骆驼刺胶囊制备工艺与质量控制研究△

徐晓琴，夏提古丽·阿不利孜，马晓玲，魏鸿雁*，贾晓光，胡志林

(1.新疆维吾尔自治区中药民族药研究所，新疆 乌鲁木齐 830002； 2.新疆华世丹药业有限公司，新疆 乌鲁木齐 830011)

·中药工业·

骆驼刺胶囊制备工艺与质量控制研究△

徐晓琴1，夏提古丽·阿不利孜1，马晓玲1，魏鸿雁1*，贾晓光1，胡志林2

(1.新疆维吾尔自治区中药民族药研究所，新疆 乌鲁木齐 830002； 2.新疆华世丹药业有限公司，新疆 乌鲁木齐 830011)

目的：优选骆驼刺胶囊的制备工艺并建立其质量控制方法。方法：以颗粒的成型率和吸湿率的综合评分为指标，采用正交试验设计优选骆驼刺胶囊制备工艺条件，并对其进行质量评价。结果：优选出的工艺条件为骆驼刺浸膏粉与混合辅料(淀粉∶糊精=1∶2)按1∶3比例混匀，以浓度为70%(v/v)的乙醇制粒，用量为总质量的12%。验证试验表明，优化工艺所制备胶囊内容物的成型率为78.47%，水分、崩解时限、微生物限度符合中华人民共和国药典规定。结论：该制备工艺操作简便，稳定合理，建立的质量控制方法可行。

骆驼刺；胶囊剂；制备工艺；质量控制

骆驼刺Alhagipseudalhagi(M.B.)Desv为骆驼刺属多年生豆科植物，耐干旱、耐盐碱，具有很强的再生性和生态适应性，是干旱沙漠地区特有的植物资源[1-2]。它不仅是固沙植物、优质牧草、改良盐碱土壤的先锋植物，还是维吾尔医民间常用药材。骆驼刺植物各部位分别具有不同的药用价值，全草具有清热解毒的作用，用于感冒发烧、胃腹湿热、肠炎痢疾，刺糖收敛消炎、滋补强壮，主要用于腹痛泄泻、肠炎痢疾、体虚头晕等[3]。前期课题组以药效活性跟踪对骆驼刺提取物不同极性部位进行化学成分分离解析。结果发现，骆驼刺含有大量黄酮类成分[5-6]，并且药理学实验发现，此提取物对豚鼠离体肠管收缩运动有显著的抑制作用，对肠炎的治疗有一定影响[8]。因此，课题组选择黄酮类组分含量较高的吐鲁番地区的骆驼刺[9]为药材来源，在前期研究的基础上将其研发成胶囊剂，以方便临床用药及优势资源的高效利用。

1 仪器与材料

1.1 仪器

电子分析天平(Metter AE163，瑞士梅特勒-托利多公司)；电热鼓风干燥箱烘箱(DHG9140B，上海安亭科学仪器有限公司)；紫外可见分光光度计(BeckmanDU-7，美国贝克曼库尔特有限公司)；旋转蒸发仪(EYELA OSB-2100，上海爱朗仪器有限公司)；优普超纯水仪(UPT-I-5T，成都纯化科技有限公司)；高速中药粉碎机(DFT-50，浙江温岭市林大机械有限公司)；三用紫外仪(ZF-2型，上海安亭电子仪器厂)。

1.2 材料

实验所用骆驼刺药材采集于新疆吐鲁番地区鄯善县，经新疆维吾尔自治区中药民族药研究所药材室鉴定，符合《维吾尔药志》标准；芦丁(C27H30O16，中国食品药品检定研究院，批号：100080-200707)；薄层层析硅胶G(AR，青岛海洋化工有限公司)；羧甲基纤维素钠(AR，天津市恒兴化学试剂有限公司)；无水乙醇、石油醚、氢氧化钠、亚硝酸钠和硝酸铝均为分析纯；大孔吸附树脂(HPD100，天津市光复精细化工研究所)；淀粉(陕西奥克药用辅料有限公司)；糊精(安徽山河药用辅料股份有限公司)；硬脂酸镁(浙江湖州展望药业有限公司)。

2 方法与结果

2.1 骆驼刺胶囊工艺的优选

2.1.1 工艺优选指标 成型率测定及其评分：称取适量的样品颗粒(W1)，依次过20目、60目筛，称定通过20目筛而不能通过60目筛的颗粒重量(W2)，据(1)式计算成型率。以成型率100%为50分，据(2)式计算成型率评分。

(1)

(2)

(3)

(4)

2.1.2 正交试验优选工艺 根据单因素试验结果确定影响胶囊内容物质量的因素：浸膏粉与辅料的比例(A)、乙醇浓度(B)、乙醇用量(C)，以胶囊内容物成型率与吸湿率分值总和为评价指标，采用L9(34)正交表安排试验[10]，试验设计及结果见表1，直观分析见表2，方差分析见表3。

表1 正交试验因素水平表

表2 L9(34)正交试验设计与结果(n=9)

表3 以总分为指标方差分析结果

注：F0.05(2，2)=19.00；F0.01(2，2)=99.00。

从表2直观分析可知，各因素对综合评分的影响顺序为C>B>A，优选的工艺条件为A1B1C3。乙醇用量是影响制粒工艺的主要因素，且方差分析结果表明,C对总评分差异有统计学意义(P<0.05)，A、B对总分差异无统计学意义。结合直观分析与方差分析结果,初步确定优选工艺条件为A1B1C3，即浸膏粉与混合辅料比例为1∶2，乙醇浓度为65%，用量为物料总质量的12%。结合实际大生产中制软材的难易度及其性状，将浸膏粉与混合辅料的比例调整为1∶3，乙醇浓度为70%较为合适，因此最终的工艺确定为骆驼刺浸膏粉与混合辅料(淀粉∶糊精=1∶2)按1∶3比例混匀，乙醇浓度为70%，用量为物料重量的12%进行制粒。

2.1.3 验证试验 取骆驼刺提取物适量，按优选工艺进行验证，3批胶囊内容物的平均成型率为78.47%，RSD为0.15%；平均吸湿率为11.16%，RSD值为0.59%。说明优选的工艺条件稳定、合理可行。

2.2 骆驼刺胶囊质量控制研究

2.2.1 处方与制备方法 处方：骆驼刺浸膏粉100 mg。

制备方法：取骆驼刺药材适量，粉碎过8号筛，用45%的乙醇(料液比为1∶15)80 ℃回流提取2次，每次3 h，合并提取液，室温过滤，滤液浓缩至每毫升含生药0.1～0.5 g。取上述浓缩液4 BV经HPD100大孔吸附树脂柱进行纯化，上样流速2 BV·h-1(1 BV=130～150 L)，上样后静置30 min，用5 BV纯化水洗脱，再用6 BV 95%乙醇洗脱，接收乙醇洗脱液，减压干燥(0.08 MPa、60 ℃、4 h)，粉碎即得骆驼刺提取物。称取骆驼刺提取物适量，与混合辅料(淀粉∶糊精=1∶2)按1∶3混匀，以70%乙醇作为润湿剂制粒，60 ℃以下干燥，过筛，加0.2%硬脂酸镁混匀，灌装胶囊，制成1000粒。

2.2.2 质量控制 性状：本品为硬胶囊，内容物为棕黄色的颗粒和粉末，味咸涩。

薄层色谱鉴别[4]：取本品粉末0.3 g，加40%的乙醇10 mL，密塞，超声处理5.0 min，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取骆驼刺原药材0.4 g、骆驼刺提取物0.1 g同法制备；取芦丁对照品，加甲醇制成质量浓度为0.2 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)为展开剂展开，取出晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外灯(365 nm)下检视。结果显示，供试品与对照品在相应的色谱位置上显相同的黄色荧光斑点，见图1。

注：1～3.3批胶囊内容物；4.骆驼刺药材；5.骆驼刺提取物；6.芦丁对照品。图1 骆驼刺胶囊剂内容物TLC色谱图

检查[4]：按《中华人民共和国药典》2015年版一部胶囊剂项下有关规定进行检测，3批胶囊内容物水分含量、装量差异、崩解时限、微生物限量检查结果均符合规定。

总黄酮的含量测定：1)对照品溶液的制备，精密称取干燥至恒重的芦丁对照品适量，置50 mL容量瓶中，用60%乙醇溶解并定容，得到质量浓度为0.1 mg·mL-1的芦丁对照品溶液。2)标准曲线的绘制，分别精密量取对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL，置于25 mL容量瓶中，加60%乙醇溶液至10 mL，依次加入1 mL 5%亚硝酸钠溶液，摇匀，放置6 min后，再加入1 mL 10%硝酸铝溶液，摇匀，放置6 min后，再加入4%氢氧化钠溶液4 mL，再加60%乙醇，定容，摇匀，放置15 min后在510 nm处测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标，芦丁浓度(mg·mL-1)为横坐标，制作标准曲线。得到回归方程Y= 12.502X-0.006 2(r=0.999 3)，结果芦丁在0.004 8～0.058 mg·mL-1呈良好的线形关系。3)供试品溶液的制备及测定，准确称取骆驼刺胶囊内容物0.5 g，用60%浓度的乙醇溶解，并定容至25 mL，再精密吸取1 mL，用60%乙醇稀释至50 mL容量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自加“60%乙醇溶液至10 mL”起，依法测定吸光度值，计算总黄酮的含量。总黄酮含量(%)=C×V×D/W×100%[式中C为总黄酮显色稀释后的浓度(mg·mL-1)，V为稀释后的体积，D为样品的稀释倍数，W为样品的质量]。4)样品测定，取三批骆驼刺胶囊，按供试品制备方法制备供试品，并测定总黄酮的含量，结果见表4。

表4 骆驼刺胶囊中总黄酮含量测定结果(n=3)

3 讨论

课题组前期针对骆驼刺药材的化学成分及抗炎、抑菌等药理活性进行了系统的研究，研究结果发现，骆驼刺药材含黄酮类、生物碱类、脂肪族类、甾醇类、氨基酸类、多糖类等多种化学成分[5-6]。而药理学实验表明，骆驼刺提取物对豚鼠离体肠管收缩运动有显著的抑制作用，提示骆驼刺药材对肠炎痢疾等症的治疗有一定影响。因此，课题组在前期研究的基础上，采用乙醇提取、大孔树脂柱精制技术对骆驼刺药材中总黄酮物质群进行富集制备，将其开发成胶囊剂以满足维吾尔医临床需求。

骆驼刺药材中黄酮成分主要有芦丁、槲皮素、山柰酚等。本实验选取芦丁为对照品，对该制剂进行TLC定性鉴别及UV定量检测[11]，结果显示，所建立的定性鉴别方法斑点清晰、无阴性干扰、专属性强；以芦丁为对照品的UV法进行总黄酮含量的测定，可以有效控制制剂的质量。

[1] 李君山，刘勇民，蔡少青.维吾尔医用骆驼刺类药材的资源、商品流通及民间应用研究[J].中国民族医药杂志，1996，2(2)：39.

[2] 刘瑛心.中国沙漠植物志[M].北京：科学出版社，1985.

[3] 刘勇民.维吾尔药志：上册[M].新疆：科技卫生出版社，1999.

[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].北京：中国医药科技出版社，2015.

[5] 艾来提·苏力坦，迪丽努尔·塔力甫，阿布力米提·阿布卡德尔，等.新疆骆驼刺(Alhagipseudoalhagi)黄酮类化合物的研究[J].天然产物研究与开发，2005，17(5)：1-2.

[6] 张贵杰，李宁，熊元君，等.骆驼刺地上部分化学成分的分离与鉴定[J].中国现代中药，2010，12(5)：16-18.

[7] 熊元君，贾晓光，等.维吾尔药骆驼刺提取物的抑菌试验研究[J].新疆中医药，2009，27(6)：29-31.

[8] 贾晓光，张雪梅，熊元君，等.维药骆驼刺提取物药理活性研究[J].新疆中医药，2009，27(5)：18-20.

[9] 石磊岭，魏鸿雁，徐晓琴，等.新疆不同产地骆驼刺中总黄酮的含量比较[J].新疆医科大学学报，2014，37(1)：51-53.

[10] 张亚辉，顾政一，邢建国，等.蒿蓝无糖感冒颗粒成型工艺研究[J].时珍国医国药，2010，21(10)：561-563.

[11] 徐晓琴，魏鸿雁，石磊岭，等.维药骆驼刺质量标准研究[J].现代中药研究与实践，2012，26(6)：68-71.

PreparationProcessandQualityControlofAlhagiCapsule

XU Xiaoqin1，Xiatiguli·A BUlIZI1，MA Xiaoling1，WEI Hongyan1*，JIA Xiaoguang1，HU Zhilin2

(1.XinJiangInstituteofChineseTraditionalMedicaandEthicalMateriaMedica，Urumqi830002，China；2.XinJiangHuaShiDanPharmaceuticalCompany，Urumqi830011，China)

Objective：To optimize Alhagi capsule preparation process and establish its quality control method.Methods：The comprehensive score of particles forming rate and moisture absorption rate were selected as indexes，the preparation process conditions of Alhagi capsule were optimized using orthogonal test design，and its quality was evaluated.Results：The optimized the process conditions were as follows：the mixed ratio of Alhagi extract powder and mixed materials (starch，dextrin = 1：2) was 1：3，the dosage of 70% ethanol was 12% and.The verification test showed that the particle forming rate was 78.47%.The moisture，disintegration time limit，microbial limit conformed to the requirements of the Chinese pharmacopoeia.Conclusion：The preparation technology is simple，stable and reasonable，the quality control method is feasible.

Alhagi pseudoalhagi；capsule；preparation process；quality control

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.10.020

2016-01-15)

2015兵团科技计划社会发展科技攻关与成果转化计划(2015AD005)

*

魏鸿雁，研究员，研究方向：中药质量控制与药效机制；Tel：(0991)2662160，E-mail：whywlmq@sina.com