皮脂、马拉色菌检测有助于头皮白屑风辨证分型

章晓鹰，徐平，张慧敏（上海中医药大学附属曙光医院，上海　201203）



皮脂、马拉色菌检测有助于头皮白屑风辨证分型

章晓鹰，徐平，张慧敏
（上海中医药大学附属曙光医院，上海201203）

摘要：目的建立有助于头皮白屑风辨证分型的客观化检测指标，并探讨头皮白屑风病因病机。方法根据中医辨证分型将白屑风患者分为血热风燥型（26例）与肠胃湿热型（51例），15例正常人群作为对照组。马拉色菌采用巢式聚合酶链反应（PCR）方法进行检测；皮脂含量采用油脂检测仪检测；红斑采用红斑评分标准进行评分。结果肠胃湿热组皮脂含量为50.55±19.00，高于血热风燥组（20.08±7.96）与正常组（19.40±11.34），差异具有统计学意义（P＜0.01）；肠胃湿热组球形、限制型马拉色菌感染率分别为68.63%、94.12%、高于血热风燥组（34.62%、61.54%）与正常组（33.33%、60.00%），差异同样具有统计学意义。结论皮脂与马拉色菌检测可以作为头皮白屑风辨证分型的辅助检测指标。

关键词：头皮白屑风；辨证分型；马拉色菌；皮脂

白屑风是一种多发于皮脂溢出区的慢性、复发性炎症性皮肤病，是皮肤科常见疾病。皮损发生于头部的称为头部白屑风，其特点是皮肤潮红、脱屑、自觉瘙痒，因其有白屑脱落，故而得名。该疾病相当于西医的脂溢性皮炎，由于现代医学对脂溢性皮炎发病机制尚未完全明确，且中医对头皮白屑风的辨证分型也缺乏客观性检测指标，为此，我们分析比较了血热风燥组与肠胃湿热组皮脂含量、马拉色菌检出率及其红斑评分，旨在探讨有助于头皮白屑风辨证分型的客观化检测指标。

1　资料与方法

1.1入选标准头皮脂溢性皮炎性患者77例（男57例，女20例，年龄18～55岁）诊断标准参照《临床皮肤病学》，轻型损害为片状灰白色糠秕状鳞屑，基底稍红，轻度瘙痒；重者表现为油腻性鳞屑性地图状斑片，可伴有渗出和厚痂；严重病例全头部被覆有油腻性厚痂，并可有臭味［1］，所有患者未内服皮质类固醇激素或抗组胺类等药物，也未外用皮质类激素，并以15例正常人群（男5例，女10例）为对照组。患者与正常对照者评价前72 h内禁止洗发。

1.2中医白屑风诊断标准

1.2.1中医诊断标准参照国家中医药管理局《中医病证诊断疗效标准·面游风》［2］和《中医外科学》［3］拟定：主要表现皮损处多为淡红色或黄红色如钱币样斑块，上覆有油腻性鳞屑或痂皮；干性多见干燥脱屑斑块；自觉瘙痒；排除其他头部皮肤疾患，如银屑病、湿疹等。

1.2.2中医证型诊断标准

1.2.2.1血热风燥证淡红色斑片，干燥、脱屑、瘙痒，舌质偏红，苔薄白，脉细数。

1.2.2.2肠胃湿热证潮红斑片，有油腻性痂屑，甚至糜烂、渗出、舌质红，苔黄腻，脉滑数。

1.3红斑评分标准在头皮23个区域中［4］，即以头顶（旋风）及头的顶点做一连线将头皮分为左右两区；以耳尖及头的顶点做一连线；从目的中心向后做一平行于矢状面的连线；以两耳后面两点及两耳前发际最低点垂直向上7 cm处分别做一平行于冠状面的连线；连接头顶（旋风）与耳朵后面；以两耳前发际最低点向后2 cm处做一平行于前额发际的连线，按孙龙红斑评分标准［5］：无可见红斑为0分；部分可见的淡红斑为1分；部分可见的浓红斑或全体均一淡红斑为2分；全体均一可见浓红斑为3分，最高69分。

1.4皮脂含量测定控制环境温度20～25℃，相对湿度60%。患者于皮脂测定前3 h内不进行剧烈运动，无显性出汗，并于实验室静坐20 min。采用SEBUMETER SM815测量仪（德国COURAGE&KHA ZAKA公司）进行检测。测试部位为症状部位，测试时剪发7mm×7mm，测试深度为1μm，在测量部位按压30s后读数。多个症状部位时取最高测定值记录。

1.5马拉色菌检测

1.5.1标本采集OpSite Transparent Dressing Tap透明胶带（美国3M）黏贴于3个固定部位头皮并收集溶于0.5 mL的裂解液 ［50 mmol/L Tris-HCl（pH：8.0），25 mmol/L EDTA，0.2%SDS，200 mmol/L NaCl］，水浴56℃，30min，直至组织完全溶解。

1.5.2引物设计按参考文献［6］设计第一轮所有7种马拉色菌共同引物与第二轮7种马拉色菌分型引物。

1.5.3巢式聚合酶链反应（PCR）检测马拉色菌反应条件与扩增条件

1.5.3.1第一轮PCR①PCR反应条件：2×PCR buffer 25μL（含dNTP、Taq酶等），10μmol/L的上游引物与下游引物各2.5 μL（终浓度为500 nmol/L），DNA模板20μL，总体积为50μL。②PCR扩增条件：标本先经95℃预变性5 min，1个循环；95℃变性30 s，55℃退火50 s，72℃延伸50 s，共20个循环。最后，72℃终延伸5 min，1个循环。

1.5.3.2第二轮PCR①PCR反应条件：2×PCR buffer 25 μL（含dNTP、Taq酶等），10 μmol/L的上游引物与下游引物各2.5 μL（终浓度为500 nmol/L），DNA模板2 μL，补充水至18 μL，总体积为50 μL。②PCR扩增条件：同上。

1.6统计学方法采用SPSS 16.0统计软件，各组间马拉色菌阳性率比较用χ2检验；正态分布定量资料采用均数±标准差（±s）表示，非正态分布采用中Sebum位数（M）、百分位数P25和P75表示。正态分布多组间采用方差分析，再进行LSD比较，非正态分布多组间比较采用非参数秩和（kruskal-wallis）检验后，再进行Mann-Whitney检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

1.2.1正常组、血热风燥组与肠胃湿热组皮脂、红斑比较肠胃湿热组皮脂明显多于血热风燥组与正常组（P＜0.01），而正常组与血热风燥组则差异无统计学意义。肠胃湿热组与血热风燥组红斑相比，差异无统计学意义，但均高于正常组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1　3组皮脂、红斑比较

表2　正常组、血热风燥组与肠胃湿热组各种类型马拉色菌检出率比较　例（%）

1.2.23组马拉色菌检出率比较肠胃湿热组球型与限制型马拉色菌检出率明显高于正常组与血热风燥组，差异且具有统计学意义，而正常组与血热风燥组差异则无统计学意义。见表2。

3　讨论

头皮白屑风主要特征为皮肤潮红、脱屑、自觉瘙痒。因其有白屑脱落，故而得名，与现代医学的脂溢性皮炎相接近，虽然脂溢性皮炎发病机制尚未完全阐明，并且，马拉色菌感染与疾病关联性也存在着争议，但许多研究还是认为马拉色菌感染可能是脂溢性皮炎或其头屑增多的主要因素之一［7］，皮脂分泌增加，个体头皮防御能力差异以及对马拉色菌等真菌产生的不同程度炎症反应［8］与角质细胞的异常增生［9］都决定了脂溢性皮炎的不同表现类型。

中医学将头皮白屑风分为血热风燥型和胃肠湿热型［10］。血热风燥型系素体阴血亏虚，加之风邪入毛孔，郁久生燥，肌肤失养所致，主要强调体质之内因为虚为主，虚实夹杂，而实验数据也提示：血热风燥型虽然马拉色菌感染率及头皮脂含量与常人相近，但却出现脱屑增多、红斑、瘙痒等炎症症状，其主要原因可能为此类患者头皮防御功能下降或角质细胞功能异常、老化所致的头皮炎症反应；而肠胃湿热型则为恣食肥甘油腻、辛辣制品，以致脾胃运化失常，化湿生热，湿热蕴阻肌肤而成，多反映了内邪与外邪交阻而致，实验数据也表明该类患者特点为头皮脂分泌旺盛，助长了马拉色菌大量繁殖，由此出现了油腻性脱屑、红斑、瘙痒等一系列头皮炎症症状。

参考文献：

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［10］王玲，景英.《外科正宗》对“白屑风”的论治［J］.长春中医药大学学报，2006，22（3）：5.

Detection of Sebum and Malassezia are Helpful for Dialectical Classification of Head Seborrheasicca

ZHANG Xiaoying，XU Ping，ZHANG huimin
Shanghai University of Traditional Chinese Medical Attached ShuguangHospital，Shanghai 201203，China

Abstract:ObjectiveIn order to establish the objective detection index for dialectical classification of （head seborrheasicca and to explore the etiology and pathogenesis of this diseases.MethodsAccording to standard clinical diagnosis of Chinese medicine，patients with head seborrheasicca were divided into blood-heat wind-dryness group（26 cases）and stomach and intestine-heat and moist group（51 cases），15 healthy subjects were taken as control group.Malassezia were detected by nested-PCR，erythema was evaluated by standard erythema score method and sebum was detected by sebum detector meter.Results Sebum was significantly higher in stomach and intestine-heat and moist group（50.55±19.00）than those in blood-heat wind-dryness group（20.08±7.96）and healthy groups（19.40±11.34，P＜0.01）.Infection rate of M.restricta and M.globosa in stomach and intestine-heat and moist group were 68.63%and 94.12%，which were also significantly higher than those in blood-heat wind-dryness group （34.62%、61.54%）and healthy groups（33.33%、60.00%）.ConclusionThe detection of sebum and Malassezia may be helpful for dialectical classification ofhead seborrheasicca.

Key words:Head seborrheasicca；Dialectical classification；Malassezia；

中图分类号：R758.7

文献标识码：A

文章编号：1672-0709（2016）01-0025-03

通信作者：张慧敏，E-mail：happy2003_1@msn.com

收稿日期：（2015-01-21）