新疆猪毛菜总黄酮含量测定及其抗氧化活性研究

热萨莱提·伊敏+热娜古丽·阿不都热合曼+木合塔尔·吐尔洪

【摘 要】 目的：以不同浓度的乙醇为溶剂提取猪毛菜中总黄酮，并考察提取物的抗氧化活性。方法：采用回流法提取猪毛菜中黄酮类化合物，用比色法测定不同浓度的乙醇提取物中总黄酮含量，测定各提取物的抗氧化活性。结果：猪毛菜中黄酮类化合物在25%、50%、75%的乙醇中黄酮提取率分别为24.7、50.6、48.7mg/g。各种提取物均有不同程度的抗氧化活性，且提取物的抗氧化活性与其浓度之间存在一定的量效关系，其中用50%乙醇提取的提取物清除各种自由基活性以及还原力均相对较高。结论：采用50%乙醇回流法提取的猪毛菜总黄酮含量最高，且黄酮类化合物具有较好的抗氧化活性，为猪毛菜野生资源利用和活性成分的开发提供一定的实验依据。

【关键词】 猪毛菜；总黄酮；抗氧化

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）12-0014-03

Abstract：With different concentrations of ethanol as extraction agent， the total flavonoid compounds in Salsola were extracted by refluxing method，and the content of total flavonoids in the ethanol extract with different concentration were determined by colorimetry，and the antioxidant activity were tested. The results showed that， the flavonoids in Salsola in 25%， 50%， 75% ethanol extraction rate were 24.7mg/g，50.6mg/g，48.7mg/g respectively. And 50% ethanol extracts exhibited the highest activity in removing DPPH free radicals hydroxyl free radicals and superoxide anion as well as the highest reducing capacity. Studying on extraction and antioxidant activity of total flavonoids of Salsola can improve the development of China′s wildlife resources and utilization of active ingredients.

Keywords：Salsola collina；total flavonoids；antioxidant activity

猪毛菜是藜科猪毛菜属植物猪毛菜（Salsola collina Pall）的全草，是一种维吾尔民间药用植物，其味淡，性凉，具有平肝潜阳、润肠通便之功效。主要治高血压病、头痛、眩晕、失眠、肠燥便秘等病症[1-2]。猪毛菜中含有生物碱、黄酮、糖类、有机酸、甾醇等多种成分。黄酮类化合物属于植物次级代谢产物，广泛存在于自然界各种植物中，具有清除自由基的生物活性[3]以及抗癌﹑防癌﹑消炎﹑清热解毒﹑镇静﹑利尿等作用[4]，作为安全、无毒的天然产物，黄酮类化合物在医学、食品行业、美容保健等领域已备受关注并且已经开始应用[5]。研究分别用25%，50%、75%的乙醇回流提取猪毛菜中的活性物质，采用紫外分光光度法对各提取物中黄酮进行了定性和定量分析，采用常用的几种体外抗氧化体系对不同浓度乙醇提取物的抗氧化活性进行测定分析，为猪毛菜野生资源利用及活性成分的开发提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 TU-1990 双光束紫外分光光度计（北京普析通用有限公司）；TA1004N电子天平；HWS24型电热恒温水浴锅（上海恒科技有限公司）、SHZ-3水循环真空泵；RE5298A旋转蒸发器；ZK-82B型真空干燥箱（上海市实验仪器总厂）；SHA-C水浴恒温振荡器（江苏金坛亿通电子有限公司）；80-1型沉淀离心器（上海手术器械厂）。

1.2 材料 芦丁对照品（批号：0080-9705，中国药品生物制品检定所）；猪毛菜2014年7月采集于新疆疏附县铁日木乡，晾干，粉粹，过40目筛备用。所用试剂均为分析纯。

2 方法

2.1 提取物的制备 称取25g猪毛菜粉末分别加入25%、50%、75%乙醇500ml，回流提取2h，抽滤，滤渣再分别加入25%、50%、75%乙醇375ml，混匀，再次回流提取1.5h，抽滤，滤渣第三次分别加入三种浓度乙醇250ml，混匀，再次回流提取1h，抽滤，合并三次滤液，65℃减压蒸干，备用。

2.2 总黄酮含量测定 分别取不同提取液供试品1.00ml置25ml容量瓶中，稀释成合适浓度，采用硝酸铝比色法[6]测定，以芦丁为标准品，在510nm波长处测定A值。得回归方程Y=7.3961X+0.0376 （R2=0.9993）。再计算原材料猪毛菜中总黄酮含量，结果见表1。

2.3 不同提取液抗氧化活性比较 准确称取0.1000g对照品Vc，溶于100ml 50%乙醇中，配制成浓度为1.000mg/ml溶液，并稀释成0.1、0.3、0.5、0.7、0.9mg/ml。再准确称取猪毛菜25%、50%、75%乙醇提取物浸膏0.8000、0.6000、0.6000g，用50%乙醇定容至100ml，分别配置出1.0332、1.3062、1.2105mg/ml的溶液，分别稀释为0.1、0.3、0.5、0.7、0.9mg/ml猪毛菜供试品溶液，供抗氧化活性测定用。