散结乳癖膏治疗卵巢囊肿模型大鼠的实验研究*

侯惠玲靳瑾健关宏郭皓

散结乳癖膏治疗卵巢囊肿模型大鼠的实验研究*

侯惠玲①靳瑾健②关宏①郭皓①

【摘要】目的：通过观察散结乳癖膏治疗卵巢囊肿模型大鼠在治疗前后血清中促黄体生成素及促卵泡刺激素含量，客观评价其治疗卵巢囊肿的疗效，为中医药治疗卵巢囊肿提供实验依据。方法：选取雌性未孕大鼠64只，采取手术的方法造模，从中选取造模成功大鼠，外敷散结乳癖膏（高、中、低剂量），连续6周，处死大鼠，观察移植物外观测量，取血后用放射免疫法检测大鼠体内促黄体生成素及促卵泡刺激素的含量。结果：散结乳癖膏可使模型大鼠的卵巢体积缩小，同时，散结乳癖膏高、中、低剂量组促黄体生成素及促卵泡刺激素含量与模型组比较，差异均有统计学意义（P＜0.05），结论：散结乳癖膏可降低大鼠血清中促黄体生成素及促卵泡刺激素的含量，对卵巢囊肿大鼠有一定的治疗作用，为今后临床用药提供新的思路。

【关键词】散结乳癖膏； 卵巢囊肿； 促卵泡刺激素； 促黄体生成激素

First-author’s address：Qiqihaer Medical University，Qiqihaer 161006，China

卵巢囊肿是一种常见的良性肿瘤［1］，常见于20～50岁妇女，中医称之为“肠覃”，性质和形态各有不同，多见为囊性囊肿，早期多无明显症状，常在妇科检查时偶然发现［2-3］，有一定的恶性比例，会引起内分泌失调、甲亢和多血症等［4-5］。目前，西医的治疗方法为手术切除［6］，即卵巢囊肿切除术，应用腹腔镜为主要的治疗手段［7-8］。对于大部分女性来说会造成很大的心理负担并很容易复发；从中医角度来说，脏腑功能失调与气血运行不畅都会导致局部器官发生病变，而由于卵巢特殊的生理位置，其为肝经经过之处，故中医上认为卵巢与肝脾脏腑关系密切［9］，从而在治疗方面，逐渐采用中医中药治疗，并取得了显著的治疗效果，主要以活血化瘀、疏肝理气为主［10-12］。

本实验的药物为外用试剂，通过手术的方法对大鼠进行造模后治疗，采用放射免疫疗法检测大鼠体内激素含量变化，评估药物对卵巢囊肿的影响，对今后的临床用药和治疗有重大意义。

1 材料与方法

1.1 实验动物及药物 雌性Wistar大鼠，未孕，80只，体重（200±20）g，由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供，合格证号为CXK（吉）2011-0004。散结乳癖膏：深黄色膏状，由黑龙江省鹤翔制药有限责任公司提供，批号为D120504号。对照品基质（赋形剂），蜂蜡麻油等容积混合物，由黑龙江省鹤翔制药有限责任公司提供。

1.2 实验分组及给药剂量 根据造模结果判断标准，选取造模成功的动物48只，随机分组。（1）散结乳癖膏高剂量组：8只，每天固定时间外敷给药2.52 g/kg大鼠。（2）散结乳癖膏中剂量组：8只，每天固定时间外敷给药1.26 g/kg大鼠。（3）散结乳癖膏低剂量组：8只，每天固定时间外敷给药0.63 g/kg大鼠。（4）赋形剂对照组：8只，每天固定时间外敷给药2.52 g/kg大鼠。（5）阳性药组：8只，每天固定时间给药炔雌醇环丙孕酮1 mL/100 g大鼠。（6）模型对照组：8只，仅常规喂养，不作处理。（7）空白对照组：取未造模的动物8只，仅常规喂养，不作处理。共计七组，每天外敷给药一次后敷以油纸和纱布，并用无刺激性透明胶布固定，单笼饲养，连续6周。

1.3 方法

1.3.1 造模方法 在临床上，卵巢囊肿与子宫内膜异位症有较为相似的病理基础，因此在实验中可以借助子宫内膜异位症的动物模型来对大鼠进行造模用药［13］。选取雌性未孕并处在动情期规律的大鼠64只，腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，待大鼠失去意识后，使其置于仰卧位，用橡皮筋固定头部与四肢。腹部剪毛消毒后，于腹中线上距耻骨联合1 cm处行2 cm长的垂直切口，经膀胱后侧找到输卵管，并找出卵巢，挑出左侧子宫角，剥离系膜，结扎。切除结扎处子宫组织约10 mm，放入盛有无菌生理盐水的培养皿中，去除多余脂肪，纵行剖开。剪去一块0.5 cm×0.5 cm的内膜，用铬线缝合固定在右侧远离腹部切口上。常规消毒，关腹。

1.3.2 造模成功判断标准 手术4周后，开腹，根据移植物的体积大小（体积增大并大于30 mm以上）、颜色（淡红色或者暗红色囊泡）及质地（质地柔软、有澄清液体积聚并有血管形成）等判断是否造模成功。造模成功大鼠见图1。

1.4 实验取材及指标检测 实验结束后，眼球取血5 mL，分离血清，备用。处死动物，剖腹后测量各组大鼠腹腔内移植物情况，并测量体积，用两脚规测量移植物的体积（长×宽×高，mm3），记录其体积为V。采取放射免疫法检测血清中促黄体生成素和促卵泡刺激素的含量。

图1 造模成功大鼠

1.5 统计学处理 应用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料以（±s）表示，比较采用t检验，以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 大鼠腹腔内移植物情况 术后4周，大鼠开腹后可以观察到有53只移植物明显的增大，形成透明的薄壁囊泡，表面的血管清晰，囊内积聚清亮液体，大多数为无色透明或含血性液体，病灶结构较清晰，造模成功率为82.0%。

2.2 散结乳癖膏对卵巢囊肿大鼠体内移植物体积的影响 模型组大鼠体内移植物体积为（143.39±5.60）mm3，赋形剂组为（141.13±7.98）mm3，散结乳癖膏高、中、低组分别为（42.43±8.33）、（82.46±8.41）、（110.77±8.61）mm3，阳性药组为（30.70±9.00）mm3。散结乳癖膏各剂量组与模型组比较，大鼠移植物体积均有明显缩小趋势，且各组与模型组比较差异均有统计学意义（P＜0.01）。阳性药组大鼠移植物体积也明显缩小，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。

2.3 散结乳癖膏对于卵巢囊肿大鼠血清促黄体生成素和促卵泡刺激素含量的影响 选取的48只给药大鼠中有3只大鼠在给药过程中由于个体体质较弱死亡，分别为模型组1只、中剂量组1只和赋形剂组1只。模型组血清促黄体生成素、促卵泡刺激素含量比空白组均明显升高，差异均有统计学意义（P＜0.01）；散结乳癖膏各剂量组、阳性药组血清促黄体生成素、促卵泡刺激素含量与模型组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

3 讨论

散结乳癖膏为外用贴敷剂，药芯为棕黄色，主要成分为莪术、姜黄、白芷、天葵子、急性子、木鳖子，气辛。散结乳癖膏临床前药理实验表明，此药有行气活血，散结消肿之功效，可以用于气滞血瘀所致的乳癖。莪术作为此复方的主药，现代药理硏究表明，莪术二酮［14］是其发挥活血化瘀作用的主要成分，有抗血栓和抗血小板聚集的作用。因此，使用散结乳癖膏治疗卵巢囊肿，主要以行气活血为主［15］，当属中医范围的标本兼治［16-17］。

表1 散结乳癖膏对卵巢囊肿大鼠血清促黄体生成素、促卵泡刺激素含量的影响（±s） mIU/mL

表1 散结乳癖膏对卵巢囊肿大鼠血清促黄体生成素、促卵泡刺激素含量的影响（±s） mIU/mL

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与空白对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01

组别 剂量 促黄体生成素 促卵泡刺激素模型组（n=7） 等体积 5.53±0.26△△1.83±0.09△△赋形剂组（n=7） 2.52 g/kg 5.38±0.08△△1.80±0.12△△散结乳癖膏高剂量组（n=8） 2.52 g/kg 4.80±0.39**△1.55±0.06**△散结乳癖膏中剂量组（n=7） 1.26 g/kg 4.94±0.35**△△1.61±0.08**△△散结乳癖膏低剂量组（n=8） 0.63 g/kg 5.22±1.16*△△1.73±0.04*△△阳性药组（n=8） 1 mL/100 g 4.50±0.12**1.51±0.08**空白组（n=8） 等体积 4.42±0.19 1.47±0.06

在医学领域中，衡量卵巢功能的重要指标为基础性激素水平，例如雌激素、孕激素、促卵泡刺激素和促黄体生成素等，卵巢功能性囊肿可为下丘脑-垂体-卵巢轴功能紊乱的结果［18-19］。联合观察几种激素的水平变化，可以更好的了解卵巢功能。如果促黄体生成素和促卵泡刺激素同时高于上限3个周期以上，是卵巢储备功能下降以及到了后期的表现［20-21］，因此如想改善卵巢的储备功能，治疗由于储备功能导致的卵巢囊肿，降低促卵泡刺激素和促黄体生成素的水平是必不可少的。

本实验研究表明散结乳癖膏高、中和低剂量组可明显减小卵巢囊肿大鼠体内移植物体积，对于大鼠异位内膜细胞有一定的选择性抑制作用，为其治疗卵巢囊肿提供了形态学的依据。同时，降低血清中促卵泡刺激素和促黄体生成素的含量，以此调整性腺轴的功能，从而改善卵巢囊肿细胞的紊乱，发挥其治疗的目的。对于此药物更为具体的治疗机制，以及是否能治疗其他由于痰凝血瘀所致的妇科疾病，需要更进一步的研究。

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①齐齐哈尔医学院 黑龙江 齐齐哈尔 161006

②齐齐哈尔农垦管理局中心医院

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.20.008

收稿日期：（2016-05-31） （本文编辑：蔡元元）

*基金项目：齐齐哈尔医学院院内科研基金资助项目（QY2015Q-04）

通信作者：郭皓

Experimental Study of Sanjierupi Ointment for Ovarian Cyst Model Rats

HOU Hui-ling，JIN Jin-jian，GUAN Hong，et al.//Medical Innovation of China，2016，13（20）：033-035

【Abstract】Objective：To evaluate the effects of Sanjierupi Ointment on ovariancyst in serum model rat by observing the content of luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone before and after the treatment，in order to provide experimental basis.Method：The female unfertilized 64 rats were taken，using the surgical method to select the successful model rats.The building successful rats were selected and topical application of Sanjierupi Ointment in abdominal（high，middle and low doses），after 6 weeks，put to death in the rat，the execution of the grafts was observed and taken blood from eyes to detect LH and FSH by radioimmunoassav.Result：Sanjierupi Ointment reduced the model rat ovarian volume.At the same time，the content of LH and FSH of the high，middle and low doses group compared with the model control group，there had significant differences（P＜0.05）.Conclusion：Sanjierupi Ointment can reduce the content of LH and FSH，it has certain treatment function for ovarian cyst，and it can provide new ideas for future clinical treatment.

【Key words】Sanjierupi Ointment； Ovarian cyst； Follicle-stimulating hormone； Luteinizing hormone