CS5100全自动凝血分析仪性能验证

张敏，吕洁，吴乾波

（1、浙江省立同德医院检验科，浙江 杭州310012；2、中国人民解放军第一一七医院检验科，浙江 杭州310004；3、浙江省血液中心献服二科，浙江 杭州310005）

CS5100全自动凝血分析仪性能验证

张敏1，吕洁2，吴乾波3

（1、浙江省立同德医院检验科，浙江 杭州310012；2、中国人民解放军第一一七医院检验科，浙江 杭州310004；3、浙江省血液中心献服二科，浙江 杭州310005）

目的 验证Sysmex CS5100全自动凝血仪的系统性能，确定该检测系统是否稳定、准确、可靠。方法 从变异系数（CV）、准确度、检测限、线性范围、携带污染率、干扰试验等方面对Sysmex CS5100系统性能进行验证。结果 验证精密度最大CV为8.6%；验证准确度最大偏倚为7.12%；Fg线性验证实验结果显示Fg线性范围为1.032～5.878，相关系数为r为0.9999；携带污染率最大值为-2.49%；血红蛋白小于或等于4.83g/L；甘油三酯小于或等于5.64mmol/L；总胆红素小于或等于322μmol/L时，偏离值小于或等于10%，验证全部通过。结论 Sysmex CS5100凝血分析仪检测精密度好，准确度高，检测范围宽，携带污染率低，抗干扰能力强，能够较好的满足实验室对于凝血功能检测的需求。

性能验证；Sysmex CS5100；检测系统

凝血功能测试通常包括PT、APTT、TT、Fg和D-二聚体等项目，根据这些检测项目，医生可以判断病人凝血、出血状况，继而再根据病人病情进展来决定下一步诊治方案，例如对于创伤性大出血病人进行大量输血时，医生需要及时监测患者凝血功能，来科学配比血浆与浓缩红细胞［1］，所以凝血检查对于医生的诊治有着重要指导意义。随着科技水平的不断提高，医院检验科越来越多的检测项目都可以通过自动化的设备来完成，自动化设备有着检测快速、结果稳定、标本用量少等许多优点，但是，由于检测设备属于一个检测系统，可能存在着一定的系统误差，所以ISO15189《医学实验室质量和能力的认可准则》对于临床实验室仪器性能评估做出了明确要求：仪器安装后或每次维修后，必须对仪器的技术性能进行评估。Sysmex CS5100凝血分析仪是一部集凝固法、发色底物法和免疫法于一体，采用透射光加百分比测定原理的全自动凝血仪。为保证检验质量，我们对该仪器进行了系统评价，包括变异系数（CV）、准确度、线性范围、携带污染率、干扰试验等指标。现报告如下。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂Sysmex CS5100全自动凝血仪。CS5100全自动凝血仪使用厂家配套试剂及质控品：包括PT试剂（批号546833），APTT试剂（批号557161A），TT试剂 （批号44695），Fg试剂 （批号547225），质控品（批号528155，548248E）；高浓度样本及低浓度样本均来自解放军第一一七医院，按需由健康体检标本与患者标本制备而成；干扰物：用血常规管采集静脉血3ml，1500r/min离心5min，弃去上层血浆，留下红细胞层，加入蒸馏水后充分混匀，待红细胞完全破坏后上机测血红蛋白浓度，待用；收集临床上乳糜血清3ml，上机测量甘油三酯，放干净容器内，充分混匀密封后放置于-80℃冰箱保存待用；收集临床上黄疸血清3ml，上机测量总胆红素，放干净容器内，充分混匀密封后放置于-80℃冰箱保存待用［2］。

1.2方法

1.2.1精密度验证⑴批内精密度：根据CLSI EP15-A文件［3］，取2个水平的标本，同一批次尽可能短时间内连续重复测定20次，记录每次PT、APTT、TT和Fg测定结果，计算CV和SD（要求CV值低于厂商规定）。⑵批间精密度：参照CLSI EP5-A文件［4，5］，选取正常（Control-1）、异常（Control-2）质控品。每日每批次测2遍，早晚各1遍，连续5d，记录每次PT、APTT、TT和Fg测定结果，计算CV 和SD（要求CV值低于厂商规定）。

1.2.2准确度验证取2个水平质控品进行测定，记录PT、APTT、TT和Fg结果，每个标本测3次，与参考值进行比较，计算偏倚。

1.2.3FIB可报告范围验证选取一份Fg浓度接近预期上限的高浓度血浆（H），用仪器自带的缓冲液按照如下比例进行稀释：1：0（0倍）、1：1（2倍）、1：3（4倍）、1：7（8倍）、1：15（16倍）、1：31（32倍），每个浓度测3次，将均值与理论值进行比较得出R，R在0.8到1.2之间的最大稀释度为Fg可报告范围。

1.2.4Fg线性验证选取一份接近预期上限的高浓度血浆样本（H），分别按100%、80%、60%、40%、20%的比例稀释，每个浓度测3次，计算均值，求得回归方程Y=aX+b，验证线性范围。

1.2.5携带污染验证使用制备的PT、APTT、TT、Fg高值和低值血浆，按以下方法验证：⑴高值样本污染：将低值样本（N）置1和3位置，高值样本（A）置于2位置，每个样本测3次，记录结果：N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6。计算：k1=［N4-均值（N1，N2，N3）］/均值（N1，N2，N3）；⑵低值样本污染：将高值样本（A）置1和3位置，低值样本（N）置于2位置，每个样本测3次，记录结果：A1、A2、A3、N1、N2、N3、A4、A5、A6。计算：k2=［A4-均值（A1，A2，A3）］/均值（A1，A2，A3），测定结果应符合厂家要求（≤10%）［6］。

1.2.6干扰试验验证在正常混合血浆中加入干扰物（血红蛋白、胆红素、甘油三酯），分别测定PT、APTT、Fg、TT，每个样本测2次计算均值，以原混合血浆为对照，并计算偏离值，得出偏离值控制在10%以内的最大干扰物浓度。

1.3统计学处理采用Office 2010及SPSS 19.0统计软件。

2　结果

2.1精密度验证批内、批间验证结果见表1，CV值均低于10%，验证通过。

2.2准确度验证结果在质控品标识可控范围内，见表2。

表1　精密度验证结果

表2　准确度验证结果

2.3可报告范围将标本按2、4、6、8、16倍稀释，每个浓度测定3次得均值，再用均值除以理论值得R值，求R在0.8～1.2之间的最大稀释倍数，再用最大稀释倍数乘以高浓度样品值得到的最高值即为最大可报告范围［7］。

2.4线性验证各浓度的Fg测定值和标准值之间具有良好的线性关系，r值为0.9999，＞0.975，a值为0.9989，在所要求的1±0.05范围内，线性范围1.032～5.878g/L，见图1。

2.5携带污染验证高值样本对低值样本的污染和低值样本对高值样本的污染的携带污染率均在±10%范围内，验证通过，结果见表4。

图1　线性验证

2.6干扰试验验证当干扰物在以下浓度：血红蛋白小于或等于4.83g/L；甘油三酯小于或等于5.64 mmol/L；总胆红素小于或等于322μmol/L时，偏离值小于或等于10%，验证通过。

3　讨论

随着检验医学的发展和对质量要求的提高，人们开始认识和关注检测系统的重要性，并且市场上充斥着各种各样品牌的设备，使得用户对于不同种类设备性能无法完全了解，所以，国内出现越来越多关于凝血仪性能评价的报道［8-11］。SysmexCS5100全自动凝血仪无疑有着优秀的检测能力，相比其前几代产品，其检测速度、多项目综合处理能力不断提高，可监测样本溶血、黄疸及乳糜情况，自动调整波长，具备自动再检、自动连锁筛选及凝血因子抑制物分析等功能。然而，在投入使用前，由于是新使用的检测系统，尽管仪器厂商在装机时已经提供了仪器性能的初步参数，但因为各实验室之间存在各种差异，在使用前必须对仪器重新进行性能评价。这是保证检验质量的一个重要措施，也是进行实验室认可的要求。

表3　不同稀释度样品Fg结果

表4　携带污染验证结果（%）

在我们的验证实验中，Sysmex CS5100检测系统在检测PT、APTT、TT和Fg时，批内不精密度≤5%，批间不精密度≤10%，均小于厂家参数，可以认为该系统具有较好稳定性，检测重复性良好；使用两个固定值质控检测准确度，将3次检测求得的平均结果与靶值相比，Fg在两个水平质控物测定中，偏倚均在±5%以内，PT、APTT、TT偏倚均在± 10%内，可以认为系统准确性高；Fg可报告范围验证中，将标本稀释16倍时为Fg检测限，我们得出其检测限为0.3g/L；Fg浓度在1.032～5.878g/L范围内时，期望值与测定值差异极小，线性关系良好，能够满足大部分标本的检测范围；另外，干扰实验反映了该系统对于血红蛋白、胆红素、甘油三酯的抗干扰能力较强，反映出仪器确实能够自动监测异常样本，通过自动调整波长的方式降低了样本要求，这不仅较好的保证了实验结果准确性，也减少了我们工作人员重新采样的次数。

所以，通过我们的性能验证，可以认为Sysmex CS5100全自动凝血仪不仅达到了临床检验需求，也符合标准化实验室的质量管理要求。当然，另一方面来说，操作人员的因素对于仪器运行状态也有着较大影响，我们在平时的检测过程中应注意：样本是否达到要求，严重溶血、黄疸、脂血对于结果会产生较大影响；采集是否足量，抗凝剂的稀释作用会造成PT、APTT结果异常；必须保证所有标本尽快离心、检测，使结果更可信；与临床医生保持沟通，提醒其知晓部分药物对结果造成的干扰；严格按照操作规程进行操作，每日进行室内质控，定期参加室间质评，定期进行校正、保养及维护［12］，这样才可以保证检测结果准确可靠。

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R446.11+1

A

1674-1129（2016）04-0482-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.04.022

吴乾波，E-mail：dick2349@sina.com

（2016-02-24；

2016-04-28）