代龙文,胡义强,陈英,胡昌森
(九江市庐山区人民医院,江西 九江332005)
·检验与临床·
中性粒细胞CD64在慢性前列腺炎诊断中的临床研究
代龙文,胡义强,陈英,胡昌森
(九江市庐山区人民医院,江西 九江332005)
目的 研究中性粒细胞CD64在慢性前列腺炎诊断中的临床价值。方法 选取76例患者作为疾病组,另取健康体检者58例为对照组,流式细胞术检测前列腺液中中性粒细胞CD64表达水平,同时使用PCR检测沙眼衣原体(CT)和解脲脲原体(UU),并行前列腺液培养及显微镜镜检。结果 细菌性感染标本中的中性粒细胞CD64表达水平均比正常组显著升高,感染细菌中以模仿葡萄球菌和耳葡萄球菌阳性标本CD64表达水平最高,差异有统计学意义 (P<0.05)。结论 中性粒细胞CD64表达水平可作为慢性前列腺炎细菌感染的诊断及判断病情的高效及时检测指标,优于细菌培养;常规PCR仅可用于诊断CT及UU型慢性前列腺炎,对细菌型慢性前列腺炎无诊断价值。
CD64;慢性前列腺炎;中性粒细胞;流式细胞术
慢性前列腺炎是男性最常见的泌尿生殖系统疾病,困扰着全世界25%~50%的成年男性[1,2]。慢性细菌性前列腺炎主要为病原体感染,以逆行感染为主,病原体主要为葡萄球菌属,其次为大肠埃希菌、棒状杆菌属及肠球菌属等,常有反复的尿路感染发作病史或前列腺按摩液中持续有致病菌存在[3,4]。临床表现有反复发作的下尿路感染症状,如尿频、尿急、尿痛、排尿烧灼感等,持续时间超过3个月。其实验室检查主要有前列腺按摩液常规检查、尿常规分析及尿沉渣检查、细菌学检查和其他病原体包括沙眼衣原体(CT)和解脲脲原体(UU)等检查[5]。但目前慢性前列腺炎临床诊断仍较为困难[6],而及时快速诊断和准确用药是治疗慢性前列腺炎成功的关键。本研究目的在于探究中性粒细胞CD64对于慢性前列腺炎的临床诊断价值,从而为临床及时诊断提供依据。
1.1一般资料选取对象为2015年2月至2016 年1月间我院泌尿外科确诊为慢性前列腺炎患者76例,平均46.26±11.19岁;另选取本院健康体检者58例,均行前列腺按摩检查排除前列腺炎症。
1.2仪器与试剂 Beckman Coulter FC-500流式细胞仪及配套试剂由美国Beckman Coulter公司提供;PCR全自动基因扩增仪由达安基因公司提供;Combas 601化学发光仪由罗氏公司提供;PhoenixTM-100全自动细菌鉴定/药敏系统及配套试剂由美国BD公司提供。
1.3方法前列腺液标本采用“二杯法”留取,并由加盖的无菌管收集,及时送检。
1.3.1前列腺液培养依据全国检验标准化操作规程,取采集的前列腺液进行接种培养,24h后观察菌落并进行鉴定。
1.3.2前列腺液CD64检测取两支流式专用试管每支试管分别加入CD64-FITC和同型对照10μl,再分别加入50μl前列腺液,混匀避光保存15min后,加红细胞裂解液500μl,避光10min,洗涤,加入500μl PBS,静置10min后置于流式细胞仪,检测并计算出中性粒细胞CD64表达水平。
1.4CT、UU检测采用PCR方法,按说明书进行检测。
1.5统计学方法使用SPSS 18.0统计软件,计量资料中呈正态分布则以均数±标准差(±s)表示,非正态分布资料以中位数表示,先行正态分布性检验,正态分布资料两组间比较用t检验;非正态分布资料两组间比较用U检验;非参数检验采用卡方检验,以P<0.05差异有统计学意义。
2.1标本病原体结果分布情况76例标本中检出细菌性感染 62例,占 81.57%;UU 10例,占13.16%;CT 4例,占5.26%。细菌感染主要以表皮葡萄球菌、粪肠球菌、模仿葡萄球菌为主,对照组标本细菌培养均为阴性,见表1。
2.2慢性前列腺炎患者前列腺液中性粒细胞CD64表达情况分析细菌性感染者,发现中性粒细胞CD64表达量与正常对照之间的差异显著,有统计学意义 (t=5.169,P<0.01),而CT和UU感染者CD64表达量与对照组之间无明显差异,无统计学意义。此外研究还发现模仿葡萄球菌和耳葡萄球菌感染患者中性粒细胞CD64表达水平最高,其次为溶血葡萄球菌、粪肠球菌,最低为表皮葡萄球菌和人葡萄球菌人型亚种,见表2。
表1 前列腺液中病原体培养及PCR结果
表2 两组中性粒细胞CD64表达水平(个/细胞±s)比较
表2 两组中性粒细胞CD64表达水平(个/细胞±s)比较
组别感染组病原菌 CD64表达水平模仿葡萄球菌溶血葡萄球菌华纳葡萄球菌表皮葡萄球菌粪肠球菌耳葡萄球菌人葡萄球菌人型亚种人葡萄球菌头部葡萄球菌解脲种木糖葡萄球菌沙眼衣原体解脲脲原体对照组3923.25±452.2 1896.32±325.35 1965.54±236.65 1236.35±256.66 1736.55±235.55 3865.2±125.63 1263.35±224.32 1102.12±12.360 1203.21 1232.25±16.32 896.21±136.54 906.24±122.23 856.35±128.62
前列腺炎是泌尿科的常见疾病,同时也是前列腺增生、前列腺癌等疾病诱发因素,其临床症状多变时间久,病程复杂。临床上往往较难诊断,进而耽误治疗时间,导致病情进一步恶化。因此,及时诊断成为治疗成功的关键[7]。以往我们通过镜检及细菌培养等方式来进行判断,而这些方法都不是诊断其的“金指标”,这些方法存在人为因素较大、时间较长等不利因素,由此寻找一种快速、准确、可行的方法显得尤为重要[8]。
CD64是跨膜糖蛋白,属免疫球蛋白超家族成员,可通过抗体依赖性细胞毒作用、细胞吞噬作用和免疫复合物清除作用实现对病原微生物的清除[9,10]。正常情况下,CD64主要分布于巨噬细胞、单核细胞及树突状细胞等抗原递呈细胞(APC)表面,中性粒细胞表面CD64呈低水平表达,甚至几乎不表达,且表达无性别差异[11,12]。当机体感染或内毒素入侵时大量致炎细胞因子释放,中性粒细胞激活,CD64在干扰素和中性粒细胞集落刺激因子刺激下大量表达[13,14]。一般情况下,机体感染或内毒素入侵时CD64在刺激后4~6h即可升高[15]。中性粒细胞CD64检测的标本通常为外周血标本,而本研究选用前列腺液作为检测对象,利用流式细胞仪分析CD64的表达水平与细菌培养及PCR检测结果相比较。分析发现细菌性感染标本中的中性粒细胞CD64表达水平,均比正常组显著升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。76例标本其中检出细菌性感染62例占81.57%、UU 10例占13.16%、CT4例占5.26%。主要以表皮葡萄球菌、粪肠球菌、模仿葡萄球菌为主,感染细菌中以模仿葡萄球菌和耳葡萄球菌阳性标本CD64表达水平最高,这与Qian L等[16]文献报道的CD64表达水平一致。CT、UU检测阳性的标本CD64表达水平与对照组无明显差异,无统计学意义。由此可知,中性粒细胞CD64表达水平与细菌感染有相关性,慢性前列腺炎患者中性粒细胞CD64表达水平的高低,能够及时有效的提示细菌感染。能够作为判断慢性前列腺炎患者细菌感染的辅助指标,但由于研究条件所限,收集病例不多,目前还不了解感染的严重程度与CD64表达水平高低的关系,还需进一步研究。
综上所述,定量检测患者前列腺液中的中性粒细胞CD64表达水平,可作为慢性前列腺炎细菌感染的及时诊断及治疗的可靠检测指标,优于常规细菌培养等检查。
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R697.33,R446.62
A
1674-1129(2016)04-0485-03
10.3969/j.issn.1674-1129.2016.04.023
江西省九江市科技支撑计划项目,编号:20154416
(2016-03-09;
2016-04-26)