HDAC3和HDAC5在乳腺癌中的表达与临床病理特征意义

林俊杰,杨昭婷,玄延花,倪卫东,王丽强

(1.延边大学 2013级口腔医学专业，吉林 延吉133002；2.延边大学医学院 病理学教研室；3.吉林大学中日联谊医院)



HDAC3和HDAC5在乳腺癌中的表达与临床病理特征意义

林俊杰1,杨昭婷2,玄延花2,倪卫东2,王丽强3*

(1.延边大学 2013级口腔医学专业，吉林 延吉133002；2.延边大学医学院 病理学教研室；3.吉林大学中日联谊医院)

近几年来,我国乳腺癌患者以每年21万例的增长速度成为女性最常见恶性肿瘤中的第一位[1]。有效的治疗乳腺癌,对于保障女性的生命与健康意义重大。准确的估计乳腺癌患者的预后情况，对于指导乳腺癌患者的个体化靶向治疗具有很大帮助。所以，研究乳腺癌患者预后的相关影响因素迫在眉睫。

研究发现组蛋白去乙酰化酶(HDACs)在乳腺癌的发生、演进过程中具有重要作用。其中HDAC3属于Ⅰ类HDACs，HDAC5属于Ⅱ类HDACs，HDAC3和HDAC5均可通过催化生理过程中的关键蛋白,从而影响肿瘤的发生与发展。研究表明HDAC3在浸润性乳腺癌组织中高表达[2]，为进一步研究HDAC3和HDAC5在乳腺癌组织中的表达情况与患者预后的关系，本研究共选取29例乳腺组织和124例乳腺癌组织，通过免疫组化EnVision法测定HDAC3和HDAC5在乳腺癌组织中表达的情况，并从表观遗传学角度探讨其与临床病理特征及预后的关系。

1材料与方法

1.1材料本研究选取延边大学医院病理科1998-2008年的正常乳腺组织29例和乳腺癌组织存档蜡块标本124例。124例乳腺癌组织中患者年龄≤50岁84例，年龄>50岁40例；根据AJCC 2009年肿瘤的分期标准，124例乳腺癌组织中TNM分期：Ⅰ期31例；Ⅱ期54例；Ⅲ期39例；124例乳腺癌组织中,淋巴结转移阳性的有64例,淋巴结转移阴性的有60例。依据在第十三届St.Gallen国际专家共识推荐的乳腺癌分子分型标准,本组124例乳腺癌病变组织分4型,Luminal A型22例,Luminal B型72例,HER-2过表达型21例,三阴性型9例。

1.2免疫组织化学染色免疫组织化学染色采用EnVision法,免疫组化EnVision检测试剂盒购自DAKO公司,HDAC3、5均购自 Cell Signaling Technology公司。染色步骤按免疫组化DAB染色常规操作步骤进行。为证明免疫组化检测的特异性,实验中应用了兔IgG代替一抗作为对照,结果为阴性。

1.3染色结果判定标准棕褐色的阳性颗粒位于细胞核和(或)细胞质中。以阳性染色细胞数所占的百分比作为主要分类依据,将染色结果分为两类:阳性和阴性。阳性细胞数超过20%为阳性，阳性细胞数低于20%为阴性。

1.4统计学方法统计学分析采用SPSS19.0软件进行，实验数据之间的参数比较采用χ2检验，同时应用Kaplan-Meier法绘制HDAC3和HDAC5的表达与患者术后生存时间曲线的关系图，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

HDAC3和HDAC5主要表达于乳腺癌组织的细胞核及细胞质中。HDAC3和HDAC5在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达见表1，与临床病理特征的关系见表2。HDAC3(P=0.004)和HDAC5(P=0.012)表达阳性的乳腺癌患者的总生存率明显低于阴性者(图1)。

表1　HDAC3和HDAC5在正常乳腺组织及乳腺癌组织中的表达情况

表2　HDAC3和HDAC5在乳腺癌组织中的表达与临床病理特征的关系

3讨论

表观遗传学(Epigenetics)是指在基因编码的DNA序列不变的前提下，通过某些机制而产生的可遗传的细胞表型或基因表达改变的科学。组蛋白的修饰是引起表观遗传学改变的主要机制之一，组蛋白的乙酰化修饰在肿瘤的发生发展过程中扮演着重要角色。组蛋白的乙酰化修饰离不开HDACs,而HDACs可以影响多种癌基因或抑癌因子的表达，进而导致细胞的恶性增殖和肿瘤的发生[3]。在本研究中，我们发现HDAC3和HDAC5在乳腺癌组织中高表达，并且二者的表达跟乳腺癌患者淋巴结转移及较差的预后有关系。

图1　HDAC3和HDAC5蛋白表达与乳腺癌患者总生存率之间的关系

Mariadason等[4]研究报道证实与邻近的正常组织相比，HDAC3在肿瘤组织中高表达，并且下调HDAC3的水平将导致肿瘤细胞存活的减少。在本研究中，我们发现HDAC3在乳腺癌组织中的阳性表达率明显高于正常的乳腺组织，这说明HDAC3可能是乳腺肿瘤形成与发展的一个重要危险因素。Wilko等[5]研究表明HDAC3在胃癌组织中高表达，并且其预示与淋巴结转移和较差的预后显著相关。以上研究结果与本研究结果相近，HDAC3在乳腺癌组织中高表达，与淋巴结转移和较差的预后具有相关性，提示HDAC3可以作为评价乳腺癌患者预后的一个重要参考因素。但是，Krusche等[6]研究报道认为 HDAC3的表达与乳腺癌患者预后无关，并不影响患者的无病生存期和总生存期。其结果与本研究结果不一致，HDAC3 在肿瘤组织中的表达在不同的研究中存在较大差异,他们真正的关系还需要进一步去研究揭露。

Milde等[7]的研究报道与低风险的髓母细胞瘤相比,HDAC5在高风险的髓母细胞瘤高表达，并且与较差的预后具有相关性。我们也发现，HDAC5在乳腺癌组织中的阳性表达率高于正常的乳腺组织，并且HDAC5表达阳性的乳腺癌患者其总生存率也明显低于阴性者。在体外胃癌细胞系研究中，Lee等[8]发现HDAC5在促进胃癌的侵袭及转移方面具有重要作用。通过本实验，我们推测HDAC5可能参与乳腺癌的迁移，因为它在淋巴结转移阳性的乳腺癌患者中的阳性表达率明显比阴性组高，具体机制需要进一步研究。以上结果说明HDAC5在乳腺癌患者中高表达，并且与患者淋巴结转移、较差的预后具有相关性。

综上所述，HDAC3和HDAC5在乳腺癌组织中过表达，并与患者淋巴结转移、较差的预后密切相关。因此，对于乳腺癌患者,分析HDAC3和HDAC5的表达情况对评价患者的预后具有一定的参考价值。

参考文献：

[1]陈万青，张思维，曾红梅，等.中国 2010 年恶性肿瘤发病与死亡[J].中国肿瘤,2014,23(1):1.

[2]Müller BM，Jana L，Kasajima A,et al.Differential expression of histone deacetylases HDAC1，2 and 3 in human breast cancer-overexpression of HDAC2 and HDAC3 is associated with clinicopathological indicators of disease progression[J].BMC Cancer,2013,13:215.

[3]Cress WD,Seto E.Histone deacetylases,transcriptional control,and cancer[J].Cell Physiol,2000,184(1):1.

[4]Mariadason JM.Dissecting HDAC3-mediated tumor progression[J].Cancer Biol Ther,2008,7(10):1581.

[5]Weichert W R,Ske A,Gekel V,et al.Association of patterns of class I histone deacetylase expression with patient prognosis in gastric cancer:a retrospective analysis[J].Lancet Oncology,2008,9(2):139.

[6]Krusche CA,Wülfing P,Kersting C,et al.Histone deacetylase-1 and-3 protein expression in human breast cancer:a tissue microarray analysis[J].Breast Cancer Res Treat,2005,90(1):15.

[7]Milde T,Oehme I,Korshunov A,et al.HDAC5 and HDAC9 in medulloblastoma:novel markers for risk stratification and role in tumor cell growth[J].Clin Cancer Res,2010,16(12):3240.

[8]Lee KH,Choi EY,Kim MK,et al.Inhibition of histone deacetylase activity down-regulates urokinase plasminogen activator and matrix metalloproteinase-9 expression in gastric cancer[J].Mol Cell Biochem,2010,343(1-2):163.

*通讯作者

文章编号：1007-4287(2016)06-1001-03

(收稿日期：2015-08-21)