3374例血液病患者骨髓细胞形态及活检同步检测的比较分析

杨娣娣，韩秀蕊，张丽洁，李艳春，赵　园，王九菊，魏绪仓

(陕西省人民医院 血液病研究室，陕西 西安710068)



3374例血液病患者骨髓细胞形态及活检同步检测的比较分析

杨娣娣，韩秀蕊，张丽洁，李艳春，赵园，王九菊，魏绪仓*

(陕西省人民医院 血液病研究室，陕西 西安710068)

摘要：目的探讨骨髓细胞形态与骨髓活检病理同步检测在血液病诊断与鉴别诊断中的价值。方法采用骨髓抽吸-活检双标本取材术，获取骨髓涂片、活检标本，对我院3374例血液病患者的血涂片、骨髓涂片与活检切片的细胞形态及病理变化进行比较研究。结果骨髓活检的增生度明显高于涂片(P<0.05)；骨髓活检对急性白血病(AL)、慢性粒细胞白血病(CML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓转移癌(MCBM)、淋巴瘤、骨髓纤维化(MF)、骨髓增生异常综合征(MDS)、再生障碍性贫血(AA)诊断的阳性率高于涂片(P<0.05)； 骨髓涂片对特发性血小板减少性紫癜(ITP)、骨髓感染诊断的阳性率明显高于活检(P<0.05)。MDS粒系病态造血的检出率骨髓活检高于涂片；红系及巨核系病态造血的检出率骨髓涂片高于活检。骨髓活检观察粒系幼稚前体细胞异常定位(ALIP)、巨核细胞异常分布、基质病理改变具有明显优势。结论骨髓细胞形态与骨髓活检病理检查相结合可以明显提高血液病的诊断率、减少漏诊，对血液病的诊断与鉴别诊断具有非常重要的意义。

关键词：血液病;骨髓活检;骨髓涂片;血涂片

(Chin J Lab Diagn,2016,20:0952)

骨髓细胞形态学检查包括骨髓涂片与外周血涂片分析，是血液系统疾病诊断最传统的检测方法。由于受骨髓组织结构、增生度、细胞分布不均、纤维化等因素的影响，骨髓涂片往往不能准确地反映骨髓造血的真实情况，给疾病诊断带来困难。骨髓活检取一小块完整骨髓组织进行分析，弥补了骨髓细胞形态学检查的不足。我们对3374例血液病患者的骨髓细胞形态与活检进行回顾分析，以探讨两者在血液病诊断与鉴别诊断中的价值。

1材料与方法

1.1研究对象2005年1月-2014年12月，在我院血研室诊断的3374例血液病患者,其中男1887人，女1487人，年龄在8-87岁,中位年龄46岁。临床有不同程度的贫血、出血、发热，肝脾、淋巴结肿大症状。外周血至少有一系细胞数量或质量异常。所有病例的诊断均符合参考文献[1]诊断标准。

1.2取材与处理专用骨髓活检针于患者髂后上棘行抽吸-活检双标本取材[2]。抽吸液涂片，瑞-姬氏混合染色及细胞化学染色；骨髓活检组织，经Bouin液固定、乙醇梯度脱水、塑料包埋，切成厚度2-5μm的薄片，2-3μm用于HGF染色,5μm用于Gomori网状纤维银染色。

1.3观察内容

骨髓涂片增生度，巨核细胞计数、分类 ，分类计数200个有核细胞并观察各系细胞形态特征及病理改变。血液涂片白细胞分类及形态观察。骨髓活检增生度标准依据参考文献[3]分为：减低，活跃，明显活跃，极度活跃。 网状纤维积分采用改良Manoharan等分级标准[3]。

1.4统计学分析采用统计软件包SPSS13.0进行χ2检验，以P<0.05为有统计学意义。

2结果

2.1骨髓涂片与活检增生度比较骨髓活检增生活跃及以上2996例(88.80%)，增生减低及以下的378例(11.20%)；骨髓涂片增生活跃及以上的2221例(65.83%)，增生减低及以下的1153例(34.17%)。骨髓活检增生度明显高于涂片( P<0.05)。

2.2骨髓形态与活检诊断符合率比较在AL、CML、CLL、MM、MCBM淋巴瘤、MF、MDS、AA的诊断方面，骨髓活检诊断符合率明显高于骨髓形态(P<0.05);在ITP、感染骨髓象的诊断方面，骨髓形态诊断符合率明显高于骨髓活检(P<0.05)；两者结合诊断率最高(见表1)。

表1　3374例血液病患者骨髓形态与活检诊断阳性率比较(%)

2.3402例MDS患者骨髓活检、涂片及外周血涂片观察

骨髓活检:粒系病态造血327例(81.34%)，可见ALIP(幼稚前体细胞异位)；红系病态造血206例(51.24%)，可见同一发育阶段的幼红细胞簇，可分布在骨小梁旁或表面；巨核系病态造血210例(52.24%)，可见单圆核、多圆核、多分叶巨核，小巨核及巨大巨核细胞。76例(18.91%)MDS患者可见基质水肿、骨小梁破坏现象。采用Gomori网状纤维银染色，观察87例MDS患者其中36例(41.38%)可见纤维组织增生。

骨髓涂片:粒系病态造血282例(70.15% )，主要表现为原始细胞增多，可见杆分叶胞浆颗粒减少，Pelger-Hu⊇t核、超巨多分叶等；红系病态造血324例(80.60%)，主要表现为红系增生，幼红类巨变、核浆比例增大，三核、五核等奇数核幼红细胞及巨大、超巨多核幼红细胞可见；巨核系病态造血231例(57.46%)，单圆核、多圆核、多分叶巨核，小巨核及巨大巨核细胞可见。

血涂片：粒系病态造血247例(61.44% )，红系病态造血132例(32.84%)，巨核系病态造血66例(16.42%)，可见原幼粒细胞，有核红细胞，巨核、小巨核细胞，以检见原始粒细胞(包括原幼单核细胞)及巨核细胞更有意义。

粒系病态造血的检出率骨髓活检明显高于骨髓涂片，经统计学处理P<0.05，有显著性差异；红系病态造血的检出率骨髓涂片明显高于骨髓活检，经统计学处理P<0.05，有显著性差异；巨核系病态造血：骨髓涂片的检出率高于骨髓活检，经统计学处理P>0.05，无显著性差异。

3讨论

骨髓细胞形态学检查是血液病诊断最基本的检查方法之一。骨髓涂片因其染色简单，细胞核染色质结构清晰，胞浆着色鲜艳，胞浆内嗜天青颗粒、Auer小体等特征明显，容易辨认，故在白血病分型、ITP、巨幼贫、寄生虫感染等疾病的诊断方面非常重要。在ITP、感染骨髓象的诊断方面，骨髓形态诊断符合率明显高于骨髓活检(P<0.05)。由于骨髓涂片抽吸取材的缺陷，经常致使某些骨髓增生极度活跃或减低的患者(如急性白血病、再障等)取材失败;再由于某些疾病如MM时髓内非赘生性骨髓基质细胞能产生大量黏附分子以及瘤细胞分泌M球蛋白，使骨髓瘤细胞较正常有核细胞具有与骨髓基质更强的黏附性;骨髓纤维组织的增生也阻碍细胞被抽吸的作用，导致骨髓增生度减低，不能如实地反映骨髓的真实情况。骨髓活检采用环钻法取一块完整的骨髓组织，可以弥补骨髓涂片的不足。

血涂片在骨髓细胞形态分析中是不可缺少的。急性白血病分型，由于血涂片细胞发育较骨髓成熟，遇到骨髓细胞形态难以确定时，经常要借助血片原幼细胞形态推测骨髓细胞所属。在某些血液病时血片细胞质与量的改变对诊断具有决定性的意义，如骨髓浆细胞异常增多时，血片浆细胞比例大于20%就诊断为浆细胞白血病，否则就诊断为MM。传染性单核细胞增多症时，血片异淋明显增多(>10%)，而骨髓却改变不明显。402例MDS患者血涂片分析，粒系病态造血61.44% ，红系病态造血32.84%，巨核系病态造血16.42%，特别是检见原始粒细胞(包括原幼单核细胞)及巨核细胞对诊断具有重要的参考价值。28例骨髓转移瘤中的1例，初次骨髓检查仅在血涂片中检见瘤细胞团，后经换部位复查确诊。

骨髓活检能准确地估计骨髓增生度，本组3374例血液病患者骨髓活检增生度明显好于骨髓涂片，与文献[4]报道一致。 对AL、CML、CLL、MM、MCBM、淋巴瘤、MF、MDS、AA诊断符合率，骨髓活检为93.77%，骨髓形态为79.57%，二者结合98.18%。我们对化疗后骨髓形态完全缓解的163例急性白血病患者的骨髓活检同步分析，其中有15例患者骨髓活检能检见白血病细胞簇，说明在观察化疗微小残留方面骨髓活检优于涂片[5]。骨髓活检的优点是可以直接观察造血细胞多少、分布、定位，间质水肿，骨小梁改变以及纤维细胞增生情况。骨髓活检在观察MDS粒系病态造血,特别是ALIP结构及微、小巨核[6]，巨核细胞的分布较涂片占优势。还可以观察到脂肪细胞和造血细胞的比例变化，从而对AA进行诊断[7]。

在某些低增生性白血病、骨髓纤维化、再障、转移性肿瘤等疾病时，骨髓抽吸困难，涂片往往造成漏诊；骨髓活检由于形态不典型，也会造成误差[8]。

只有把两者结合起来，才能真正反映骨髓造血情况，提高疾病诊断率。我们在研究中发现虽然骨髓活检增生度明显高于骨髓涂片，但也有123例(3.65%)患者骨髓活检的增生度低于骨髓涂片。抽吸-活检同步取材，因抽吸与活检不在同一点，扩大了取材范围，尽可能最大限度地减少漏诊；同时也减少了因人为因素带来的骨髓活检切片内基质出血而使增生程度减低的可能。骨髓涂片具有细胞形态结构清晰的优点；外周血涂片是对骨髓细胞形态学检验不可缺少的部分；骨髓活检具有观察组织结构、成分分布定位上的优势。因此，骨髓活检与骨髓细胞形态学检查相结合对提高血液病的诊断率具有非常重要的意义。

参考文献：

[1]张之南，沈悌.血液病诊断及疗效标准[M].第3版.北京：科学出版社， 2007：1-271.

[2]蒲权，杨梅如.血液病骨髓诊断病理学[M].北京：科学出版社，2002:4-6.

[3]蒲权.实用血液病理学[M].北京：科学出版社，2013：62，65.

[4]李艳萍，周凡，郭步云，等.同步骨髓涂片与骨髓活检在2761例血液疾病诊断的对比分析[J].中国实用内科杂志，2011:31(7)：536.

[5]刘志军，申建凯.骨髓活检与涂片同步观察对血液病诊断的意义[J].湖南师范大学学报(医学版)2006,3(2):5.

[6]李芳，白洁，朴文花.骨髓涂片联合骨髓活检对骨髓增生异常综合征的诊断探讨[J].中国实验诊断学，2011,15(3):508.

[7]任建平，席振芳，曹淑伟.骨髓活检与骨髓涂片同步分析对血液病诊断的探讨[J].白血病·淋巴瘤，2010,19(3):180.

[8]MusolinoA,GuazziA,NizzoliR,etal.Accuracyandrelativevalueofbonemarrowaspirationinthedetectionoflymphoidinfiltrationinnon-Hodgkinlymphoma[J].Tumori,2010,96(1):24.

基金项目：陕西省社发攻关基金资助项目(2011K12-23)

*通讯作者

文章编号：1007-4287(2016)06-0952-03

中图分类号：R552

文献标识码：A

作者简介：杨娣娣(1962-)，副主任技师，从事血液病实验诊断及研究工作。

(收稿日期：2015-11-25)

TheComparativeanalysisofbonemarrowcellmorphologyandbiopsyin3374patientswithhematologicdiseases

YANG Di-di,HAN Xiu-rui,ZHANG Li-jie,et al.

(Department of Hematology,Shaanxi provincal People’s Hospital,Xian 710068,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the value of bone marrow biopsy in diagnosis and differential diagnosis of hematological diseases. MethodsUsing bone marrow aspiration - biopsy double specimens surgery to obtain bone marrow specimen and biopsy specimens, and the cell morphology and pathological changes of blood smears,bone marrow smear and biopsy specimens of 3374 hematological diseases patients were done with comparative study.ResultsThe hyperplasia of bone marrow biopsy was significantly higher than that of smear(P<0.05);Bone marrow biopsy for acute leukemia (AL),chronic myeloid leukemia (CML),chronic lymphocytic leukemia (CLL),multiple myeloma (MM),lymphoma,bone marrow fibrosis (MF),bone marrow hyperplasia (MDS),and MCBM (AA) were diagnosed with a higher positive rate (P<0.05);The positive rate of bone marrow smear on idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) and bone marrow infection was significantly higher than that of biopsy (P<0.05).The detection rate of bone marrow biopsy in the patients with MDS was higher than that of smear;The detection rate of pathological hematopoiesis in the red line and the giant nuclear system was higher than that of bone marrow biopsy. The abnormal localization of immature precursor cells (ALIP) was observed by bone marrow biopsy,and the abnormal segments of the giant cells were observed.The pathological changes of the immature precursor cells (ALIP),the abnormal segment of the giant cells,and the matrix pathological changes were significantly superior.ConclusionThe bone marrow cell morphology and bone marrow biopsy combined with pathological examination can improve the diagnosis rate and reduce the missed diagnosis,It has very important significance for the diagnosis and differential diagnosis of hematological diseases.

Key words:Blood disease;Bone marrow biopsy;Bone marrow smear;Blood smear