肺结核患者外周血辅助性T细胞亚群相关细胞因子临床意义初探

李晓红,佟冬冬

(1.长春市传染病医院,吉林 长春130123；2.吉林大学第一附属医院,吉林 长春130021)



肺结核患者外周血辅助性T细胞亚群相关细胞因子临床意义初探

李晓红1,佟冬冬2*

(1.长春市传染病医院,吉林 长春130123；2.吉林大学第一附属医院,吉林 长春130021)

结核分枝杆菌感染宿主后发病与否，不仅与感染细菌的数量和毒力等因素相关，同时还取决于机体的免疫功能状态。目前认为机体的抗结核免疫反应主要通过T淋巴细胞介导巨噬细胞的细胞免疫反应[1]。为明确CD4+T淋巴细胞及其亚型相关细胞因子与结核病进展的相关性,我们应用流式细胞术检测肺结核患者CD4+T淋巴细胞计数,采用流式细胞微球阵列技术(CBA)检测其分泌细胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10的含量，探讨其经有效抗结核治疗后的临床意义。现将研究结果报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料肺结核患者组：选取2010年1月-2011年12月于我院诊断治疗的初治肺结核患者给予常规抗结核化疗方案进行治疗，即2HRZE/4HR(H为异烟肼，R为利福平，Z为吡嗪酰胺，E为乙胺丁醇)，6个月后达临床治愈(症状均缓解，痰菌阴转，X线胸片提示结核病灶明显吸收)。共92例，其中男62例，女30例，年龄在18-57岁之间，平均年龄为28.84±11.06岁。所有患者均符合中华医学会结核病学分会制定的《肺结核诊断及治疗指南》诊断标准[2]。所有患者均排除心、肝、肾等脏器严重疾病或自身免疫性疾病的患者，未曾使用免疫调节剂，化疗过程中可依据患者的临床表现给予适当的保肝药物及复合维生素辅助治疗。健康人群对照组：选取健康人群30例，其中男20例，女10例，年龄19-58岁之间，平均年龄为30.3±11.88岁。两组在性别构成和平均年龄方面比较均无统计学意义(P>0.05)，具有组间可比性。

1.2试验方法肺结核患者组于治疗前、治疗后2个月以及化疗后6个月，对照组空腹抽取静脉血4-5 ml进行检测。CD4+T淋巴细胞检测采用抗凝全血标本;选用试剂为BD MultiTESTTMCD3/CD8/CD45/CD4 Kit(美国 BD 公司,批号:84305)Thl/Th2相关细胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10检测选用试剂为BDTMCBAHuman Thl/Th2 Cytokine II Kit(美国 BD 公司,批号:88810)。使用美国BD公司的BD FACSCalibur流式细胞仪于吉林大学公共卫生学院实验中心进行检测，试验方法严格按照试剂盒所提供的说明书操作。

1.3统计方法所有临床研究数据均采用SPSS13.0软件t检验进行统计学分析，并以P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异非常显著。

2结果

2.1患者组与对照组的CD4+T淋巴细胞及其亚型Th1/Th2细胞相关细胞因子水平比较

与对照组健康人群相比，肺结核患者CD4+T淋巴细胞计数降低，INF-γ水平降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；IL-10水平明显提高，经统计学分析，有显著差异(P<0.01)。结果见表1。

表1　实验组与对照组的比较±s)

注：与对照组相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01

2.2肺结核患者在抗结核治疗过程中CD4+T淋巴细胞及相关细胞因子水平动态观察及比较

患者在强化治疗(2个月后)、疗程结束(6个月后)测定CD4+T淋巴细胞计数及细胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10水平，分别与入院时测定情况进行比较及统计学分析。治疗2个月后，CD4+T淋巴细胞计数、INF-γ、IL-2、IL-4无明显变化，经统计学分析无明显差异；IL-10水平较前下降，其差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗6个月后，CD4+T淋巴细胞计数明显上升，IL-10水平明显下降，经统计学分析有显著差异(P<0.01)；INF-γ水平上升、IL-4水平下降，差异具有统计学意义(P<0.05)；IL-2水平上升，经统计学分析有明显差异(P<0.01)。结果见表2。

表2　治疗过程中CD4+T淋巴细胞及其亚型Th1/Th2细胞相关细胞因子水平的比较±s)

注：与入院时相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01

3讨论

有关结核病患者机体免疫功能方面的研究,是近几年来国内外学者研究的热点之一。结核病免疫是T淋巴细胞介导的细胞免疫,CD4+T淋巴细胞对结核病的发病和演变具有决定性意义。CD4+T淋巴细胞因分泌不同的细胞因子,分型为Th1和Th2细胞,其平衡状态与疾病的转归和愈后密切相关[1]。Th1细胞主要通过分泌IFN-γ、IL-2等细胞因子发挥相应的生物学效应，在细胞免疫中发挥极为重要的作用。IFN-γ通过促进Th1细胞和巨噬细胞参与的炎症反应，抑制Th2细胞和嗜酸性粒细胞参与的炎症反应而加强细胞免疫应答。Th2细胞主要通过分泌IL-4、IL-10等细胞因子发挥相关生物学效应。IL-4通过抑制巨噬细胞的活化，阻断INF-γ激活巨噬细胞介导的免疫应答[3]。由此可见，Th1/Th2应答平衡对于结核病的发生、发展及转归起着决定性的作用。

本研究主要是针对初治结核病患者的CD4+T细胞计数以及Th1和Th2细胞相关细胞因子进行测定观察，从而对于患者的免疫功能进行分析判定。结果显示：92例肺结核患者外周血CD4+T细胞的水平较健康对照组低,提示细胞免疫功能降低；通过INF-γ、IL-2水平降低可判定Th1细胞水平降低，提示保护性细胞免疫功能抑制；IL-4、IL-10水平明显提高可判定Th2细胞水平增加。可见活动性肺结核患者细胞免疫功能降低，Th1/Th2应答平衡失衡。此结论与相关学术报道[4,5]结论一致。在抗结核治疗过程中动态观察并与治疗前进行对比分析，有效的抗结核治疗有助于细胞免疫功能逐渐恢复。表2数据显示，活动性肺结核患者在抗结核强化治疗后，CD4+T细胞计数增加(P<0.05)，IL-10数值下降(P<0.05)；经有效抗结核治疗6个月后，CD4+T细胞计数明显增加(P<0.01)，INF-γ水平升高(P<0.05)、IL-2水平升高(P<0.01)，IL-2数值下降(P<0.05)，IL-10数值下降(P<0.01).此组观察病例均为抗结核治疗取得良好疗效的病例，故可推断：活动性肺结核经有效抗结核治疗后免疫功能逐渐恢复，Th1细胞水平增加，Th2细胞水平降低，Th1/Th2应答平衡平衡逐渐恢复。

综上所述，活动性肺结核患者细胞免疫功能降低，Th1/Th2应答平衡失衡，Thl细胞的功能降低，Th2细胞功能增强；经有效抗结核治疗后，细胞免疫功能逐渐恢复。由此可见，外周血CD4+T细胞计数以及Th1和Th2细胞相关细胞因子水平的动态监测有助于对肺结核患者预后情况的正确评价。然而，免疫细胞和细胞因子的作用是复杂的和多方面的，其具体机制仍需进一步深入研究。

参考文献：

[1]谢惠安,阳国太,林善梓,等主编.现代结核病学[M].北京：人民卫生出版社，2000.136-235.

[2]中华医学会结核病学分会.肺结核诊断和治疗指南[J].中华结核和呼吸杂志,2001,24(2):70.

[3]Hartmann P,Plum G.Immunological defense mechanisms in tuberculosis and MAG-infection[J].Diagn Microbial Infect Dis,1999,34(7):147.

[4]张贤兰，吕江青，林兆原，等.肺结核患者CD4+T淋巴细胞凋亡及相关细胞因子水平变化[J].广州医学，2008，29(10)：1664.

[5]谭耀驹，张言斌，冯蝶仪，等.初治肺结核患者外周血Th1/Th2 细胞的测定及临床意义[J].中华结核和呼吸杂志，2004，27(6)：385.

文章编号：1007-4287(2016)06-1011-02

*通讯作者

(收稿日期：2015-08-19)