血浆钙结合蛋白在侵袭性牙周炎患者中的检测价值

孙国能

(武汉市妇女儿童医疗保健中心妇幼门诊 口腔科，湖北 武汉 430015)



血浆钙结合蛋白在侵袭性牙周炎患者中的检测价值

孙国能

(武汉市妇女儿童医疗保健中心妇幼门诊 口腔科，湖北 武汉 430015)

钙结合蛋白(CBP)是一种复合物，由A9和S100A8组成，其参与了先天免疫炎症反应。据报道，糖尿病及类风湿关节炎等炎性疾病患者体液中CBP的含量显著上升[1]。有资料研究发现，牙周炎患者的龈沟液中的CBP水平明显高于正常组，且CBP可能是预测牙周炎活动性的一个重要因子[2]，说明在牙周组织的免疫炎性反应中，CBP发挥了重要的作用。最新的研究结果显示，牙周炎患者的血清白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及C反应蛋白(CRP)的表达水平上升[3]，然而目前关于侵袭性牙周炎(AgP)患者的外周血中CBP的含量以及其与中心粒细胞(neutrophil)数目间的关系的研究尚较少。本研究旨在通过对AgP患者以及牙周健康者的血浆CBP水平的检测与对血浆CBP浓度与血细胞数目之间关系的分析，探析CBP在侵袭性牙周炎的发生发展过程中的临床意义。

1资料与方法

1.1研究对象

2010年2月至2015年12月在我院接受治疗的57例AgP患者为观察组，其中男22例，女35例，平均年龄27.1±5.5岁，BMI 21.9±3.0 kg/m2,空腹血糖5.7±0.9 mmol/L。根据1999年国际牙周疾病新分类的相关诊断标准[4]，确诊为广泛性AgP(GAgP)。另外选取同期在我院接受健康体检的44例牙周健康者作为对照组，其中男15例，女29例，平均年龄26.7±4.6岁，BMI 22.1±2.9 kg/m2,空腹血糖5.5±1.0 mmol/L。两组的一般资料无显著差异(P>0.05)。

所有受试者的入选标准：无吸烟史者；近半年内无牙周治疗史，最近3个月内未曾服用抗生素；咬合关系正常，未曾接受过正畸治疗的患者；不存在全身系统性疾病者，女性患者未曾服用避孕药且不在妊娠期。GAgP患者的入选标准：年龄不超过35岁；全口≥8颗牙的探诊深度至少为6 mm，邻面附着丧失不低于5 mm；患牙中≥3颗不是第一切牙和磨牙；牙片显示全口邻面牙槽骨存在吸收的状况。对照组的入选标准：不存在邻面附着丧失现象；全口牙周检查发现探诊深度不超过3mm；出血指数至少为3的位点≤10%。

1.2方法

通过Williams牙周探针对受试者的每颗牙齿的远中舌、舌侧中央、近中舌、远中颊、颊侧中央和近中颊6个位点的附着丧失和探诊深度，分别记录每颗牙的舌、颊侧的最重位点处出血指数。定义探诊深度至少为6 mm，且附着丧失不低于5 mm的位点为重度位点，计算重度位点在总位点中所占的百分值(重度位点百分值)。

清晨空腹采集受试者的静脉血，一部分给予抗凝、离心处理，并将血浆保存于-70℃下待测；另一部分采用日本东亚公司生产的Sysmex kx-21全自动血细胞分析仪进行血细胞分析。血浆CBP水平检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)双抗体夹心法，严格按照试剂盒(Calpro公司，挪威)说明书执行相关操作步骤。

1.3统计学方法

2结果

2.1临床指标

观察组患者的各项牙周临床指标(包括CBP、附着丧失、探诊深度、出血指数以及重度位点百分值)均明显高于对照组(P<0.01)，详见表1。

表1　两组患者各项临床指标的比较

2.2相关性分析GAgP患者的血浆CBP水平与其它检测指标间的关系

表2结果提示血浆CBP与中性粒细胞计数、探诊深度、出血指数、重度位点百分值以及附着丧失间存在明显的正相关性(P<0.05)。

表2　GAgP患者血浆CBP水平与其它检测指标的相关性

3讨论

据报道，牙周炎患者龈沟液中的CBP水平明显比对照组高，不仅与牙周各项临床指标(包括牙龈指数、出血指数、探诊深度等)呈正相关性，还与前列腺素E2、白细胞介素1β等因子的表达水平呈正相关性，患者接受基础治疗后，其龈沟液中CBP水平明显降低[5]。牙周炎患者的龈沟液中CBP可能产自袋内上皮细胞或牙周袋内被激活的大量炎性细胞。有资料研究结果显示，口腔牙龈的上皮基底层上部长期不间断表达CBP，牙周炎及牙龈炎时牙周袋内的上皮全层和龈沟强阳性表达CBP[6]。有学者进一步研究认为，福赛类杆菌和牙龈卟啉单胞菌等对口腔上皮细胞进行24h的刺激后，CBP基因的表达水平升高，表达CBP的上皮细胞可以更加强有力地抵抗细菌的入侵[7]，说明牙周炎症时，致病菌的不断刺激可能会诱导牙周袋内的炎性细胞和口腔上皮细胞表达CBP，这些蛋白一方面可以对细菌微生物进行有效抑制，使牙龈上皮抗菌增强，在机体抗炎第一道防线上发挥重要作用；另一方面CBP还可以通过增强黏附分子亲和力以及内皮细胞与白细胞间黏附力的方式，促进炎性细胞因子大量释放，致使牙周炎症更加严重，故在局部牙周的炎症反应中CBP可能同时具有致炎和抗炎的作用。本研究发现，GAgP患者的血浆CBP水平明显比对照组高(P<0.01)，说明局部牙周组织的炎症反应可能会对机体外周血中的CBP水平产生一定的影响。牙周袋中的CBP可能通过糜烂及破溃的牙周袋上皮及其下方增生的一些毛细血管、结缔组织进至血液循环系统中，导致患者血浆CBP水平上升[8]。本研究还发现，GAgP患者的血浆CBP水平与重度位点百分比、附着丧失、探诊深度以及出血指数间均呈显著正相关性，说明随着牙周病损部位的表面积的不断增加和炎症程度的不断加深，牙周袋内上升的CBP进入血液循环的浓度也呈上升趋势；此外，牙周毒素及致病菌也可以通过局部牙周组织到达血循环中，对血液中的白细胞进行刺激产生CBP，导致CBP水平上升。

CBP是中性粒细胞的一个重要胞质蛋白，其在细胞外主要产生于激活的单核巨噬细胞及中性粒细胞。本研究结果显示，血浆CBP浓度与中性粒细胞计数呈正相关性，这与以往的相关研究结果一致[9]。推测原因可能是CBP主要由中性粒细胞产生，且CBP继承了中性粒细胞很强的趋化作用。CBP可以对骨髓中性粒细胞进行充分诱导，使之参与血液循环，扩大中性粒细胞的数目，使更多的中性粒细胞聚集于炎症部位，形成正反馈机制，促进局部牙周炎症的持续扩散[10]。

总之，血浆CBP一方面可以对局部的牙周炎症组织进行致炎和抗炎的双重调节作用，另一方面还可以以炎症因子的角色在机体全身免疫炎症反应中发挥重要作用，对血管内皮细胞、远隔的重要脏器及其组织等造成影响，引发相应的病理变化，最终严重威胁患者的生命健康。

参考文献：

[1]SunX,MengH,ShiD，etal.Thecorrelationbetweenplasmacalprotectinandneutrophilcountinpatientswithaggressiveperiodontitis[J].ZhonghuaKouQiangYiXueZaZhi,2014,49(11):649.

[2]SchaeferAS,BochenekG,JochensAetal.GeneticevidenceforPLASMINOGENasasharedgeneticriskfactorofcoronaryarterydiseaseandperiodontitis[J].CircCardiovascGenet,2015,8(1):159.

[3]SchaeferAS,RichterGM,NothnagelM,etal.Agenome-wideassociationstudyidentifiesGLT6D1asasusceptibilitylocusforperiodontitis[J].HumMolGenet,2010,19(3):553.

[4]ZaghbaniA,Ben-YoussefBS,GharbiOetal.Eosinophilicgranulomaoraggressiveperiodontitis[J].RevStomatolChirMaxillofac,2010,111(1):49.

[5]ZhengY,HouJ,PengLetal.Thepro-apoptoticandpro-inflammatoryeffectsofcalprotectinonhumanperiodontalligamentcells[J].PLoSOne,2014,9(10):e110421.

[6]BecerikS,AfacanB,OzturkVOetal.Gingivalcrevicularfluidcalprotectin,osteocalcinandcross-linkedN-terminaltelopeptidlevelsinhealthanddifferentperiodontaldiseases[J].DisMarkers,2011,31(6):343.

[7]KanerD,BernimoulinJP,DietrichTetal.Calprotectinlevelsingingivalcrevicularfluidpredictdiseaseactivityinpatientstreatedforgeneralizedaggressiveperiodontitis[J].JPeriodontalRes,2011,46(4):417.

[8]MatangkasombutO,WattanawarapornR,TsurudaKetal.CytolethaldistendingtoxinfromAggregatibacteractinomycetemcomitansinducesDNAdamage,S/G2cellcyclearrest,andcaspase-independentdeathinaSaccharomycescerevisiaemodel[J].InfectImmun,2010,78(2):783.

[9]SunX,MengH,ShiDetal.AnalysisofplasmacalprotectinandpolymorphismsofS100A8inpatientswithaggressiveperiodontitis[J].JPeriodontalRes,2011,46(3):354.

[10]LiuK,MengH,LuRetal.Initialperiodontaltherapyreducedsystemicandlocal25-hydroxyvitaminD(3)andinterleukin-1betainpatientswithaggressiveperiodontitis[J].JPeriodontol,2010,81(2):260.

文章编号：1007-4287(2016)06-0987-03

(收稿日期：2016-01-17)