlyzer,TECAN公司)自动分液器(combi,赛默飞世尔公司)
微量可调移液器(赛默飞世尔公司)
1.3 实验室检测方法
1.3.1 样品处理
泄殖腔棉拭子样品恢复至室温,让杂质沉淀下来。吸取上清,加到反应板中;血清样品在检测前用稀释液500倍稀释混匀后检测。
1.3.2 检测方法
酶免工作站按IDEXX公司检测试剂盒要求的试验过程设定工作程序。
2.1 天津市种鸡场禽白血病检测情况
在天津全市5个区县的8个种鸡场共检测血清样品2024份,泄殖腔棉拭子2030份。调查结果有75%(6/8)的种鸡场A/B亚群抗体阳性,有2个种鸡场未检测到AB亚群抗体;100%(8/8)的种鸡场J亚群抗体和p27抗原阳性。结果详见表2。
2.2 各种鸡场禽白血病AB及J亚群的感染情况
此次调查共采集血清样品2024份,禽白血病AB亚群抗体在各场之间感染水平存在差异,平均阳性率4.25%,8个种鸡场的最高的阳性率9.18%,最低的未检出。禽白血病J亚群抗体平均阳性率11.12%,8个种鸡场的最高的阳性率15.14%,最低的1.52%。
2.3 各种鸡场禽白血病p27抗原检测情况
此次调查共采集泄殖腔棉拭子样品2030份,禽白血病p27抗原在各场之间感染水平存在差异,平均阳性率10.74%,8个种鸡场的最高的阳性率17.19%,最低的3.50%。
(1)为摸清天津市种禽场禽白血病流行情况,本次调查利用IDEXX公司的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒。AB抗体检测用于检测鸡血清中禽白血病外源性病毒经典亚群(A亚群和B亚群)抗体的相对水平,J亚型抗体检测用于检测鸡血清中禽白血病J亚群的抗体水平。抗原检测是对ALV病毒群的衣壳蛋白p27进行检测,是高度保守的群特异性抗原,不同的亚型间无明显的区别。通过p27检测,可以了解ALV感染和排毒传播的情况。调查结果表明,ALV感染在天津地区种鸡场普遍存在。
表2 天津种鸡场禽白血病调查检测结果
(2)调查结果显示天津8个种鸡场禽白血病AB亚群抗体和J亚群抗体阳性率分别为4.25%和11.12%,AB亚群和J亚群的感染水平不同,依此判断天津地区禽白血病感染主要以J亚群为主。
(3)在调查的8个种鸡场中编号E1的种鸡场为肉种鸡场,该场未检出ALV-AB抗体,J亚群抗体和p27抗原阳性率是所有种鸡场中最低的,说明天津市肉种鸡场禽白血病感染情况好于蛋种鸡场。
李颖(1971-),女,天津市人,高级兽医师,主要从事动物疫病监测。
天津市农业科技成果转化与推广项目(201501020)
丁壮