免疫组化技术在病理诊断中的应用

杨勇（贵州省都匀市黔南州人民医院，贵州都匀558000）

免疫组化技术在病理诊断中的应用

杨勇
（贵州省都匀市黔南州人民医院，贵州都匀558000）

目的探讨免疫组化技术在疾病检测和诊断中的应用。方法选取2013年7月至2014年9月间我院收治的发生胸腔积液患者，共计74例。患者入院后据给予对症治疗的同时，采用病理石蜡切片免疫组化技术进行诊断检测，对比各自临床效果。结果转移性癌和浆膜腔原发性间皮性肿瘤。本次研究结果如表1所示。检测成功例数72例，成功率为97.3%。其中转移性癌症患者47例，原发性癌症患者25例，2例患者检测失败，待进一步进行诊断。对比两种癌症比例发现，该技术对于转移性癌检测效果更好，差异具有显著性，P＜0.01。结论本次研究探讨免疫组化在疾病研究中的应用，有效提升临床检测和诊断情况，为临床的治疗提供了理论参考，值得临床广泛推广和应用。

病理石蜡切片；免疫组化；胸腔积液；临床效果

自上世纪80年代初，免疫组化技术作为一种较为高效的鉴别技术，在各类疾病诊断中已广泛应用，随着各项技术的不断发展和成熟，目前免疫组化技术在疾病病理诊断中的应用也愈发广泛［1］。本次研究针对我院收治的胸腔积液患者，为区别转移性癌和浆膜腔原发性间皮性肿瘤，采用病理石蜡切片免疫组化方法进行诊断，说明临床应用效果，对免疫组化在疾病病理的诊断和临床治疗中的作用进行比较和分析。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取2013年7月至2014年9月间我院收治的发生胸腔积液患者，共计74例。其中男性患者42例，女性患者32例，年龄范围为16～70岁，平均年龄为（39.0±7.1）岁；病程范围为6个月至7年，平均病程为（4.0±2.2）年；上述患者入院后据给予对症治疗的同时，采用病理石蜡切片免疫组化技术进行诊断检测，对比各自临床效果。本次研究选取患者在性别、年龄、病程、受教育程度、遗传病史等方面均无显著性差异，P＞0.05，不具有统计学意义。本次研究所有患者均符合临床关于胸腔积液相关诊断要求和标准，符合本次研究需要［2］；排除患有心脏、肝、肾脏等重要脏器严重疾病患者；所有患者均实施住院治疗，主要临床症状包括胸闷气短、咳嗽浓痰等；所有患者均已与我院签署研究内容知情同意书，表示自愿参与并坚持完成；研究内容均通过伦理委员会审核。

1.2方法

1.2.1标本采集医护人员于患者入院后第二天，活检取肺部组织进行，完成标本采集后采用10%缓冲甲醛溶液进行固定，采用石蜡包埋法进行再固定后切片，取切片进行苏木精-伊红染色，准备进行免疫组化检测。收集患者新鲜胸腔积液100ml，分装至4个试管中进行离心处理，转速为2500r/min，离心时间不超过15min，完成离心后采用移液枪移除上清液，取沉淀物进行常规细胞涂片检查。合并余下沉淀，加入2.5ml戊二醛进行固定处理，依照上述条件进行离心，去除上清液后用滤纸包裹，常规脱水处理，用是啦包埋切片，采用HE染色处理

1．2．2免疫组化技术严格按照试剂盒说明进行操作，主要步骤如下①取组织切片去石蜡，同时进行水化，采用PBS缓冲液进行洗涤，时间不超过5min，重复洗涤3次。②采用3%的过氧化氢作为阻断剂进行室温下孵育，时间为15min，重复上述过程3次。③上述组织加入动物血清阻断剂50μl，室温下孵育5min后去血清。④以CEA、CK7、WT-1、CR抗体（均购于自基因公司）作为抗体进行后续孵育，以DAB显色液为显色条件，染色过程严格按照试剂盒说明书进行。

1.3观察标准

患者样本进行免疫组化后，CK7及CEA在组织部位染色后出现棕黄色时即为阳性；Calretinin、WT-1在细胞间隙出现棕色即为阳性。间皮细胞或腺癌细胞达10%以上细胞阳性诊断为阳性。

1.4统计学方法

本次研究中所有数据均采用Excel2010版进行统计和归类，统计学分析采用SPSS19.0进行处理，差异具有显著性以P＜0.01为标准，差异具有统计学意义以P＜0.05为标准。

2　结　果

本次研究结果均由同一经验丰富的临床操作人员进行评估。转移性癌和浆膜腔原发性间皮性肿瘤。本次研究结果如表1所示。检测成功例数72例，成功率为97.3%。其中转移性癌症患者47例，原发性癌症患者25例，2例患者检测失败，待进一步进行诊断。对比两种癌症比例发现，该技术对于转移性癌检测效果更好，差异具有显著性，P＜0.01。

各组阳性分析结果如表1中所示。细胞学涂片实验后，检测阳性例数为27例，阳性率为57.4%，细胞涂片结合免疫组化技术检测阳性率为100%，即25例患者均为阳性。对比两组差异发现具有显著性，即P＜0.05，原发性癌组优于转移性组，有统计学意义。

表1　两组患者阳性率比较

3　讨论

胸腔积液作为临床常见并发症，多见于胸部肿瘤病症患者，患者发生肿瘤并积液后，使间皮细胞、肿瘤细胞均浸泡于胸腔积液中，长期受到该类物质刺激后，导致间皮细胞和肿瘤细胞均发生形态学变化，导致各类疾病在常规条件下区分较难［3］。传统条件下采用细胞学涂片，该技术应用范围较广，操作易于掌握，在实验过程中能稳定细胞形态特点，然而敏感度较低以及准确性等问题一直制约该技术的应用，尤其是对恶性胸腔积液的患者，诊断准确率仅为75%左右。

本次研究在传统技术上，结合本次研究摒弃传统细胞涂片技术，采用免疫组化染色方法，针对性选择特异性抗体对患者肺部组织的抗原进行检测，通过酶活性产生的显色反应显示了细胞组织的形态的结构，疾病部位的定位分布和相关特点。方法检测，原理清晰，易于操作和掌握，阳性物质定位准确，特异性较强。同时在实验过程中结构标本保存良好，利于更多检查进行。

本次研究结果如表1中所示。原发性癌检出例数为25例，这与相关报道中临床常规方法报道相符，说明了该方案的有效性以及局限性，亦说明胸腔积液的发病多与转移性癌症有关［4］，可能与研究内容和选择样本特异性有关。对比两种癌症比例发现，该技术对于转移性癌检测效果更好，差异具有显著性，P＜0.01。

综上所述，本次研究探讨免疫组化在疾病研究中的应用，有效提升临床检测和诊断情况，为临床的治疗提供了理论参考，值得临床广泛推广和应用。

［1］ 盛伟琪.胃肠胰神经内分泌肿瘤病理诊断的规范和进展［J］.中国癌症杂志,2013,7（6）:401-407.

［2］ 张玉萍,王鲁平.免疫组化标记物在肝细胞肝癌病理诊断中的作用及进展［J］.诊断病理学杂志,2012,19（2）:148-151.

［3］ 韩安家,阎晓初,王坚等.软组织肿瘤病理诊断免疫组化指标选择专家共识 （2015）［J］.临床与实验病理学杂志,2015,31（11）: 1201-1204.

［4］ 谢刚,原庆会,柯琦等.免疫组化在老年胸腔积液细胞块病理诊断中的应用［J］.四川医学,2015,10（7）:935-937.

Clinical value of immunohistochemistry in pathological diagnosis

YANG Yong
（The People's Hospital of Qiannan Prefecture，Duyun 558000，China）

ObjectiveTo investigate the clinical value of immunohistochemistry in disease detection and diagnosis.MethodsA total of 74 patients with pleural effusion who were admitted to our hospital from July 2013 to September 2014 were enrolled.Besides symptomatic treatment after admission，immunohistochemistry with pathological paraffin section was performed for detection and diagnosis.The patients'clinical outcome was compared.ResultsThe patients had metastatic carcinoma or primary mesothelial tumors in the serous cavity.The results were shown in Table 1. A total of 72 patients underwent a successful detection，yielding a success rate of 97.3%.Of all patients，47 had metastatic carcinoma，25 had primary cancer，and 2 underwent a failed detection and awaited further diagnosis.The comparison of these two types of tumors showed that immunohistochemistry had a significantly better effect in the detection of metastatic carcinoma（P＜0.01）.ConclusionIn disease studies，immunohistochemistry can effectively improve clinical detection and diagnosis and provides a theoretical basis for clinical treatment，and therefore，it holds promise for wide clinical application.

Pathological paraffin section；Immunohistochemistry；Pleural effusion；Clinical effect

杨勇，1981年生，男，苗族，贵州贵定人，本科学历，主治医师，主要从事临床病理诊断方面的工作。